表觀遺傳基因失活的主要機制是DNA甲基轉移酶引起的基因組DNA中CpG島的甲基化。組蛋白乙酰轉移酶（HATs）和去乙酰化酶（HDACs）通過染色質依賴的轉錄抑制或激活來控制或調節(jié)DNA甲基化。HATs將乙酰基團從乙酰輔酶A轉移到組蛋白的賴氨酸殘基上。P300是主要的HAT，它催化哺乳動物細胞中組蛋白H3在賴氨酸27（H3K27）上的乙酰化。HDACs和SIRTs是使H3K27去乙酰化的組蛋白去乙酰化酶。H3K27ac一直被視為轉錄活性基因的標志性標記，它僅存在于啟動子下游的5'區(qū)域。H3K27ac的水平也可以通過抑制或激活HATs或HDAC/SIRTs而改變。在血漿或血清中檢測到的循環(huán)H3K27ac已被證明是許多不同疾病或病理變化（如癌癥進展）的標志物。因此，檢測循環(huán)H3K27ac能夠為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調控、與組蛋白修飾相關的病理過程、疾病相關生物標志物的篩選以及開發(fā)針對組蛋白修飾的藥物提供有用信息。

EpiQuik?循環(huán)乙酰化組蛋白H3K27 ELISA試劑盒（比色法）是一種方便的工具包，允許實驗者從生物液體樣本（如人類、小鼠或大鼠的血漿和血清）中特異性地檢測循環(huán)乙酰化組蛋白H3K27（H3K27ac）。  

艾美捷EpiQuik循環(huán)乙酰基組蛋白 H3K27 ELISA試劑盒（比色法）（#P-3136-48）優(yōu)勢與特點：

1、快速高效的實驗流程，可在2.5小時內完成。

2、高靈敏度和特異性。檢測限低至0.5 ng/孔，在血漿/血清中指示量范圍內的動態(tài)范圍為1-20 ng/孔。僅識別H3K27ac，與未修飾的H3或其他同一賴氨酸位點的修飾物無交叉反應。

3、方便地包含對照用于H3K27ac的定量。

4、條帶微孔板格式使實驗靈活：可手動或高通量操作。

5、簡單、可靠且一致的實驗條件。

原理與操作流程：

本試劑盒用于測量血漿或血清中的總H3K27ac。在使用該試劑盒的實驗中，血漿/血清樣本中乙酰化于K27的組蛋白H3蛋白被涂有抗H3K27ac抗體的條帶孔捕獲。捕獲的H3K27ac蛋白隨后可被檢測抗體識別，并通過比色顯色試劑進行顯色。H3K27ac的比例與吸光強度成正比。通過與標準對照比較，可以定量H3K27ac的絕對量。

起始材料

起始材料應為血漿或血清。每次實驗所需的血漿或血清量為10至40 ?l，最佳量為30 ?l。

圖：從HL-60細胞中使用EpiQuik?總組蛋白提取試劑盒（產品編號：OP0006）制備組蛋白提取物，并將其以不同濃度加入牛血漿中。隨后利用EpiQuik?循環(huán)乙酰化組蛋白H3K27 ELISA試劑盒（比色法）測定了H3K27ac的含量。

使用說明：

EpiQuik?循環(huán)乙酰化組蛋白H3K27 ELISA試劑盒（比色法）適用于從人類、小鼠或大鼠的血漿和血清等生物液體樣本中特異性地測量循環(huán)乙酰化組蛋白H3K27（H3K27ac）。每次實驗所需的血漿或血清量為10至40 ?l，最佳量為30 ?l。由于不同個體以及正常和疾病狀態(tài)下H3K27ac的含量可能不同，建議進行重復樣本檢測以確保信號的可靠性。鑒于血漿或血清中組蛋白H3的含量可能不同，我們強烈建議同時進行總組蛋白H3的平行測量，以提高H3K27ac定量的準確性。EpigenTek提供EpiQuik?循環(huán)總組蛋白H3定量試劑盒（比色法）（產品編號：P3091），可用于此目的。

注意事項：

為了避免交叉污染，請小心將樣本或溶液加入條帶孔中。使用防氣溶膠的移液槍頭，并在每次液體轉移之間更換移液槍頭。在整個實驗過程中佩戴手套。如果手套與樣本接觸，請立即更換手套。

運輸與儲存：

該試劑盒分兩部分運輸：第一部分在常溫下運輸，第二部分在4℃的冷凍冰袋中運輸。收到試劑盒后：（1）將DAb和標準對照置于–20℃，避免光照；（2）將WB、HAB、DS、8孔檢測條和對照檢測條置于4℃，避免光照；（3）將剩余組分（SS和粘性覆蓋膜）置于室溫，避免光照。當儲存條件合適時，試劑盒的所有組分自發(fā)貨之日起穩(wěn)定期為6個月。

注意事項：

（1）使用前檢查WB（10倍洗液）中是否含有鹽沉淀。如果有，請在室溫或37℃下加熱并搖晃緩沖液，直至鹽重新溶解；（2）檢查DS（顯色液）中是否呈現藍色，這表明溶液受到污染，不應使用。為了避免污染，在將DS加入檢測孔之前，先將所需的DS量轉移到一個次級容器（試管或小瓶）中。