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EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA Easy試劑盒(比色法)原理與操作流程

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2025-07-16     
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EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA簡易試劑盒(比色法)是一套完整的優(yōu)化緩沖液和試劑,允許實驗者使用來自廣泛物種的核提取物或純化酶,以簡便快捷的方式測量DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)活性或抑制情況。這些物種包括哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒,形式多樣,包括但不限于培養(yǎng)細胞以及新鮮和冷凍組織。該試劑盒即用型,提供了進行成功的DNMT活性/抑制實驗所需的所有基本組分,無需放射性物質(zhì)或任何特殊設備。

 

核提取物可以使用您自己成功的方法制備。為了方便您并獲得最佳結(jié)果,EpigenTek還提供了一種與該試劑盒配套優(yōu)化的核提取試劑盒。核提取物可以立即使用,或在–80℃下儲存以供后續(xù)使用。純化酶可以是重組蛋白中的活性DNMTs,也可以是從細胞/組織中分離出來的。

 

EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA簡易試劑盒(比色法)是其前身試劑盒的進一步改進版本,通過簡化步驟、顯著減少檢測時間和提高檢測靈敏度來實現(xiàn)。

 

艾美捷EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA Easy試劑盒(比色法)(#P-3139-48)優(yōu)勢與特點:

1、快速:減少步驟,整個過程僅需2小時10分鐘。

2、靈敏:檢測限低至0.2納克純化酶,比前身試劑盒提高了十倍。

3、便捷:即用型,包含所有基本組分。無需放射性物質(zhì)或任何特殊設備。

4、穩(wěn)定:改進的試劑盒組分使檢測具有更大的“信號窗口”,并減少了重復樣本之間的變異。

5、靈活:96孔條帶微孔板格式使檢測適用于手動或高通量分析。EpiQuik核提取試劑盒也已針對該試劑盒進行了優(yōu)化。

EpiQuik DNMT活性/抑制ELISA簡易試劑盒(比色法)

圖:高靈敏度和特異性的證明通過使用DNA實現(xiàn)DNMT活性/抑制甲基化酶M.ssI與EpiQuik?DNMT的結(jié)合活性/抑制ELISA簡易試劑盒(比色法)。

 

原理與操作流程:

該試劑盒包含測量DNMT活性或抑制所需的所有試劑。在此檢測中,一種通用的DNMT底物被穩(wěn)定地涂覆在微孔板孔中。DNMT酶將一個甲基基團從AdoMet轉(zhuǎn)移到胞嘧啶上以甲基化DNA底物,而甲基化的DNA可以通過抗5-甲基胞嘧啶抗體進行識別。通過在微孔板分光光度計上以450納米波長讀取吸光度,通過類似ELISA的反應測量與酶活性成正比的甲基化DNA的比例或量。DNMT酶的活性與測量到的光密度強度成正比。

 

起始材料:

每次檢測所需的核提取物量可在0.5微克到20微克之間,最佳范圍為5微克到10微克。純化酶的用量可在0.2納克到100納克之間,具體取決于酶的純度和催化活性。

 

文獻引用:

Omran MM et. al. (June 2025). Dual Targeting EZH2 and Histone Deacetylases in Human Uterine Sarcoma Cells Under Both 2D and 3D Culture Conditions. J Cell Mol Med. 29(11):e70626.

Omran MM et. al. (March 2025). Utilising Human Myometrial and Uterine Fibroid Stem Cell-Derived Three Dimentional Organoids as a Robust Model System for Understanding the Pathophysiology of Uterine Fibroids. Cell Prolif. :e70025.

Bai H et. al. (February 2025). MyD88 inhibitor TJ-M2010-5 alleviates spleen impairment and inflammation by inhibiting the PI3K/miR-136-5p/AKT3 pathway in the early infection of Trichinella spiralis. Vet Res. 56(1):28.


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