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特色產品8-羥基鳥苷(8-OhG或8-oxoG)是鳥苷的氧化衍生物,由細胞RNA中的羥基自由基、單線態(tài)氧和單電子氧化劑生成。作為一種修飾的核苷酸堿基,8-OhG不僅因其含量豐富而重要,還因為它在RNA合成過程中發(fā)生的突變性錯配可能會導致基因表達錯誤。8-OhG還通過影響染色質修飾參與基因激活/抑制的表觀遺傳調控。與細胞內通過堿基切除修復途徑快速修復的氧化DNA不同,氧化RNA在氧化應激短暫沖擊后可在細胞中停留數小時,RNA上的這些氧化標記可以被識別為細胞死亡的早期指標。研究表明,8-OhG水平的增加與暴露于有害環(huán)境因素(如電離輻射、工業(yè)化學品、空氣污染、吸煙和癌癥化療)密切相關。此外,還已證實8-OhG濃度的增加與多種與年齡相關的疾病(包括癌癥、冠心病、糖尿病和阿爾茨海默病等神經退行性疾病)在病理上有聯系。與主要反映全身氧化損傷與修復速率平衡的尿液8-OhG檢測相比,直接定量正常和疾病狀態(tài)下不同細胞/組織中的8-OhG含量將能夠識別RNA的組織特異性氧化損傷。因此,可以獲得更有用的信息,以更好地理解氧化損傷與疾病之間的關系,這有助于疾病的診斷和治療。
EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒(比色法)是一套完整的優(yōu)化緩沖液和試劑套裝,用于直接檢測從任何物種(如哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒)分離的RNA的氧化RNA損傷(8-OhG)狀態(tài),形式包括但不限于培養(yǎng)細胞、新鮮和冷凍組織、石蠟包埋組織和體液樣本。
艾美捷Epigentek-EpiQuik 8-OhG RNA損傷定量直接試劑盒(比色法)(#P-6008-96)具有以下優(yōu)勢:
比色法檢測,操作步驟簡單方便,快速高效。整個過程可在3小時內完成。
高靈敏度,檢測下限低至2皮克的8-OhG。
高特異性,僅在樣本RNA的指示濃度范圍內檢測8-OhG。
直接檢測完整的RNA中的8-OhG,消除了高分子化合物(如碳水化合物和蛋白質)的干擾,這些干擾在競爭性8-OhG檢測中經常出現。
高度便捷的檢測方法,直接使用從細胞或組織中分離的RNA,無需RNA消化或水解。
包含適用于任何物種的通用陽性和陰性對照,用于定量8-OhG。
條帶式微孔板格式,適用于手動或高通量分析,使檢測更加靈活。
檢測條件簡單、可靠且一致。
原理與操作:
該試劑盒包含用于定量氧化RNA損傷(8-OhG)所需的所有試劑。在該檢測中,RNA被結合到經過特殊處理以具有高RNA親和力的條帶孔中。通過捕獲和檢測抗體檢測8-OhG。檢測到的信號被增強,然后通過在微孔板分光光度計中讀取吸光度進行比色定量。8-OhG的量與測量的吸光度強度成正比。

左圖:EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒(比色法)示意圖
右圖:將不同濃度的8-OhG標準對照品加入檢測孔中,然后使用EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒(比色法)進行測量。
起始材料與輸入量:
所需的輸入材料是RNA,可以從各種組織或細胞樣本中分離,例如培養(yǎng)瓶或微孔板中的細胞、新鮮和冷凍組織、石蠟包埋組織、血液、體液樣本等。每次檢測所需的RNA量為100納克至300納克。為了最佳定量,輸入RNA量應為300納克,因為基礎8-OhG通常少于總RNA的0.01%。
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