8-硝基鳥嘌呤（8-NG）是一種由活性氮種類（RNS）引起的突變性DNA/RNA損傷。作為一種修飾的核苷酸堿基，8-NG因其含量豐富以及在DNA復制時通過G到T的轉(zhuǎn)換突變所表現(xiàn)出的突變潛力而被認為很重要。8-NG還通過引起DNA斷裂形成單鏈DNA參與基因激活/抑制的表觀遺傳調(diào)控。此外，研究表明，8-NG濃度的增加與多種炎癥相關(guān)疾病（包括癌癥）在病理上有聯(lián)系。比較尿液/血清中的8-NG檢測主要反映了全身亞硝化損傷與修復速率之間的平衡。然而，直接定量正常/疾病狀態(tài)下不同細胞/組織中的8-NG含量可以識別DNA/RNA的組織特異性亞硝化損傷。因此，這種方法提供了更有用的信息，以更好地理解亞硝化損傷與疾病之間的關(guān)系，從而有助于疾病的診斷和治療。

EpiQuik?亞硝化（8-硝基鳥嘌呤）DNA/RNA損傷定量檢測試劑盒（比色法）是一套完整的優(yōu)化緩沖液和試劑套裝，用于直接比色檢測和定量從任何物種（如哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒）分離的DNA/RNA的亞硝化DNA/RNA損傷（8-硝基鳥嘌呤，8-NG）狀態(tài)，形式包括但不限于培養(yǎng)細胞、新鮮和冷凍組織、石蠟包埋組織和體液樣本。

艾美捷Epigentek-EpiQuik亞硝化（8-硝基鳥嘌呤）DNA/RNA損傷定量試劑盒（比色法）（#P-6009-48）具有以下優(yōu)勢：

比色法檢測，操作步驟簡單方便，快速高效。整個過程可在3小時內(nèi)完成。

高靈敏度，檢測下限低至2皮克的8-NG。

高特異性，在樣本DNA的指示濃度范圍內(nèi)僅檢測8-NG，不與其他物質(zhì)如8-OhG、8-OHdG、dG、鳥嘌呤發(fā)生交叉反應。

直接檢測完整的DNA或RNA中的8-NG，消除了高分子化合物（如碳水化合物和蛋白質(zhì)）的干擾，這些干擾在競爭性8-NG檢測中經(jīng)常出現(xiàn)。

檢測水平與高效液相色譜（HPLC）或液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）分析高度相關(guān)且接近。

高度便捷的檢測方法，直接使用從細胞或組織中分離的DNA或RNA，無需DNA/RNA消化或水解。

包含適用于任何物種的通用陽性和陰性對照，用于定量8-NG。

條帶式微孔板格式，適用于手動或高通量分析，使檢測更加靈活。

檢測條件簡單、可靠且一致。

原理與操作：

該試劑盒包含用于定量氧化RNA損傷（8-OhG）所需的所有試劑。在該檢測中，RNA被結(jié)合到經(jīng)過特殊處理以具有高RNA親和力的條帶孔中。通過捕獲和檢測抗體檢測8-OhG。檢測到的信號被增強，然后通過在微孔板分光光度計中讀取吸光度進行比色定量。8-OhG的量與測量的吸光度強度成正比。

左圖：EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒（比色法）示意圖

右圖：將不同濃度的8-OhG標準對照品加入檢測孔中，然后使用EpiQuik? 8-OhG RNA損傷定量檢測試劑盒（比色法）進行測量。

起始材料與輸入量：

所需的輸入材料是RNA，可以從各種組織或細胞樣本中分離，例如培養(yǎng)瓶或微孔板中的細胞、新鮮和冷凍組織、石蠟包埋組織、血液、體液樣本等。每次檢測所需的RNA量為100納克至300納克。為了最佳定量，輸入RNA量應為300納克，因為基礎8-OhG通常少于總RNA的0.01%。