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ProFoldin 96孔蛋白質(zhì)折疊板為蛋白質(zhì)折疊篩選提供了96種多樣化的條件。這96種折疊條件包括不同的pH值、鹽濃度和添加劑。每次實驗使用母板中的100微升溶液。每個母板的每個孔中都含有500微升溶液,可用于多次折疊各種蛋白質(zhì)的實驗。每種條件下使用約20微克的鹽酸胍溶解的包涵體蛋白。一旦確定了折疊條件,就可以為特定條件(孔位)提供制備規(guī)模折疊的制備折疊溶液。

艾美捷ProFoldin-96孔蛋白折疊板:
代碼:PFS096
組成:一個含有96種蛋白質(zhì)折疊溶液的96孔板,母板的每個孔中都有500微升溶液;1.4毫升包涵體溶解劑;4毫升中和劑和一個透明的96孔板。
蛋白質(zhì)折疊操作步驟:
樣品準(zhǔn)備:請參閱包涵體制備的協(xié)議。蛋白質(zhì)濃度約為10毫克/毫升。
板準(zhǔn)備:將板以1000xg的速度離心1分鐘,使所有溶液都收集到孔底。輕輕取下板蓋,將100微升溶液轉(zhuǎn)移到透明板中。在4℃下預(yù)孵育板,并在整個蛋白質(zhì)折疊過程中將試劑保持在4℃。
稀釋:將上述2微升蛋白質(zhì)溶液稀釋到每個孔中的溶液中。然后在4℃下孵育板4小時。
中和:將8微升中和劑與每個孔中的溶液混合。在4℃下孵育板過夜。
折疊產(chǎn)物分析
溶解度 :未折疊的蛋白質(zhì)會形成肉眼可見的沉淀,可通過在405納米(OD405)處的光散射測量來檢測。溶解的蛋白質(zhì)可以通過SDS - PAGE進(jìn)行分析。為此,將板以1000xg的速度離心10分鐘,然后將每個孔中的10微升上清液與10微升水和7微升4xSDS - PAGE上樣緩沖液混合。
活性測試 :使用活性測定(催化或結(jié)合活性)來檢查蛋白質(zhì)活性。在測定中將折疊產(chǎn)物稀釋10到20倍。例如,如果測定反應(yīng)體積為100微升,則在每次反應(yīng)中加入5到10微升的折疊產(chǎn)物。
對于功能未知或無可用測定的蛋白質(zhì) :折疊良好的蛋白質(zhì)可以通過離子交換、親和或凝膠排阻色譜柱在天然緩沖液中進(jìn)行純化。CD或SEC - MALS分析僅適用于純化的蛋白質(zhì)樣品。
ProFoldin-96孔蛋白折疊板相關(guān)產(chǎn)品:
旋轉(zhuǎn)柱蛋白質(zhì)折疊篩選試劑盒 SFC01 - 10
稀釋膜蛋白折疊篩選試劑盒 MPS10 - 20
旋轉(zhuǎn)柱膜蛋白折疊篩選試劑盒 MFC01 - 20
膜蛋白提取試劑盒 MPE01 - 12S
易用蛋白質(zhì)測定試劑 EPA001
核酸去除試劑盒 NAR911
蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和聚集測定試劑盒 PSA200
ProFoldin專注于蛋白質(zhì)科學(xué)領(lǐng)域的研究與開發(fā)。ProFoldin提供一系列與蛋白研究相關(guān)的產(chǎn)品和服務(wù),包括蛋白除鹽、蛋白折疊、膜蛋白提取、聚合酶、高通量檢測試劑和熒光染料等。其中蛋白折疊柱和試劑、膜蛋白提取試劑盒為特色產(chǎn)品,成為了廣大科研工作者研究蛋白尤其是膜蛋白有力的科研工具。
艾美捷科技是ProFoldin的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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