翻譯后修飾（PTMs）之于蛋白質(zhì)，就像七十二變之于孫悟空。翻譯后修飾是對(duì)蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)、嚴(yán)格調(diào)節(jié)的改變，它通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、空間定位和互作、從而控制其功能，PTMs主要包括磷酸化、甲基化、乙酰化（Ac）、泛素化（Ub）、SUMO1或2/3等方式，但還有許多其它的，PTMs的錯(cuò)誤調(diào)節(jié)與癌癥、心力衰竭、神經(jīng)和代謝性疾病等的進(jìn)展有關(guān)。

蛋白質(zhì)發(fā)生PTM后，會(huì)顯著改變蛋白的理化及構(gòu)象，從而直接改變蛋白的結(jié)合能力與功能。因此,即使蛋白的表達(dá)水平?jīng)]有改變，但如果翻譯后修飾的狀態(tài)發(fā)生改變，蛋白的功能也會(huì)顯著變化。最終，PTM實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)功能的指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。

PTM對(duì)蛋白功能影響是多樣性的，表現(xiàn)在以下三個(gè)方面：（1）同一蛋白質(zhì)，即使只發(fā)生一種類型的修飾，也會(huì)賦予其多種功能；（2）同一個(gè)蛋白的同一種翻譯后修飾，如果發(fā)生在不同的氨基酸上，其功能也不同；（3）同一蛋白還可能具有不同的修飾，其功能和參與的生物過程就更為復(fù)雜。下圖以intermediate filament protein（IF蛋白）為例：

NatureReviews Molecular Cell Biology 15, 163–177 (2014)

IF蛋白的各種修飾與功能

蛋白修飾及功能的多樣性是維持機(jī)體復(fù)雜精準(zhǔn)調(diào)控的基礎(chǔ)，但同時(shí)也給研究PTM的科研人員的研究造成了很多的困擾，為什么蛋白質(zhì)翻譯后修飾的鑒定難度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于未發(fā)生修飾的蛋白質(zhì)的鑒定了，主要有以下幾點(diǎn)：

1.發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)樣本量相對(duì)較少

2.發(fā)生修飾時(shí)形成的共價(jià)鍵非常不穩(wěn)定，且處于動(dòng)態(tài)變化中

3.修飾與未修飾的蛋白及多種修飾形式的蛋白常混合存在

針對(duì)于這些困擾，Cytoskeleton公司開發(fā)了一款名為 Signal-Seeker™ 的試劑盒，用于分析各種蛋白翻譯后修飾的情況：如賴氨酸乙酰化、泛素化、SUMO化、磷酸化等修飾的鑒定及各種修飾的上調(diào)下調(diào)表達(dá)。

Signal-Seeker™試劑盒使用親和磁珠從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中提取并富集修飾蛋白。然后通過標(biāo)準(zhǔn)的Western blot程序分析濃縮蛋白群，最終用戶使用自身的抗體檢測(cè)所需的修飾蛋白，Signal-Seeker™試劑盒檢測(cè)流程如下圖：

Signal-Seeker™試劑盒的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)：

1.Signal-Seeker™試劑盒配套相應(yīng)的抗體，能對(duì)任意蛋白的轉(zhuǎn)錄后修飾進(jìn)行研究。

2.Signal-Seeker™試劑盒提供通用的裂解過濾系統(tǒng)及定量工具，能輕松從給定的細(xì)胞或組織裂解液中提取蛋白并進(jìn)行總蛋白的定量。

3.Signal-Seeker™親和磁珠，富集效果無與倫比,配合控制磁珠，提供PTM蛋白提供精準(zhǔn)定量。

4.Signal-Seeker™親和磁珠可用于捕獲PTM修飾的蛋白，然后用于進(jìn)行進(jìn)一步的分析（如Western blot和質(zhì)譜檢測(cè)）。

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5.關(guān)鍵的去修飾化抑制劑，防止檢測(cè)過程中的去修飾。

6.Signal-Seeker™ kit可以用于研究多重PTM的串?dāng)_（例如目標(biāo)蛋白的泛素化和乙酰化）。

7.市面上最全面的PTM套件：包括通用裂解過濾系統(tǒng)、蛋白質(zhì)定量工具、IP濃縮試劑、洗滌試劑、洗脫試劑、化學(xué)發(fā)光試劑。

8.試劑盒對(duì)內(nèi)源性PTM研究靈敏度進(jìn)行了優(yōu)化，這對(duì)于解釋PTM的生理作用至關(guān)重要。

Signal-Seeker™試劑盒應(yīng)用實(shí)例：

Signal-Seeker™試劑盒研究Rac1蛋白的單泛素化和多元泛素化

用MG-132預(yù)處理Swiss 3T3 細(xì)胞，然后添加/不添加CNF1 (CN04)處理3h，用BK161 kit來進(jìn)行 IP，裂解液上樣量300 μg /次。 Lane 1: 3 μg 未處理的裂解液； Lane 2: Ubiquitin親和磁珠(UBA01) +未處理的裂解液； Lane 3: UBA01 + CN04處理的裂解液； Lane 4: Ubiquitin 對(duì)照磁珠(CUB02) +未處理的裂解液； Lane 5: CUB02 + CN04處理的裂解液.

Signal-Seeker™ kit研究PD-L1蛋白的PTM串聯(lián)干擾（cross-talk）

EGF處理1h后的細(xì)胞能明顯的檢測(cè)出PD-L1蛋白同時(shí)發(fā)生了泛素化（Ub）、酪氨酸磷酸化（pY）、乙酰化(Ac)

PTM串?dāng)_：PTM可能在蛋白質(zhì)功能的調(diào)節(jié)方面協(xié)同作用, 這一過程被稱為 PTM串?dāng)_，PTM串?dāng)_被認(rèn)為是一種重要的細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)制，對(duì)p53、tau和tubulin等模式蛋白的廣泛研究證實(shí)了PTM協(xié)同作用是調(diào)節(jié)這些蛋白功能的前提。

艾美捷科技為您提供Cytoskeleton公司研發(fā)的用于各種轉(zhuǎn)錄后修飾相關(guān)的試劑盒、抗體、及親和磁珠:

SUMOylation 1相關(guān)產(chǎn)品：

SUMOylation 2/3 相關(guān)產(chǎn)品：

磷酸化相關(guān)產(chǎn)品：

賴氨酸乙酰化相關(guān)產(chǎn)品：

泛素化相關(guān)產(chǎn)品：

已發(fā)表精彩文章賞析:

Barysch S. et al. 2014. Identification and analysis of endogenous SUMO1 and SUMO2/3 targets in mammalian cells and tissues using monoclonal antibodies. Nat Protoc. 9(4):896-909

Becker J. et al. 2013. Detecting endogenous SUMO targets in mammalian cells and tissues. Nature Struc. & Mol. Biol. 20, 525-531.

Pop, M. et al. 2004. Isotype-specific degradation of Rac activated by the cytotoxic necrotizing factor 1.J. Biol.Chem. 279: 35840-35848

LaBarge et al. 2015. p300 is not required for metabolic adaptation to endurance exercise training. The FASEB Journal article doi: 10.1096/fj.15-281741.

Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTM）、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長(zhǎng)，既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動(dòng)蛋白，微管蛋白，馬達(dá)蛋白，小G蛋白，細(xì)胞外基質(zhì)，活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)，抗體，檢測(cè)與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線還在不斷的擴(kuò)大中。此外，公司還提供微管蛋白，肌動(dòng)蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。

艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級(jí)代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological等，可以在第一時(shí)間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

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