膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一。膠原蛋白生成的失調(diào)可能導(dǎo)致如纖維化（膠原蛋白過多）或骨關(guān)節(jié)炎（膠原蛋白過少）等病理狀態(tài)。因此，在許多與疾病相關(guān)的研究中，測量膠原蛋白的生成是重要的。QuickZyme敏感組織膠原蛋白檢測試劑基于羥脯氨酸的檢測。羥脯氨酸是一種非蛋白質(zhì)氨基酸，在哺乳動物中主要出現(xiàn)在膠原蛋白中。組織水解產(chǎn)物中的羥脯氨酸可以用作組織中膠原蛋白含量的直接測量。

膠原蛋白的測量從在6M鹽酸中于95°C完全水解組織樣本開始。在水解產(chǎn)物中，使用Prockop和Udenfriend描述的方法的改進(jìn)版本（《分析生物化學(xué)》，1960年，1: 228-239）來定量羥脯氨酸殘基。該檢測測量樣本中存在的總羥脯氨酸量，這代表了樣本中存在的所有類型的膠原蛋白，而不會區(qū)分膠原蛋白的類型以及前膠原蛋白、成熟膠原蛋白和膠原蛋白降解產(chǎn)物。

與其他基于羥脯氨酸的檢測相比，QuickZyme敏感組織膠原蛋白檢測沒有基質(zhì)效應(yīng)，也不需要對水解產(chǎn)物進(jìn)行稀釋，從而能夠在膠原蛋白濃度較低的小樣本中進(jìn)行測量。該檢測方法簡單，并且不需要酸水解后的干燥步驟，這通常需要特殊設(shè)備。

現(xiàn)在可以在膠原蛋白水平較低的小組織樣本中輕松確定膠原蛋白

艾美捷QuickZyme Biosciences敏感組織膠原蛋白檢測試劑盒基于通過膠原蛋白的酸水解獲得的羥脯氨酸殘基的定量比色測定。敏感組織膠原蛋白檢測沒有基質(zhì)效應(yīng)，也不需要對水解產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步稀釋，從而能夠在如肝臟這樣的膠原蛋白濃度較低的小樣本中進(jìn)行測量。該檢測方法簡單，并且不需要酸水解后的干燥步驟，因此在水解步驟之后，可以在快速（小于2小時(shí)）且簡便（96孔板格式）的檢測中進(jìn)行。

數(shù)據(jù)分析：

數(shù)據(jù)分析有幾種可選的方法。建議使用一個(gè)軟件包來處理數(shù)據(jù)，該軟件包采用回歸曲線擬合程序。如果沒有可用的軟件包，可以按照以下方法手動計(jì)算膠原蛋白濃度。

1、計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的重復(fù)讀數(shù)的平均值，并從所有讀數(shù)中減去空白的平均值。

2、通過在y軸上繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均A570（減去空白）與x軸上的膠原蛋白含量相對應(yīng)（0-6.25–12.5–25-50–100–200–300微克膠原蛋白/毫升水解產(chǎn)物），創(chuàng)建一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。在圖表上的點(diǎn)之間畫出最佳擬合的線性化曲線。使用這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線將測試樣本的A570值轉(zhuǎn)換為微克/毫升膠原蛋白。這樣就可以得到水解樣本中的膠原蛋白濃度。如果水解后包括了稀釋步驟，這個(gè)濃度應(yīng)該乘以稀釋因子，以得到水解樣本中的膠原蛋白濃度。

典型的膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線

相關(guān)產(chǎn)品：

Total Collagenassay

Hydroxyproline assay

Sensitive Tissue Hydroxyproline assay

Soluble Collagen assay

Total Protein assay

GranzymeB activityReagent Set

Human MMP-2 activity assay

Human MMP-7 activity assay

Human MMP-8 activityassay

Human MMP-9 activityassay

MouseMMP-9 activity assay

Human MMP-14 activity assay

HumanTIMP-1 ELISA

Human Urokinase (uPA)ELISA

艾美捷科技是QuickZyme Biosciences的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。