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“當(dāng)?shù)鞍?蛋白相互作用、翻譯后修飾與超高分辨率成像成為常規(guī)實驗時,決定成敗的往往不是儀器,而是那 50 uL 的填料。”
一、為什么科研級樹脂需要“重新被定義”?
傳統(tǒng)瓊脂糖填料誕生于 1960 年代,其設(shè)計初衷是滿足毫克級純化;
而今天的科研場景更關(guān)注:
納克級富集——質(zhì)譜前處理;
活細(xì)胞裂解液一次捕獲——避免稀釋丟失;
多標(biāo)簽并行 Pull-down——系統(tǒng)生物學(xué);
可逆、溫和的洗脫——保留復(fù)合物天然構(gòu)象。
Nanotag 樹脂(Resins)系列以單域抗體(sdAb)為配基,將親和填料的性能邊界推向“微量、精準(zhǔn)、模塊化”,為上述需求提供了系統(tǒng)級解決方案。
二、Nanotag 樹脂家族速覽
Cat. No. | 名稱 | 配基類型 | 場景關(guān)鍵詞 |
N0310 / N0315 | GFP Selector | 抗 GFP sdAb | 蛋白定位、CRISPR 報告基因 |
N0410 / N0415 | RFP Selector | 抗 RFP sdAb | 雙色成像富集 |
N0510 | TagFP Selector | 廣譜熒光蛋白 sdAb | 未知突變體篩選 |
N3210 | mNeonGreen Selector | 抗 mNeonGreen sdAb | 超分辨標(biāo)記后回收 |
N0210 | GST Selector | 抗 GST sdAb | 經(jīng)典 pull-down 升級 |
N0110 | MBP Selector | 抗 MBP sdAb | 膜蛋白增溶后復(fù)合物捕獲 |
N1510-N1517 | ALFA Selector 系列 | 抗 ALFA 標(biāo)簽 sdAb | 通用標(biāo)簽,可與 GFP 組合 |
N1810 | Ubiquitin K48 Selector | 抗 K48 鏈 sdAb | 蛋白酶體通路研究 |
N1910 | Ubiquitin K63 Selector | 抗 K63 鏈 sdAb | 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、自噬 |
N2510 | Ubiquitin pan Selector | 泛抗泛素 sdAb | 總泛素化組學(xué) |
N0010-S / N0015-S | Selector Control | 無配基 | 背景扣除、陰性對照 |
三、技術(shù)核心:單域抗體配基帶來的三大差異
高密度固定
sdAb 僅 12–15 kDa,可在同一瓊脂糖微球表面實現(xiàn) 3–5 倍于傳統(tǒng) IgG 的配基密度,從而帶來 uL 級樹脂即可完成 ng 級富集 的能力。
溫和洗脫
sdAb 與抗原結(jié)合界面以氫鍵/疏水作用為主,無多價 Fc 介導(dǎo)的強(qiáng)親和,因此可在 pH 6.0 或含 2 mM ALFA 競爭肽 條件下定量洗脫,復(fù)合物完整性顯著優(yōu)于低 pH 甘氨酸法。
磁珠即用
N0315、N0415、N1515–N1517 提供磁珠版本,2 分鐘磁分離 即可完成裂解液預(yù)澄清、IP、洗滌三步,與 96 孔磁力板兼容,滿足自動化平臺需求。
四、場景化價值:讓樹脂成為實驗設(shè)計的“積木”
科研痛點 | Nanotag 樹脂切入方式 |
超分辨成像后,需回收熒光蛋白驗證互作 | 用 GFP Selector 磁珠 30 min 內(nèi)捕獲 GFP-tagged 蛋白,洗脫后直接質(zhì)譜 |
研究 K63 泛素鏈在自噬中的動態(tài) | Ubiquitin K63 Selector 樹脂區(qū)分 K63 與 K48,避免抗體交叉反應(yīng) |
同時驗證多個熒光標(biāo)簽的亞細(xì)胞定位 | ALFA Selector + GFP Selector 雙標(biāo)簽并行 IP,節(jié)省樣品 |
膜蛋白復(fù)合物難以在非變性條件下富集 | MBP Selector 樹脂與 MBP 融合膜蛋白兼容 0.03 % DDM 條件 |
高通量 CRISPR 篩選后回收報告蛋白 | 96 孔磁珠版 GFP Selector 每孔僅需 5 uL 樹脂 |
五、與經(jīng)典填料對比:性能而非體積
特征 | 傳統(tǒng)抗 GFP IgG-瓊脂糖 | Nanotag GFP Selector |
配基分子量 | ~150 kDa | ~15 kDa |
推薦樹脂體積 | 25–50 uL | 5–10 uL |
洗脫條件 | pH 2.7 甘氨酸 | pH 6.0 或 2 mM ALFA 肽 |
磁珠版本 | 罕見 | 標(biāo)準(zhǔn) (N0315) |
批次重現(xiàn)性 | 動物血清差異大 | 大腸桿菌表達(dá),序列固定 |
在“微量、原位、多維”成為基礎(chǔ)科研主旋律的當(dāng)下,Nanotag 樹脂把傳統(tǒng)“純化工具”升級為“發(fā)現(xiàn)工具”。
當(dāng)你只需要 5 uL 樹脂即可回收 GFP-tagged 轉(zhuǎn)錄因子;
當(dāng)你用 30 min 完成 K63 泛素鏈富集并直接送去質(zhì)譜;
當(dāng)你在 96 孔板中并行驗證 48 種突變體的互作網(wǎng)絡(luò)——
你會意識到,實驗設(shè)計的瓶頸已經(jīng)從“材料”轉(zhuǎn)向“想象力”。
Nanotag 樹脂,讓每一微升樣品都承載最大化的科學(xué)信息。
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