神經(jīng)元通過突觸互相交流傳遞信號，電化學信號在此處轉換為生化信號。突觸前膜釋放神經(jīng)遞質進入突觸間隙，突觸后膜上的相應受體蛋白接收這些信號。在此過程中，突觸小泡與突觸前膜融合，使小泡內膜短暫暴露于細胞外空間。

在培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元中，可利用培養(yǎng)基中添加的抗體結合突觸小泡內腔蛋白表位。這些抗體在隨后的網(wǎng)格蛋白介導的內吞作用中被納入突觸小泡。通過這種方法，可以選擇性地標記具有活躍小泡循環(huán)的突觸（圖 1）。例如，若使用針對 Synaptotagmin1 的抗體，所有活躍突觸均會獨立于其神經(jīng)遞質表型而被標記（圖 2）。相比之下，針對囊泡 GABA 轉運體（VGAT）的抗體可選擇性地標記僅活躍的抑制性突觸。

當使用預先標記的抗體時，無需額外固定或應用任何二抗，即可直接觀察小泡。

或者，可將一抗與 FluoTags 納米標記的二抗預先孵育，形成一抗 - 二抗復合物。這些復合物隨后可像預先標記的一抗一樣用于活神經(jīng)元的直接標記。

 圖 1：利用針對突觸小泡蛋白內腔表位的熒光標記抗體標記循環(huán)突觸小泡。

 圖 2：標記培養(yǎng)海馬神經(jīng)元中的循環(huán)小泡（產(chǎn)品 105 311AF）。活細胞與標記抗體在培養(yǎng)基中孵育 30 分鐘。

內吞作用結束后，突觸小泡腔通過質子 ATP 酶重新酸化。由此產(chǎn)生的質子梯度對突觸小泡重新裝載神經(jīng)遞質分子至關重要，這一過程由特定的囊泡神經(jīng)遞質轉運體介導，為下一次融合做準備。CypHer5E 和 AcidiFluor Orange 等 pH 敏感型熒光染料僅在酸性環(huán)境中發(fā)出熒光。相應的抗體偶聯(lián)物非常適合檢測活細胞中的循環(huán)突觸小泡，因為它們僅在抗體完全內化且突觸小泡腔重新酸化后才會發(fā)光（圖 2）。

Synaptic Systems 提供了一系列針對突觸小泡蛋白內腔表位的抗體，這些抗體適用于基于活動的循環(huán)小泡標記。我們提供多種不同熒光標記的偶聯(lián)物，以滿足您的確切需求。

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