腸上皮細(xì)胞為抵御通過(guò)腔管進(jìn)入身體的細(xì)菌、抗原和有毒物質(zhì)提供了一個(gè)保護(hù)屏障。這些細(xì)胞受到調(diào)節(jié)，以分化和增殖來(lái)建立它們的保護(hù)功能。已有研究表明，位于上皮細(xì)胞下方的腸肌成纖維細(xì)胞在調(diào)節(jié)腸上皮細(xì)胞方面發(fā)揮作用。

永生化小鼠腸肌成纖維細(xì)胞是從C57BL/6J小鼠的結(jié)腸粘膜中分離出來(lái)的，并用SV40大T抗原轉(zhuǎn)染。它保留了原始的肌成纖維細(xì)胞表型，并表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白、波形蛋白和Ⅰ型膠原。也檢測(cè)到與免疫反應(yīng)相關(guān)的蛋白，如TLR-4、CD14、MD2和IκBα。此外，這些細(xì)胞對(duì)脂多糖（LPS）處理有反應(yīng)，能夠引發(fā)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致IκBα降解和p38 MAPK磷酸化。它是研究腸損傷、纖維化、炎癥、組織修復(fù)和腸組織免疫調(diào)節(jié)的寶貴工具。使用西方印跡（Western blot）和免疫熒光染色來(lái)確定細(xì)胞標(biāo)記和蛋白表達(dá)。

艾美捷abm永生化小鼠腸肌成纖維細(xì)胞基本參數(shù)：

貨號(hào)：T0565

名稱(chēng)：永生化小鼠腸肌成纖維細(xì)胞

生物體：小鼠 (M. musculus)

組織：腸

供體歷史：C57BL/6J 小鼠

生長(zhǎng)特性：貼壁，紡錘形

細(xì)胞類(lèi)型：永生化細(xì)胞

儲(chǔ)存條件：液氮的氣相，或低于-130°C

運(yùn)輸條件：干冰運(yùn)輸

產(chǎn)品格式：冷凍

預(yù)期用途：本產(chǎn)品僅用于實(shí)驗(yàn)室研究。不適用于任何動(dòng)物或人類(lèi)的治療用途，任何人類(lèi)或動(dòng)物的消費(fèi)，或任何診斷用途。

生物安全等級(jí)：II

分析證書(shū)：有關(guān)批次特定的測(cè)試結(jié)果，請(qǐng)參考可在 www.abmgood.com 查找的適用的分析證書(shū)。

生長(zhǎng)條件：需要使用PriCoat? T25燒瓶（G299）或應(yīng)用細(xì)胞外基質(zhì)（G422）以促進(jìn)細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/鏈霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO?

拆包和儲(chǔ)存說(shuō)明：

1. 目視檢查包裝容器是否有泄漏或破損的跡象。

2. 立即將干冰包裝中的冷凍細(xì)胞轉(zhuǎn)移到低于-130°C的溫度中，Z好在液氮?dú)庀鄡?chǔ)存，直到準(zhǔn)備使用。

為了確保Z高的活性水平，在收到后盡快解凍小瓶并開(kāi)始培養(yǎng)。如果需要繼續(xù)儲(chǔ)存，小瓶應(yīng)僅儲(chǔ)存在低于-130°C或液氮?dú)庀嘀小２灰?70°C下儲(chǔ)存，因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)致活性喪失。

永生化小鼠腸肌成纖維細(xì)胞解凍協(xié)議：

1. 在37°C水浴中快速搖晃解凍細(xì)胞（Z多2分鐘）。瓶蓋應(yīng)保持在水面之上，以最小化污染風(fēng)險(xiǎn)。

2. 用70%乙醇噴灑并擦拭瓶身外部以消毒。從這一點(diǎn)開(kāi)始，所有操作應(yīng)嚴(yán)格在生物安全柜內(nèi)使用無(wú)菌條件進(jìn)行。

3. 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有5ml預(yù)加熱的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基的15ml無(wú)菌圓錐管中。以125xg離心細(xì)胞5-7分鐘。

4. 在不干擾細(xì)胞沉淀物的情況下吸去上清液。將細(xì)胞沉淀物重新懸浮在推薦的預(yù)加熱的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，并分裝到T25培養(yǎng)瓶中。

5. 在推薦的條件下培養(yǎng)細(xì)胞。

永生化小鼠腸肌成纖維細(xì)胞文獻(xiàn)參考：

Kawasaki, H., Ohama, T., Hori, M., & Sato, K. (2013). Establishment of mouse intestinal myofibroblast cell lines. World journal of gastroenterology, 19(17), 2629–2637.