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G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs),是細胞表面的Z大受體家族之一,廣泛參與調(diào)節(jié)細胞對外界信號的響應(yīng)。它們在多種生理過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,包括視覺、嗅覺、神經(jīng)傳遞、激素響應(yīng)和免疫功能等。GPCR的異常功能與多種疾病有關(guān),因此,GPCR檢測在藥物發(fā)現(xiàn)和疾病診斷中具有極其重要的意義。
Screen Gs偶聯(lián)GPCR以監(jiān)測熒光板讀取器或成像系統(tǒng)上cAMP的增加。標準庫存帶有CMV啟動子。
在您選擇的活細胞中實時測量循環(huán)AMP信號。綠色熒光的增加表明cAMP的產(chǎn)生增加。cADDis經(jīng)基因編碼并包裝在BacMam病毒載體中,可輕松轉(zhuǎn)導(dǎo)到多種細胞類型中,包括原代和iPSC衍生的細胞系。只需將cADDis添加到你的細胞中,第二天就可以在標準熒光顯微鏡和自動讀板器上測量強大的信號。

Montana Molecular-GPCR檢測試劑盒(#U0200G)中包含的材料:
綠色增強型cADDis cAMP傳感器BacMam
500 mM的丁酸鈉,溶于H2O
帶有核紅標記的β2腎上腺素受體BacMam
10 mM的異丙腎上腺素,溶于10 mM的鹽酸中
GPCR檢測參考文獻:
S. Hoare, et al. Quantifying the Kinetics of Signaling and Arrestin Recruitment by Nervous System G-Protein Coupled Receptors. Frontiers in Cellular Neuroscience. January 2022.
S. Hoare, T. Hughes. Biosensor Assays for Measuring the Kinetics of G-Protein and Arrestin-Mediated Signaling in Live Cells. The Assay Guidance Manual. September 2021.
S. Hoare, et al. Analyzing kinetic signaling data for G-protein-coupled receptors. Nature Scientific Reports. July 2020.
S. Hoare, et al. A kinetic method for measuring agonist efficacy and ligand bias using high resolution biosensors and a kinetic data analysis framework. Nature Scientific Reports. Feb 2020.
GPCR檢測技術(shù):
熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)
FRET是一種利用兩個熒光分子能量轉(zhuǎn)移來檢測蛋白質(zhì)間相互作用的技術(shù)。在GPCR檢測中,通過標記GPCR與其下游效應(yīng)分子,可以實時監(jiān)測受體激活后的構(gòu)象變化。
細胞膜片鉗技術(shù)
細胞膜片鉗技術(shù)可以用來測量細胞膜上的離子通道電流變化,從而評估GPCR激活后對離子通道的影響。
放射性配體結(jié)合分析
通過使用放射性標記的配體,可以檢測GPCR與其配體的結(jié)合親和力,是一種傳統(tǒng)的GPCR功能檢測方法。
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)
ELISA技術(shù)可以用來檢測GPCR激活后釋放的細胞因子或酶的量,從而間接反映GPCR的活性。
GPCR檢測相關(guān)產(chǎn)品:
#U0600R Red GECO Ca2+ Assay Kit
#D0400R Red PIP2 Assay Kit
#U0601R Mitochondrial-targeted Red GECO Assay Kit
#D0241G Green Membrane-Targeted fS15 cADDis cAMP
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