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VitroCol? 是一種 3 mg/ml 的 I 型人去端膠原溶液,用于 2D 和 3D 細(xì)胞培養(yǎng),或作為膠原標(biāo)準(zhǔn)品。VitroCol 膠原蛋白由人類新生兒成纖維細(xì)胞自然分泌,然后經(jīng)過加工和純化以產(chǎn)生天然產(chǎn)生的人類膠原蛋白。
VitroCol膠?原蛋白由人新生兒成纖維細(xì)胞自然分泌。人成纖維細(xì)胞在合適的條件下培養(yǎng),使成纖維細(xì)胞能夠自然有效地分泌細(xì)胞外基質(zhì)。然后對細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行處理和純化,以產(chǎn)生天然產(chǎn)生的人類膠原蛋白。
VitroCol? 含有大約 97% 的 I 型人類膠原蛋白,其余由 III 型膠原蛋白組成。VitroCol? 以大約 3 mg/ml 的濃度提供。每個特定批次的濃度在購買每種產(chǎn)品時提供的分析證書上提供。VitroCol? 是可溶性去端膠原蛋白,溶于 0.01 N HCI 中,因此 pH 值為 2。
VitroCol? 特別適用于人類細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),用于表面包衣、提供培養(yǎng)細(xì)胞薄層的制備或用作固體凝膠。VitroCol? 人膠原蛋白采用用戶友好的包裝,便于使用和儲存。VitroCol? 經(jīng)過無菌過濾,以即用型溶液形式提供。

艾美捷VitroCol,人去端膠原溶液(ABM-5007-20ML)參數(shù):
參數(shù)、測試和方法 VitroCol I? 型膠原蛋白 #5007
滅菌方法 過濾
提取方法 酶 - atelocollagen
形式 溶液
包裝尺寸 20 毫升、100 毫升
儲存溫度 2-10°攝氏度
保質(zhì)期 自收到之日起至少 6 個月
膠原蛋白濃度 - 縮二脲
2.9-3.2毫克/毫升
膠原蛋白純度 - 銀染
>99%
酸堿度 1.9-2.1
動力學(xué)凝膠測試(分鐘) <40
凝膠形成管測試(分鐘) <40
原纖維生成(吸光度單位) >0.5
電泳圖案 - 考馬斯藍(lán)
特征:
無菌性 - USP 改良 無增長
內(nèi)毒素 - 鱟劑 <5.0 歐標(biāo)/毫升
滲透壓 (mOsmo H2O/kg) <35
細(xì)胞附著檢測 通過
源 人新生兒成纖維細(xì)胞
水凝膠楊氏模量 E (Pa) 特征
涂裝程序:
注意: 使用這些建議作為指南,以確定培養(yǎng)系統(tǒng)的合適的包被條件。
根據(jù)需要將所需體積的膠原蛋白溶液從瓶子轉(zhuǎn)移到稀釋容器中。使用無菌 0.01 N HCl 溶液稀釋至所需濃度。典型的工作濃度范圍為 50 至 100 ug/ml。
向培養(yǎng)表面加入適量稀釋的 VitroCol? 材料。
在室溫下孵育,蓋上蓋子,1-2小時。吸出任何剩余的材料。或者,在室溫下孵育直至表面干燥。
用無菌介質(zhì)或 PBS 仔細(xì)沖洗涂層表面,避免劃傷表面。
涂層表面可供使用。如果保持無菌性,它們也可以儲存在 2-8°C 的潮濕或風(fēng)干下。
3-D凝膠制備程序:
將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養(yǎng)基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中,輕輕旋轉(zhuǎn)。
使用無菌 0.1M NaOH 將混合物的 pH 值調(diào)節(jié)至 7.0-7.5。仔細(xì)監(jiān)測pH值調(diào)節(jié)(pH計、酚紅或pH試紙)
用無菌水將最終體積調(diào)整至總共 10 份。
為防止凝膠化,請將混合物溫度保持在 2 – 10°C。
要形成凝膠,加熱至37°C。 等待大約 90 到 120 分鐘以形成凝膠。
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