原癌基因c-fos屬于即刻早期基因（IEGs），在大腦中快速且短暫地表達(dá)（Herrera和Robertson，1996）。它可以被各種刺激誘導(dǎo)，通常用作神經(jīng)元激活的標(biāo)記（Morgan等人，1987；Gaiddon等人，1996；Chowdhury等人，2000；Gallo等人，2018；Wakhloo等人，2020）。像許多其他IEGs一樣，c-Fos是一種轉(zhuǎn)錄因子。它與c-Jun形成異二聚體結(jié)合到AP-1結(jié)合位點(diǎn)，并增強(qiáng)許多其他涉及增殖、分化、凋亡或炎癥的基因的表達(dá)（Ye等人，2014）。

異二聚體bZIP轉(zhuǎn)錄因子c-Fos/c-Jun與DNA結(jié)合的圖示

您的c-Fos實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)

動(dòng)物處理：在規(guī)劃涉及動(dòng)物的c-Fos實(shí)驗(yàn)時(shí)，您應(yīng)該意識(shí)到可能影響您研究的技術(shù)陷阱。例如，您應(yīng)該考慮到c-Fos表達(dá)是時(shí)間依賴的，易受壓力影響，并且可以在幾分鐘后被檢測(cè)到（Herrera和Robertson，1996）。重要的是要考慮到許多因素，如動(dòng)物處理本身（例如，針頭注射）或在黑暗期暴露于光線下（晝夜節(jié)律激活）可能會(huì)影響c-Fos表達(dá)（Asanuma和Ogawa，1994；Herrera和Robertson，1996）。因此，實(shí)驗(yàn)必須精確規(guī)劃和進(jìn)行，并設(shè)置適當(dāng)?shù)膶?duì)照組，以避免假陽(yáng)性結(jié)果。

IHC協(xié)議：您還應(yīng)該關(guān)注的另一個(gè)點(diǎn)是您的免疫組織化學(xué)（IHC）協(xié)議。似乎c-Fos陽(yáng)性細(xì)胞的總數(shù)是閾值依賴的。許多參數(shù)影響可檢測(cè)的c-Fos陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量：組織儲(chǔ)存條件、切片方法（冷凍切片機(jī)或振動(dòng)切片機(jī)）、染色參數(shù)（例如，孵化溫度）、信號(hào)增強(qiáng)試劑（Berghorn等人，1994；Werner等人，1996；Mayer和Bendayan，2001），以及最重要的是，一抗選擇。

c-Fos抗體：一抗在特異性、靈敏度和信噪比方面有所不同，這些特性影響您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，Synaptic Systems旨在提供高特異性和一致性的c-Fos抗體，以支持科學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。由于單克隆抗體與多克隆抗體相比具有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)，Synaptic Systems開發(fā)了一種新的單克隆重組兔抗c-Fos抗體。

Synaptic Systems單克隆重組c-Fos抗體的優(yōu)勢(shì)：

抗體具有由兩個(gè)重鏈和兩個(gè)輕鏈組成的共同結(jié)構(gòu)。重鏈和輕鏈都包含物種特異性的恒定區(qū)域和負(fù)責(zé)目標(biāo)識(shí)別的可變序列（Davies和Metzger，1983）。

在來(lái)自定義的雜交瘤細(xì)胞系的單克隆抗體制劑中，所有單個(gè)抗體分子都是相同的，并且共享相同的抗原識(shí)別位點(diǎn)。相比之下，多克隆抗體，如兔c-Fos抗體226 003，由抗體分子的混合物組成，它們?cè)谀繕?biāo)識(shí)別序列上有所不同。一旦血清用完，就必須對(duì)新的動(dòng)物進(jìn)行免疫。獲得的新血清包含新的c-Fos抗體混合物，具有新的特異性和親和力特性，導(dǎo)致多克隆c-Fos抗體的批次間變異。

通過(guò)Synaptic Systems的單克隆重組兔c-Fos抗體226 008，Synaptic Systems永久性地解決了批次間變異的問(wèn)題。Synaptic Systems對(duì)表現(xiàn)一貫良好的大鼠單克隆c-Fos抗體226 017的c-Fos目標(biāo)識(shí)別域進(jìn)行了測(cè)序，并將它們?nèi)诤系酵肐gG的恒定抗體區(qū)域。

這種高度定義的單克隆重組抗體可以在受控條件下在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)，作為一種無(wú)限資源，批次間變異最小。它在Synaptic Systems測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用中顯示出優(yōu)越的性能，并且等同于甚至優(yōu)于Synaptic Systems最好的兔多克隆c-Fos批次。雖然多克隆兔抗c-Fos抗體226 003非常容易受到實(shí)驗(yàn)條件的變化影響（例如，IHC實(shí)驗(yàn)中的孵化溫度會(huì)影響信號(hào)強(qiáng)度），但單克隆重組兔抗c-Fos抗體226 008在各種實(shí)驗(yàn)設(shè)置中都能產(chǎn)生穩(wěn)健的染色結(jié)果，因此是您實(shí)驗(yàn)的最佳選擇。

隨著時(shí)間的推移，這種單克隆抗體將被用于許多不同的應(yīng)用，收集到的所有信息將有助于更好地表征這種研究試劑。

與多克隆抗體相比，這些信息會(huì)累積并且永遠(yuǎn)不會(huì)丟失，使這種研究試劑成為您手中越來(lái)越有價(jià)值和可靠的工具。

新的組織透明技術(shù)，如CLARITY和iDISCO，為生物過(guò)程和結(jié)構(gòu)提供了全新的見解。與Synaptic Systems的單克隆重組兔抗c-Fos抗體226 008結(jié)合使用，它們使Synaptic Systems能夠在整個(gè)較大的區(qū)域內(nèi)研究大腦中的途徑。已經(jīng)展示了如何通過(guò)使用CLARITY的修改版本和Synaptic Systems的c-Fos抗體226 008來(lái)標(biāo)記記憶細(xì)胞，評(píng)估同一小鼠中重疊的細(xì)胞群體（Refaeli等人，2024）。

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