CCK-8細(xì)胞增殖／毒性檢測試劑盒:Abbkine細(xì)胞分析旗艦產(chǎn)品

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時間：2017-02-22

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Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），CCK-8試劑盒適用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

CCK8-Figure

Figure.1 CCK-8（WST-8）反應(yīng)機制

CCK-8試劑盒實驗原理：
WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
CCK-8試劑盒用途：
CCK-8法應(yīng)用非常廣泛，如藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

為什么將Cell Counting Kit (CCK-8) 作為細(xì)胞增殖與毒性檢測最佳選擇：

如下表，CCK-8法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較，結(jié)果不言而喻！

檢測方法	MTT法	XTT法	WST-1法	CCK-8法
甲臜產(chǎn)物的水溶性	差（需加有機溶劑溶解后再檢測）	好	好	好
產(chǎn)品性狀	粉末	2瓶溶液	溶液	1瓶溶液
使用方法	配成溶液后使用	現(xiàn)配現(xiàn)用	即開即用	即開即用
檢測靈敏度	高	很高	很高	高
檢測時間	較長	較短	較短	最短
檢測波長	560-600nm	420-480nm	420-480nm	430-490nm
細(xì)胞毒性	高，細(xì)胞形態(tài)完全消失	很低，細(xì)胞形態(tài)不變	很低，細(xì)胞形態(tài)不變	很低，細(xì)胞形態(tài)不變
試劑穩(wěn)定性	一般	較差	一般	很好
批量樣品檢測	可以	非常適合	非常適合	非常適合
便捷程度	一般	便捷	便捷	非常便捷

* 細(xì)胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到最佳測定時間

* 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾（扣除空白孔即可）

如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒？

目前市面上能提供的CCK-8試劑盒有國產(chǎn)分裝或原產(chǎn)的，國產(chǎn)分裝的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足。而原產(chǎn)于國內(nèi)實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結(jié)果，在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于原裝進(jìn)口供應(yīng)CCK-8試劑盒的進(jìn)口品牌并不多，就連Abcam、Thermo，Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒，而其它品牌在性價比上遠(yuǎn)遜于Abbkine產(chǎn)品。

作為Abbkine品牌旗下首款細(xì)胞分析旗艦產(chǎn)品，Cell Counting Kit (CCK-8)，Abbkine研發(fā)工程師為其傾注了大量的投入，不斷摸索優(yōu)化最佳的配方，每一份努力只為讓科研工作者更加簡單，高效，穩(wěn)定地獲取珍貴的科研數(shù)據(jù)。


英文名稱	貨號	產(chǎn)品說明
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)	KTC011001	詳情

本CCK-8試劑盒檢測非常便捷。CCK-8試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進(jìn)行任何配制等操作。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。

《【CCK-8】細(xì)胞增殖／毒性檢測試劑盒綜合對比》

品牌（規(guī)格）	Abbkine	Sigma	Dojindo
100次	200 元	703.17 元	350 元
500次	640 元	2779.92 元	890 元
2000次	2050 元	13899.6 元(3000次）	——
10000次	7180 元	——	8380 元

實驗注意事項：

建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。
有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時，建議斜貼著培養(yǎng)板壁加，不要插到培養(yǎng)基頁面下加，容易產(chǎn)生氣泡，會干擾OD值讀數(shù)。
白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。
當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時，貼壁細(xì)胞的最小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。
如果沒有450nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片，但是450nm濾光片的檢測靈敏度最高。
如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基，去掉藥物的影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。

更多詳情：請瀏覽下方鏈接
CCK-8實驗操作指南：http://www.docin.com/p-1853035994.html
CCK-8常見問題匯總：http://www.docin.com/p-1853035993.html

Abbkine品牌在2012年成立于美國加利福尼亞州，隨著亞洲市場的迅猛增長，Abbkine將總部搬遷至中國，轉(zhuǎn)移其生產(chǎn)線和相關(guān)技術(shù)，由中方資本控股，并整合各方面資源，歷史性地開辟了中國生產(chǎn)基地，立足中國，服務(wù)全球。結(jié)合了Abbkine美國技術(shù)和中國制造兩方面的巨大優(yōu)勢，致力于提供高品質(zhì)，買得起的免疫分析試劑、標(biāo)簽及內(nèi)參抗體、特色二抗、蛋白質(zhì)純化產(chǎn)品和其它分子生物學(xué)試劑盒，以滿足世界各地的大學(xué)科研所、醫(yī)院研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機構(gòu)科學(xué)家的研究與分析需求。