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CD系列抗體專題1——熒光標(biāo)記CD3抗體

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2021-09-01     
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CD3是一種蛋白質(zhì)復(fù)合物,通常在所有成熟T細(xì)胞的表面表達(dá)。它的主要功能是作為T細(xì)胞共同受體,促進(jìn)細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CD8+T細(xì)胞)和輔助T細(xì)胞(CD4+ T細(xì)胞)的活化,并最終幫助形成獲得性免疫反應(yīng)。作為T細(xì)胞活化的一個(gè)組成部分,CD3已成為藥物開發(fā)的一個(gè)有潛力的指標(biāo),針對(duì)CD3開發(fā)的治療性單克隆抗體 (mAb),可作為一種自身免疫疾病和移植排斥的免疫療法,其中最著名的就是奧昔組單抗,它被開發(fā)用于治療1型糖尿病和自身免疫性疾病。

 

CD3蛋白質(zhì)復(fù)合物.png

 

在流式細(xì)胞分析中,人CD3通常被用作將T細(xì)胞與其他淋巴細(xì)胞區(qū)分開來的譜系特異性標(biāo)記物。CD3 對(duì)T細(xì)胞的特異性與其在T細(xì)胞發(fā)育的所有階段均可出現(xiàn)結(jié)合的特性,使其成為檢測健康T細(xì)胞和T細(xì)胞癌(例如白血病、淋巴瘤)的理想標(biāo)志物。在免疫組織化學(xué)研究中,CD3是組織切片中T細(xì)胞的免疫組化標(biāo)志物。

 

CD3介紹

目錄價(jià)值
同義詞T3、OKT3、Leu4
細(xì)胞定位細(xì)胞膜
細(xì)胞表達(dá)T細(xì)胞、雙陰性胸腺細(xì)胞(例如 CD4- 和CD8-)、γ/δ T細(xì)胞、NKT細(xì)胞、巨噬細(xì)胞
受體類型免疫球蛋白 (IgG) 超家族
配體與 MHC 結(jié)合的肽抗原
相關(guān)信號(hào)通路T細(xì)胞受體表達(dá)和T細(xì)胞信號(hào)通路
功能T細(xì)胞標(biāo)志物、T細(xì)胞受體表達(dá)和T細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)

 

CD3 蛋白復(fù)合物

由于其胞質(zhì)尾短,T 細(xì)胞受體 (TCR) 缺乏在肽主要組織相容性復(fù)合物 (pMHC) I 類或 II 類分子的抗原識(shí)別時(shí)發(fā)出信號(hào)的能力。為了激活啟動(dòng)免疫細(xì)胞激活的必要下游通路,TCR 需要由稱為 CD3 蛋白的信號(hào)分子復(fù)合物啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)。

 

CD3結(jié)構(gòu)

CD3 蛋白復(fù)合物由四個(gè)恒定鏈(CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ)組成,它們組成一個(gè)N端細(xì)胞外域和一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,并且在所有T細(xì)胞中都是相同的。N端細(xì)胞外域由兩個(gè)異源二聚體結(jié)構(gòu)域CD3εγ和CD3εδ 組成,跨膜結(jié)構(gòu)域由單個(gè)同源二聚體CDζζ組成。

 

CD3及其在疾病中的作用

編碼 CD3 亞基的基因突變可導(dǎo)致嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷 (SCID),這是一種罕見的常染色體隱性遺傳疾病,其特征是T和B淋巴細(xì)胞分化和功能嚴(yán)重缺陷。CD3亞基的缺陷與以下因素有關(guān):

CD3δ和CD3ε 缺失與嚴(yán)重的αβ細(xì)胞淋巴細(xì)胞減少相關(guān),導(dǎo)致T- B+ NK+ SCID 表型。

CD3ε 缺失導(dǎo)致T細(xì)胞發(fā)育完全阻斷。

CD3γ缺失導(dǎo)致部分T細(xì)胞免疫缺陷。

CD3ζ缺失與免疫缺陷 25和系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (SLE) 相關(guān)。


組成CD3蛋白復(fù)合物多肽鏈CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ

CD3鏈相對(duì)分子量糖基化ITAM 的數(shù)量基因
CD3ε20kDa非糖基化多肽鏈1CD3E(人染色體11帶q23)
CD3δ20kDa糖基化多肽鏈1CD3D(人染色體11帶q23)
CD3γ25-28kDa糖基化多肽鏈1CD3G(人染色體11帶q23)
CD3ζ17 kDa非糖基化多肽鏈3CD247(人染色體1帶q22-q25)

 

CD3 抗體

單克隆CD3抗體可結(jié)合CD3/T細(xì)胞抗原受體復(fù)合物的ε鏈,經(jīng)常用于流式細(xì)胞和免疫熒光應(yīng)用,以識(shí)別表達(dá)CD3的免疫細(xì)胞亞群。已知表達(dá)CD3表面標(biāo)志物的細(xì)胞包括約60-85% 的正常外周血淋巴細(xì)胞、約65-85%的胸腺細(xì)胞以及小腦和胃壁細(xì)胞的浦肯野細(xì)胞。

在這里,我們給大家提供了各類染料標(biāo)記的CD3抗體,這些抗體通過親和層析純化,并在最佳條件下與各種熒光團(tuán)結(jié)合,首先是我們的iFluor系列染料

iFluor染料-明亮、光穩(wěn)定的染料,適用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS)、熒光成像和體內(nèi)成像應(yīng)用。

 

iFluor 染料標(biāo)記的CD3抗體

下表列出了可用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和熒光成像的iFluor染料標(biāo)記的人CD3抗體的熒光特性。用iFluor染料制成的偶聯(lián)物具有出色的亮度和光穩(wěn)定性,優(yōu)于 Alexa Fluor 偶聯(lián)物和。

iFluor 染料標(biāo)記的CD3抗體

熒光
標(biāo)記
貨號(hào)Ex
(nm)
Em
(nm)
εΦCF 260
nm
CF 280
nm
iFluor3501003001034444820,0000.950.830.23
iFluor4051003002040242537,0000.910.480.77
iFluor4301003003043349540,0000.780.680.3
iFluor4501003004045150240,0000.820.450.27
iFluor4881003005049151675,0000.90.210.11
iFluor5141003006052755480,0000.830.250.11
iFluor5321003007054356390,0000.680.260.16
iFluor54610030080541557100,0000.670.250.15
iFluor55510030090556569100,0000.640.230.14
iFluor560100300A0559571130,0000.570.0480.069

 

Note:

1.Ε=最大吸收波長處的摩爾消光系數(shù)(單位 = cm -1 M -1)(下同)。

2.Φ =水性緩沖液(pH 7.2)中的熒光量子產(chǎn)率(下同)。

3.260 nm處的CF是用于消除染料對(duì)260 nm處吸光度的影響的校正因子(用于寡核苷酸和核酸標(biāo)記)(下同)。

4.280nm處的CF是用于消除染料對(duì)280 nm處吸光度的貢獻(xiàn)的校正因子(用于肽和蛋白質(zhì)標(biāo)記)(下同)。

上述每一種抗體都可以提供HIT3b,SK7,UCHT1,HIT3a,OKT-3這幾種克隆號(hào),每種克隆號(hào)對(duì)應(yīng)的

 

同種型和應(yīng)用類型如下:

免疫原類型物種反應(yīng)性宿主,同種型克隆號(hào)應(yīng)用類型
識(shí)別 CD3ε 鏈單克隆小鼠,IgG1HIT3bFC、IHC-F、IF
識(shí)別 CD3ε 鏈單克隆小鼠,IgG1,κSK7FC、IHC
識(shí)別 CD3ε 鏈單克隆小鼠,IgG1,κUCHT1FC、FN、IHC-F、ICC、IP、WB
識(shí)別 CD3ε 鏈單克隆小鼠,IgG2a,κHIT3aFC、FN、IHC-F、IP
識(shí)別 CD3ε 鏈單克隆小鼠,IgG2a,κOKT-3FC

應(yīng)用縮寫說明FC = 流式細(xì)胞術(shù);FN = 功能測定;IF = 免疫熒光;IHC = 免疫組織化學(xué);IHC-F = 免疫組織化學(xué)(冷凍);ICC = 免疫細(xì)胞化學(xué);WB = 蛋白質(zhì)印跡;IP = 免疫沉淀。

 

除了iFluor 熒光團(tuán)外,我們還提供以下4大類熒光標(biāo)記的CD3抗體,他們分別是:

mFluor染料:明亮、光穩(wěn)定的染料,針對(duì)流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。

熒光團(tuán)Ex (nm)Em (nm)εΦCF 260 nmCF 280 nm
mFluor UV37535438835,0000.940.0990.138
mFluor Violet 45040644525,0000.920.3380.078
mFluor UV46036245615,0000.860.350.134
mFluor Violet 50042649735,0000.810.7690.365
mFluor Violet 51040950430,0000.860.4640.366
mFluor Violet 54040053215,0000.641.3920.529
mFluor Blue 570552564120,0000.080.2280.179
mFluor Green 62052161750,0000.060.8950.569
mFluor Yellow 630546625110,0000.010.2830.413
mFluor Red 700657694250,0000.0290.1350.127

 

Alexa Fluor染料:適用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和熒光成像應(yīng)用。

熒光團(tuán)Ex (nm)Em (nm)εΦCF 280 nm
Alexa Fluor 35034344119,000N/D0.19
Alexa Fluor 48849952073,0000.920.11
Alexa Fluor 555553568155,0000.10.08
Alexa Fluor 59459061892,0000.660.56
Alexa Fluor 647650671270,0000.330.03
Alexa Fluor 680681704183,0000.360.05
Alexa Fluor 700696719205,0000.250.07
Alexa Fluor 750752776290,0000.120.04

 

經(jīng)典染料:適用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和熒光成像應(yīng)用。

熒光團(tuán)Ex (nm)Em (nm)εΦCF 280 nm
Pacific Blue40445546,0000.780.2
FITC49151673,0000.790.254
Pacific Orange40055125,000N/D0.6
TRITC54457085,0000.10.34

 

藻膽蛋白和串聯(lián)染料:用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和多參數(shù)分析的高亮度染料。

熒光團(tuán)Ex (nm)Em (nm)ε激光 (nm)
PE5665741,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Texas Red5676151,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Alexa Fluor 6105676271,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Cy55656661,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-iFluor 6475696661,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Alexa Fluor 7005667211,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-Cy75667781,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
PE-iFluor 7505667781,960,000488 nm, 532 nm, 561-568 nm
APC651660700,000633-647 nm
APC-iFluor 700651710700,000633-647 nm

 

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