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CD3是一種蛋白質(zhì)復(fù)合物,通常在所有成熟T細(xì)胞的表面表達(dá)。它的主要功能是作為T細(xì)胞共同受體,促進(jìn)細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CD8+T細(xì)胞)和輔助T細(xì)胞(CD4+ T細(xì)胞)的活化,并最終幫助形成獲得性免疫反應(yīng)。作為T細(xì)胞活化的一個(gè)組成部分,CD3已成為藥物開發(fā)的一個(gè)有潛力的指標(biāo),針對(duì)CD3開發(fā)的治療性單克隆抗體 (mAb),可作為一種自身免疫疾病和移植排斥的免疫療法,其中最著名的就是奧昔組單抗,它被開發(fā)用于治療1型糖尿病和自身免疫性疾病。

在流式細(xì)胞分析中,人CD3通常被用作將T細(xì)胞與其他淋巴細(xì)胞區(qū)分開來的譜系特異性標(biāo)記物。CD3 對(duì)T細(xì)胞的特異性與其在T細(xì)胞發(fā)育的所有階段均可出現(xiàn)結(jié)合的特性,使其成為檢測健康T細(xì)胞和T細(xì)胞癌(例如白血病、淋巴瘤)的理想標(biāo)志物。在免疫組織化學(xué)研究中,CD3是組織切片中T細(xì)胞的免疫組化標(biāo)志物。
CD3介紹:
| 目錄 | 價(jià)值 |
| 同義詞 | T3、OKT3、Leu4 |
| 細(xì)胞定位 | 細(xì)胞膜 |
| 細(xì)胞表達(dá) | T細(xì)胞、雙陰性胸腺細(xì)胞(例如 CD4- 和CD8-)、γ/δ T細(xì)胞、NKT細(xì)胞、巨噬細(xì)胞 |
| 受體類型 | 免疫球蛋白 (IgG) 超家族 |
| 配體 | 與 MHC 結(jié)合的肽抗原 |
| 相關(guān)信號(hào)通路 | T細(xì)胞受體表達(dá)和T細(xì)胞信號(hào)通路 |
| 功能 | T細(xì)胞標(biāo)志物、T細(xì)胞受體表達(dá)和T細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo) |
CD3 蛋白復(fù)合物:
由于其胞質(zhì)尾短,T 細(xì)胞受體 (TCR) 缺乏在肽主要組織相容性復(fù)合物 (pMHC) I 類或 II 類分子的抗原識(shí)別時(shí)發(fā)出信號(hào)的能力。為了激活啟動(dòng)免疫細(xì)胞激活的必要下游通路,TCR 需要由稱為 CD3 蛋白的信號(hào)分子復(fù)合物啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)。
CD3結(jié)構(gòu):
CD3 蛋白復(fù)合物由四個(gè)恒定鏈(CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ)組成,它們組成一個(gè)N端細(xì)胞外域和一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,并且在所有T細(xì)胞中都是相同的。N端細(xì)胞外域由兩個(gè)異源二聚體結(jié)構(gòu)域CD3εγ和CD3εδ 組成,跨膜結(jié)構(gòu)域由單個(gè)同源二聚體CDζζ組成。
CD3及其在疾病中的作用:
編碼 CD3 亞基的基因突變可導(dǎo)致嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷 (SCID),這是一種罕見的常染色體隱性遺傳疾病,其特征是T和B淋巴細(xì)胞分化和功能嚴(yán)重缺陷。CD3亞基的缺陷與以下因素有關(guān):
CD3δ和CD3ε 缺失:與嚴(yán)重的αβ細(xì)胞淋巴細(xì)胞減少相關(guān),導(dǎo)致T- B+ NK+ SCID 表型。
CD3ε 缺失:導(dǎo)致T細(xì)胞發(fā)育完全阻斷。
CD3γ缺失:導(dǎo)致部分T細(xì)胞免疫缺陷。
CD3ζ缺失:與免疫缺陷 25和系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (SLE) 相關(guān)。
組成人的CD3蛋白復(fù)合物的多肽鏈:CD3ε、CD3δ、CD3γ 和 CD3ζ
| CD3鏈 | 相對(duì)分子量 | 糖基化 | ITAM 的數(shù)量 | 基因 |
| CD3ε | 20kDa | 非糖基化多肽鏈 | 1 | CD3E(人染色體11帶q23) |
| CD3δ | 20kDa | 糖基化多肽鏈 | 1 | CD3D(人染色體11帶q23) |
| CD3γ | 25-28kDa | 糖基化多肽鏈 | 1 | CD3G(人染色體11帶q23) |
| CD3ζ | 17 kDa | 非糖基化多肽鏈 | 3 | CD247(人染色體1帶q22-q25) |
CD3 抗體
單克隆CD3抗體可結(jié)合CD3/T細(xì)胞抗原受體復(fù)合物的ε鏈,經(jīng)常用于流式細(xì)胞和免疫熒光應(yīng)用,以識(shí)別表達(dá)CD3的免疫細(xì)胞亞群。已知表達(dá)CD3表面標(biāo)志物的細(xì)胞包括約60-85% 的正常外周血淋巴細(xì)胞、約65-85%的胸腺細(xì)胞以及小腦和胃壁細(xì)胞的浦肯野細(xì)胞。
在這里,我們給大家提供了各類染料標(biāo)記的CD3抗體,這些抗體通過親和層析純化,并在最佳條件下與各種熒光團(tuán)結(jié)合,首先是我們的iFluor系列染料:
iFluor染料-明亮、光穩(wěn)定的染料,適用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS)、熒光成像和體內(nèi)成像應(yīng)用。
iFluor 染料標(biāo)記的CD3抗體:
下表列出了可用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和熒光成像的iFluor染料標(biāo)記的人CD3抗體的熒光特性。用iFluor染料制成的偶聯(lián)物具有出色的亮度和光穩(wěn)定性,優(yōu)于 Alexa Fluor 偶聯(lián)物和。
iFluor 染料標(biāo)記的CD3抗體:
| 熒光 標(biāo)記 | 貨號(hào) | Ex (nm) | Em (nm) | ε | Φ | CF 260 nm | CF 280 nm |
| iFluor350 | 10030010 | 344 | 448 | 20,000 | 0.95 | 0.83 | 0.23 |
| iFluor405 | 10030020 | 402 | 425 | 37,000 | 0.91 | 0.48 | 0.77 |
| iFluor430 | 10030030 | 433 | 495 | 40,000 | 0.78 | 0.68 | 0.3 |
| iFluor450 | 10030040 | 451 | 502 | 40,000 | 0.82 | 0.45 | 0.27 |
| iFluor488 | 10030050 | 491 | 516 | 75,000 | 0.9 | 0.21 | 0.11 |
| iFluor514 | 10030060 | 527 | 554 | 80,000 | 0.83 | 0.25 | 0.11 |
| iFluor532 | 10030070 | 543 | 563 | 90,000 | 0.68 | 0.26 | 0.16 |
| iFluor546 | 10030080 | 541 | 557 | 100,000 | 0.67 | 0.25 | 0.15 |
| iFluor555 | 10030090 | 556 | 569 | 100,000 | 0.64 | 0.23 | 0.14 |
| iFluor560 | 100300A0 | 559 | 571 | 130,000 | 0.57 | 0.048 | 0.069 |
Note:
1.Ε=最大吸收波長處的摩爾消光系數(shù)(單位 = cm -1 M -1)(下同)。
2.Φ =水性緩沖液(pH 7.2)中的熒光量子產(chǎn)率(下同)。
3.260 nm處的CF是用于消除染料對(duì)260 nm處吸光度的影響的校正因子(用于寡核苷酸和核酸標(biāo)記)(下同)。
4.280nm處的CF是用于消除染料對(duì)280 nm處吸光度的貢獻(xiàn)的校正因子(用于肽和蛋白質(zhì)標(biāo)記)(下同)。
上述每一種抗體都可以提供HIT3b,SK7,UCHT1,HIT3a,OKT-3這幾種克隆號(hào),每種克隆號(hào)對(duì)應(yīng)的
同種型和應(yīng)用類型如下:
| 免疫原 | 類型 | 物種反應(yīng)性 | 宿主,同種型 | 克隆號(hào) | 應(yīng)用類型 |
| 識(shí)別 CD3ε 鏈 | 單克隆 | 人 | 小鼠,IgG1 | HIT3b | FC、IHC-F、IF |
| 識(shí)別 CD3ε 鏈 | 單克隆 | 人 | 小鼠,IgG1,κ | SK7 | FC、IHC |
| 識(shí)別 CD3ε 鏈 | 單克隆 | 人 | 小鼠,IgG1,κ | UCHT1 | FC、FN、IHC-F、ICC、IP、WB |
| 識(shí)別 CD3ε 鏈 | 單克隆 | 人 | 小鼠,IgG2a,κ | HIT3a | FC、FN、IHC-F、IP |
| 識(shí)別 CD3ε 鏈 | 單克隆 | 人 | 小鼠,IgG2a,κ | OKT-3 | FC |
應(yīng)用縮寫說明:FC = 流式細(xì)胞術(shù);FN = 功能測定;IF = 免疫熒光;IHC = 免疫組織化學(xué);IHC-F = 免疫組織化學(xué)(冷凍);ICC = 免疫細(xì)胞化學(xué);WB = 蛋白質(zhì)印跡;IP = 免疫沉淀。
除了iFluor 熒光團(tuán)外,我們還提供以下4大類熒光標(biāo)記的CD3抗體,他們分別是:
mFluor染料:明亮、光穩(wěn)定的染料,針對(duì)流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。
| 熒光團(tuán) | Ex (nm) | Em (nm) | ε | Φ | CF 260 nm | CF 280 nm |
| mFluor UV375 | 354 | 388 | 35,000 | 0.94 | 0.099 | 0.138 |
| mFluor Violet 450 | 406 | 445 | 25,000 | 0.92 | 0.338 | 0.078 |
| mFluor UV460 | 362 | 456 | 15,000 | 0.86 | 0.35 | 0.134 |
| mFluor Violet 500 | 426 | 497 | 35,000 | 0.81 | 0.769 | 0.365 |
| mFluor Violet 510 | 409 | 504 | 30,000 | 0.86 | 0.464 | 0.366 |
| mFluor Violet 540 | 400 | 532 | 15,000 | 0.64 | 1.392 | 0.529 |
| mFluor Blue 570 | 552 | 564 | 120,000 | 0.08 | 0.228 | 0.179 |
| mFluor Green 620 | 521 | 617 | 50,000 | 0.06 | 0.895 | 0.569 |
| mFluor Yellow 630 | 546 | 625 | 110,000 | 0.01 | 0.283 | 0.413 |
| mFluor Red 700 | 657 | 694 | 250,000 | 0.029 | 0.135 | 0.127 |
Alexa Fluor染料:適用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和熒光成像應(yīng)用。
| 熒光團(tuán) | Ex (nm) | Em (nm) | ε | Φ | CF 280 nm |
| Alexa Fluor 350 | 343 | 441 | 19,000 | N/D | 0.19 |
| Alexa Fluor 488 | 499 | 520 | 73,000 | 0.92 | 0.11 |
| Alexa Fluor 555 | 553 | 568 | 155,000 | 0.1 | 0.08 |
| Alexa Fluor 594 | 590 | 618 | 92,000 | 0.66 | 0.56 |
| Alexa Fluor 647 | 650 | 671 | 270,000 | 0.33 | 0.03 |
| Alexa Fluor 680 | 681 | 704 | 183,000 | 0.36 | 0.05 |
| Alexa Fluor 700 | 696 | 719 | 205,000 | 0.25 | 0.07 |
| Alexa Fluor 750 | 752 | 776 | 290,000 | 0.12 | 0.04 |
經(jīng)典染料:適用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和熒光成像應(yīng)用。
| 熒光團(tuán) | Ex (nm) | Em (nm) | ε | Φ | CF 280 nm |
| Pacific Blue | 404 | 455 | 46,000 | 0.78 | 0.2 |
| FITC | 491 | 516 | 73,000 | 0.79 | 0.254 |
| Pacific Orange | 400 | 551 | 25,000 | N/D | 0.6 |
| TRITC | 544 | 570 | 85,000 | 0.1 | 0.34 |
藻膽蛋白和串聯(lián)染料:用于流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和多參數(shù)分析的高亮度染料。
| 熒光團(tuán) | Ex (nm) | Em (nm) | ε | 激光 (nm) |
| PE | 566 | 574 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-Texas Red | 567 | 615 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-Alexa Fluor 610 | 567 | 627 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-Cy5 | 565 | 666 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-iFluor 647 | 569 | 666 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-Alexa Fluor 700 | 566 | 721 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-Cy7 | 566 | 778 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| PE-iFluor 750 | 566 | 778 | 1,960,000 | 488 nm, 532 nm, 561-568 nm |
| APC | 651 | 660 | 700,000 | 633-647 nm |
| APC-iFluor 700 | 651 | 710 | 700,000 | 633-647 nm |
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