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靈敏熒光探針,活性氧無處遁形!

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2019-12-04     
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不管是空氣中的氧還是水中的溶解氧都具有較高的氧化性,與一般的金屬鐵一樣,處于空氣中的人體各部位都在不斷地受到氧的腐蝕而“生銹” ,當然這種腐蝕與鐵不同, 它體現(xiàn)在人體的細胞水平上,特別是人體各種器官隨著年齡的增大不斷地老化更是這種腐蝕“生銹”的直觀表現(xiàn)。也就是說,氧氣會在細胞水平上損傷我們的機體,這個損傷,主要由我們體內的活性氧(ROS)來進行。

 

活性氧(ROS)是指機體內或者自然環(huán)境中由氧組成,含氧并且性質活潑的物質的總稱。它們是體內一類氧的單電子還原產物,是電子在未能傳遞到末端氧化酶之前漏出呼吸鏈并消耗大約2%的氧生成的,包括氧的一電子還原產物超氧陰離子、二電子還原產物過氧化氫、三電子還原產物羥基自由基以及一氧化氮等。

 

活性氧(ROS)

 

        在生理條件下,細胞內的ROS水平經(jīng)過精細調節(jié),在正常細胞信號轉導,細胞周期,基因表達和體內平衡過程中充當信使;當產生過量時,ROS會引發(fā)許多有害事件:在高濃度下,ROS誘導細胞中的氧化應激,隨后導致細胞內的生物大分子(如核酸,膜脂和細胞蛋白)被破壞,這些生物分子的氧化損傷會觸發(fā)細胞凋亡,與衰老,多種疾病,癌癥和神經(jīng)退行性疾病以及糖尿病和炎癥的發(fā)病機理密切相關。

 

        由于ROS具有破壞作用,細胞進化出幾個的系統(tǒng)來精心調節(jié)機體中過量的ROS,目前研究最充分的系統(tǒng)是谷胱甘肽-抗壞血酸循環(huán)系統(tǒng),谷胱甘肽-抗壞血酸系統(tǒng)通過將H2O2還原成H 2 O,使用NADH和NADPH作為電子供體。其他酶系統(tǒng)包括超氧化物歧化酶(其催化超氧陰離子的歧化(O )生成O 2或H2O2)和過氧化氫酶(其催化H2O2分解成H 2 O和O 2)。

 

谷胱甘肽-抗壞血酸循環(huán)系統(tǒng)

 

ROS的分類:

 

細胞內大多數(shù)ROS都是線粒體氧化磷酸化的副產物,是內源性產生的,或者是氧化還原酶和金屬催化氧化的中間產物,由于氧原子最外層電子的獨立軌道中包含兩個不成對的電子,因此很容易形成自由基,在電子存在的條件下,發(fā)生氧化還原反應依次形成超氧陰離子(O 過氧化氫(H2O2羥基自由基(•OH)次氯酸(HOCl)過氧亞硝酸鹽陰離子(ONOO 一氧化氮(NO)

 

氧化還原及其副產物

氧化還原及其副產物

 

過氧化氫

 

        過氧化氫(H 2 O 2)是一種活性氧代謝副產物,可作為許多氧化應激相關狀態(tài)的關鍵調節(jié)劑。它涉及許多的生物學事件如:哮喘,動脈粥樣硬化,糖尿病性血管病,骨質疏松癥,神經(jīng)變性和唐氏綜合癥。關于H2O2最有趣的生物學事件可能來自于最近的報道:抗體具有將分子氧轉化為過氧化氫的能力,從而有助于免疫系統(tǒng)的正常識別破壞過程, 因此對這種反應性物質的測量將有助于確定氧化應激如何調節(jié)各種細胞內途徑。

 

        胞內過氧化氫(H2O2)探針選擇指南:

 

原理酯酶裂解二乙酸酯基團產生DCFH,其被H 2 O2氧化成DCF,并在激發(fā)時發(fā)出綠色熒光2 O 2氧化產生若丹明123,若激發(fā)則發(fā)出藍色熒光OxiVision™探針被細胞內H 2 O 2氧化。激發(fā)時產生熒光。
Ex/Em(nm)504/525507/527405/450497/516
濾光片FITCFITCDAPIFITC
活細胞染色可以
熒光成像可以
HCS可以
流式細胞儀可以
規(guī)格25mg10mgKit(100tests)Kit(100tests)
貨號152041520611504(熒光成像)
11505(流式)
11503(熒光成像)
11506(流式)

 

羥基自由基

 

        細胞內羥基自由基(•OH)的檢測對于正確地調節(jié)細胞氧化還原水平及了解其異常調節(jié)對各種病理的影響至關重要。羥基自由基是一種活性氧(ROS),可與其他分子快速反應以變成更穩(wěn)定的形式。通常,羥基自由基被認為是氧化代謝的有害副產物,可能導致機體新陳代謝系統(tǒng)中各類分子受到破壞,它的平均壽命為10 -9納秒,可以與幾乎每個生物分子發(fā)生反應,例如核DNA,線粒體DNA,蛋白質和膜脂。

 

        活細胞羥基自由基檢測:

 

貨號產品名稱Ex(nm)Em(nm)規(guī)格
16055Cell Meter™ 線粒體羥基自由基檢測試劑盒 *紅色熒光*540590200 Tests

 

        胞內ROS檢測試劑盒選擇指南:

 

ROS種類ROS Brite™570ROS Brite™670ROS Brite™700ROS Brite™HDCFAmplite™ROS綠Amplite™ROS紅
羥自由基(•OH)+++++++++
叔丁基過氧化氫(TBHP)++++++
次氯酸(HOCl)--+++--+--
超氧陰離子(O •-+++++------
貨號2290222903160041605322900
22904
22901

注:加號(+)越多表示檢測靈敏度越高

 

        ROS選擇性探針及檢測試劑盒選擇指南:

 

過氧化氫(H 2 O 2++++++------
羥自由基(•OH)--------+++
超氧陰離子(O •-----++++++--
貨號11503
11506
11504
11505
1606022970
22971
16055

  

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