KRIBIOLISA 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA（基于 J2）kit：

穩(wěn)健靈敏的酶免疫測(cè)定法，用于定性/半定量篩選基于mRNA的制劑中的雙鏈RNA。我們建議使用 ELISA 檢測(cè)核酸提取物中的病毒 dsRNA 或非病毒來源的大型天然或合成 dsRNA，以及檢測(cè)人工合成的 （m）RNA 制劑中是否存在不需要的 dsRNA 分子。dsRNA標(biāo)準(zhǔn)品的連續(xù)稀釋液（包含在試劑盒中）可用作陽性定量對(duì)照。

艾美捷KRIBIOLISA? 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA（基于 J2）kit #KBBA56特點(diǎn)：

- 直接夾心測(cè)定，具有更好的特異性

- 預(yù)涂板

- 預(yù)先優(yōu)化和驗(yàn)證，即用型，無需在用戶端進(jìn)行額外驗(yàn)證

- 回收率： 95 - 100%

KRIBIOLISA 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA（基于 J2）kit檢測(cè)原理：

KRIBIOLISA 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA 采用定量夾心酶免疫測(cè)定技術(shù)。它基于使用兩種雙鏈RNA（dsRNA）特異性單克隆抗體，可以靈敏和選擇性地檢測(cè)dsRNA分子（>=40 bp），而不受其核苷酸組成和序列的影響。dsRNA （J2） 抗體預(yù)包被到微孔上。將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品移液到微孔中，并由捕獲抗體結(jié)合。然后，將HRP（辣根過氧化物酶）偶聯(lián)的抗dsRNA （K1）移液并孵育。洗滌微孔以去除任何非特異性結(jié)合后，將即用型底物溶液（TMB）添加到微孔中，顏色與樣品中dsRNA的量成比例發(fā)展。然后通過添加終止溶液停止顯色。在450nm處測(cè)量吸光度。

KRIBIOLISA 雙鏈 RNA （dsRNA） ELISA（基于 J2）kit檢測(cè)程序：

使用前將所有試劑置于室溫。強(qiáng)烈建議所有控件和示例應(yīng)重復(fù)或一式三份運(yùn)行。

在各自的孔中加入100ul制備的陽性對(duì)照/標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。

密封板并在 37*C 下孵育 120 分鐘。

吸出并用洗滌緩沖液（4X）洗滌板1次，并通過在吸收紙上用力倒置板來吸干殘留緩沖液。擦拭微量滴定孔外底部的任何液體，因?yàn)槿魏螝埩粑锒紩?huì)干擾讀數(shù)步驟。

向所有孔中加入100ul的dsRNA特異性K1檢測(cè)：HRP偶聯(lián)物。

密封板并在 37*C 下孵育 60 分鐘。

重復(fù)洗滌步驟（4）。

在每個(gè)孔中加入100ul的TMB底物。

將微孔板在室溫下在黑暗中孵育30分鐘。請(qǐng)勿搖晃，否則可能會(huì)導(dǎo)致更高的背景和更差的精度。陽性孔應(yīng)變成藍(lán)色。

移出 100 ul 的停止溶液。井的顏色應(yīng)該從藍(lán)色變成黃色。11.用酶標(biāo)儀讀取450nm處的吸光度。