體外受精(In Vitro Fertilization)是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術(shù)，英文簡稱為IVF。由于它與胚胎移植技術(shù)(ET)密不可分，又簡稱為IVF-ET。在生物學(xué)中，把體外受精胚胎移植到母體后獲得的動物稱試管動物(test-tube animal)。這項技術(shù)成功于20世紀(jì)50年代，在最近20年發(fā)展迅速，現(xiàn)已日趨成熟而成為一項重要而常規(guī)的動物繁殖生物技術(shù)。

體外受精技術(shù)對動物生殖機(jī)理研究、畜牧生產(chǎn)、醫(yī)學(xué)和瀕危動物保護(hù)等具有重要意義。如用小鼠、大鼠或家兔等作實驗材料，體外受精技術(shù)可用于研究哺乳動物配子發(fā)生、受精和胚胎早期發(fā)育機(jī)理。在家畜品種改良中，體外受精技術(shù)為胚胎生產(chǎn)提供了廉價而高效的手段，對充分利用優(yōu)良品種資源，縮短家畜繁殖周期，加快品種改良速度等有重要價值。在人類，IVF-ET技術(shù)是治療某些不孕癥和克服性連鎖病的重要措施之一。體外受精技術(shù)還是哺乳動物胚胎移植、克隆、轉(zhuǎn)基因和性別控制等現(xiàn)代生物技術(shù)不可缺少的組成部分。

體外受精過程需要從體內(nèi)取出成熟的卵母細(xì)胞和精子，在離體條件下培養(yǎng)一段時間，然后進(jìn)行人工授精，受精卵需要在體外培養(yǎng)發(fā)育成胚胎才能進(jìn)行后續(xù)的應(yīng)用（例如胚胎移植等），這些過程中由于脫離了母體的條件，需要用到各類的培養(yǎng)液模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，今天就來給大家介紹一下體外受精過程中常用的一些培養(yǎng)基：

卵母細(xì)胞的培養(yǎng)：

卵母細(xì)胞體外成熟是一個復(fù)雜的過程，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核需要發(fā)生一系列聯(lián)系性的結(jié)構(gòu)和分子方面的變化，才能完成胞核和胞質(zhì)的成熟。大量研究證明哺乳動物卵母細(xì)胞體外成熟所采用的培養(yǎng)液不僅對卵母細(xì)胞的成熟，而且對受精和隨后的胚胎發(fā)育均有著顯著的影響。目前對牛卵母細(xì)胞體外成熟的研究主要集中在以TCM199為基礎(chǔ)培養(yǎng)液，再添加激素，血清，卵泡液， 生長因子及顆粒細(xì)胞等成分來模擬卵母細(xì)胞體內(nèi)成熟的環(huán)境以及各種成分間的相互作用以期達(dá)到與體內(nèi)相當(dāng)?shù)某墒煨Ч?/p>

常用的卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)液配方：

基礎(chǔ)培養(yǎng)液為TCM-199，添加10%FCS，25mM Hepes、0.55mg/ml丙酮酸鈉及100IU青、鏈霉素；

精子的獲能及卵子受精：

精子獲能：哺乳動物精子的獲能方法有培養(yǎng)和化學(xué)誘導(dǎo)兩種方法。牛、羊的精子常用化學(xué)藥物誘導(dǎo)獲能，誘導(dǎo)獲能的藥物常用肝素和鈣離子載體。受精：即獲能精子與成熟卵子的共培養(yǎng)，除鈣離子載體誘導(dǎo)獲能外，精子和卵子一般在獲能液中完成受精過程。受精培養(yǎng)時間與獲能方法有關(guān)。在B2液中一般為6-8小時而用TALP液作受精液時可培養(yǎng)18~24h。精子和卵子常在小滴中共培養(yǎng)，受精時精子密度為1~9×10⁶/ml，每10微升精液中放人1~2枚卵子，小滴體積一般為50~200微升。

精子細(xì)胞培養(yǎng)液配方推薦：

精子洗滌液：BO/TALP基礎(chǔ)液+6mg/ml BSA(FractⅤ)+5mM咖啡因

精子獲能液：BO/TALP基礎(chǔ)液+6mg/ml BSA(FractⅤ)+5mM咖啡因+60ug/ml肝素

胚胎體外培養(yǎng)：

胚胎培養(yǎng)液分為復(fù)雜的和化學(xué)成分明確的培養(yǎng)液兩大類。復(fù)雜培養(yǎng)液中的成分很多，除無機(jī)和有機(jī)鹽外，還添加維生素、氨基酸、核苷酸和嘌呤等營養(yǎng)成分和血清。常用的胚胎培養(yǎng)基有M199、KSOM和F10，用它們培養(yǎng)胚胎時，可以采用體細(xì)胞共培養(yǎng)體系，即體細(xì)胞與胚胎在微滴中共同培養(yǎng)，利用體細(xì)胞生長過程中分泌的有益因子，促進(jìn)胚胎發(fā)育，克服發(fā)育阻斷。

常見胚胎體外培養(yǎng)液配方推薦：

M199+10%FCS+2.2mg/100ml丙酮酸鈉+100IU/ml雙抗

mSOF+10%FCS+2.2mg/100ml丙酮酸鈉+100IU/ml雙抗

產(chǎn)品推薦：

上述培養(yǎng)基成分表：

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