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氧化損傷,怎樣找出合適的實驗應用生物標志物

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2020-11-25     
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       氧化應激(Oxidative Stress,OS)是機體活性氧成分與抗氧化系統(tǒng)之間平衡失調引起的一系列適應性的反應。干擾細胞正常的氧化還原狀態(tài),會制造出過氧化物與自由基導致毒性作用,因此損害細胞的蛋白質、脂類和核酸。發(fā)生在人類的氧化壓力,被認為是造成亞斯伯格癥候群、自閉癥、阿茲海默癥、帕金森氏癥、注意力缺陷過動癥、動脈粥樣硬化、心臟衰竭及癌癥等的成因。然而活性氧也有它的益處,免疫系統(tǒng)可利用活性氧攻擊并殺死病原。短期的氧化應激在防止老化上,也提供了重要的步驟,稱做毒物興奮效應。

氧化應激

 

      氧化應激可通過測量活性氧(ROS)來直接評估,或通過過度產(chǎn)生的ROS對脂質,蛋白質和核酸造成的相關損害來間接評估。盡管直接測量ROS是理想的方法,但是與ROS的瞬時特性相比,通常更依賴于間接方法因為生物分子上的損傷標記相對穩(wěn)定。

 

      為了幫助您確定在實驗系統(tǒng)中最適合使用的方法,艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學領域解決方案供應商,為您推薦Cayman Chemical品牌的氧化損傷相關產(chǎn)品。以下是用于檢測最常見的氧化損傷生物標記物的分析技術的分類。

 

 

      ROS:氧氣作為正常代謝的一部分被電子還原,導致形成各種ROS,包括過氧化氫(H2O2)和超氧化物(O2•-)。當不受控制的氧化對生物系統(tǒng)造成壓力時,會對細胞大分子造成損害。ROS的測定不能識別ROS產(chǎn)生的來源(即正常狀態(tài)與疾病狀態(tài)),但是如果實驗模型處于壓力下,則ROS可能增加并且分子成分改變。

 

產(chǎn)品名稱及描述貨號指標說明
Hydrogen Peroxide Cell-Based Assay Kit600050細胞外H2O2利用ADHP(靈敏穩(wěn)定的H2O2探針),并包含過氧化氫酶以檢查試驗的特異性
Mitochondrial ROS Detection Assay Kit701600線粒體ROS使用線粒體特異性熒光ROS檢測試劑在特定條件下測量ROS的產(chǎn)生;包括抗霉素A作為陽性對照
ROS Detection Cell-Based Assay Kit (DHE)601290ROS將氧化還原敏感探針DHE用作O2•-和H2O2的底物;分別包括用于產(chǎn)生和清除ROS的陽性和陰性對照
Xanthine Oxidase Fluorometric Assay Kit10010895XO活性基于多步酶促反應,其中XO氧化次黃嘌呤時產(chǎn)生的H2O2與ADHP反應

 

      RNS:在氧化應激過程中也會產(chǎn)生活性氮(RNS)。由一氧化氮合酶(NOS)和O2•-合成的高含量一氧化氮(NO•)導致過氧亞硝酸鹽的形成。NO•本身也與硫醇和鐵硫酶反應,而過氧亞硝酸鹽與酪氨酸殘基反應形成硝基酪氨酸。

 

產(chǎn)品名稱及描述貨號指標說明
Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit780001NO•代謝物將少量添加的NADPH與催化系統(tǒng)結合使用,將用過的NADP+循環(huán)回NADPH以避免NADPH干擾Griess試劑的化學性質;對于血漿和尿液等液體的分析非常有效,但不能通過體外NOS分析(添加了過量的NADPH)進行NO2-和NO3-分析
Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit (LDH method)760871體外NOS活性和NO•代謝物用于從添加了過量NADPH的體外NOS分析中分析NO2-和NO3-;protocol中包括使用LDH移除多余的NADPH的額外步驟
Nitrate/Nitrite Fluorometric Assay Kit780051NO•代謝物使用DAN代替Griess試劑,比色儀靈敏度提高20倍;允許檢測低濃度的NO2-和NO3-(最小可檢測NO2/NO3量約為50nM)
NOS Activity Assay Kit781001NOS活性通過NOS監(jiān)測放射性標記的精氨酸向瓜氨酸的轉化

 

      DNA/RNA損傷:鳥嘌呤是DNA和RNA損傷時最容易氧化的堿基。為糾正這種損傷而啟動的修復過程將下列氧化的鳥嘌呤類釋放到尿液中:

      8-羥基鳥嘌呤——無核糖的堿

      8-羥基鳥苷——RNA的核苷

      8-羥基-2-脫氧鳥苷——DNA的脫氧核苷

 

      可以檢測多種氧化鳥嘌呤種類的測定法比只限于分析一種(例如8-羥基-2-脫氧鳥苷)的測定法能捕獲更多的氧化損傷生物學相關產(chǎn)物。

 

產(chǎn)品名稱及描述貨號指標說明
DNA/RNA Oxidative Damage (High Sensitivity) ELISA Kit5893208-羥基-2-脫氧鳥苷,8-羥基鳥苷和8-羥基鳥嘌呤單克隆抗體能夠檢測8-羥基-2-脫氧鳥苷(DNA氧化損傷標記物),8-羥基鳥苷(RNA損傷標記物)和8-羥基鳥嘌呤(DNA/RNA損傷標記物),對8-羥基-2-脫氧鳥苷有最高的選擇性和靈敏度;盡管高斜率表明檢測到其他未知物質,但與LC/MS測量的8-羥基-2-脫氧鳥苷相關
DNA/RNA Oxidative Damage (Clone 7E6.9) ELISA Kit5011308-羥基-2-脫氧鳥苷和8-羥基鳥苷單克隆抗體(克隆7E6.9)能夠以相同的選擇性和靈敏度檢測8-羥基-2-脫氧鳥苷(DNA氧化損傷標記)和8-羥基鳥苷(RNA損傷標記);與LC/MS測量8-羥基-2-脫氧鳥苷和8-羥基鳥苷的組合相關

 

      蛋白質氧化和硝化:蛋白質氧化的最常見標志是蛋白質羰基含量。氧化還原循環(huán)陽離子與蛋白質結合,并與ROS的攻擊結合,導致形成含有羰基(酮,醛)的氨基酸衍生物。香煙煙霧和醛類也會將羰基引入蛋白質中。另外,ROS暴露于蛋白質的蛋氨酸殘基會產(chǎn)生蛋氨酸亞砜(MetO),這是一種氧化修飾,如果未被MetO還原酶逆轉,則會進一步氧化為蛋氨酸砜,并可能導致蛋白質功能障礙。

 

      蛋白質上硝基酪氨酸的存在用作NO•與 O2•−反應時體內形成的過氧亞硝酸鹽的標志物。當過氧亞硝酸鹽經(jīng)歷雜化裂解時,釋放出的硝化氮離子硝酸鹽蛋白酪氨酸殘基。NO•可以通過RNS介導的S-亞硝基化過程直接修飾蛋白質,其中NO•基團與蛋白質半胱氨酸殘基的硫醇基結合,從而形成S-NO部分。

 

產(chǎn)品名稱及描述貨號指標說明
Protein Carbonyl Colorimetric Assay Kit10005020蛋白質羰基含量利用DNPH和蛋白質羰基之間的反應作為蛋白質氧化的讀數(shù)
Methionine Sulfoxide Immunoblotting Kit600160含有MetO殘基的蛋白質使用從兔血清中分離的MetO多克隆抗體,該抗體對MetO具有特異性,并且與蛋氨酸砜的交叉反應性最小
Nitrotyrosine IP Kit601220硝酸酪氨酸含量利用吸附劑與硝基酪氨酸單克隆抗體結合使用,以捕獲和提取硝化蛋白
S-Nitrosylated Protein Detection Kit (Biotin Switch)10006518S-NO蛋白利用改良的生物素開關方法直接標記S-NO蛋白

 

 

S-Glutathionylated Protein Detection Kit10010721蛋白質-PSSG加合物利用改良的生物素開關方法直接標記蛋白質-PSSG加合物

 

      脂質過氧化:脂質過氧化導致不飽和脂質的高反應性和不穩(wěn)定的氫過氧化物的形成。 它們可以通過不穩(wěn)定的氫過氧化物的各種分解產(chǎn)物(例如烷烴,酮,醛)直接或間接評估。通過組織脂質的隨機氧化產(chǎn)生的8-異前列腺烷目前被認為是體內脂質過氧化最可靠的生物標記之一。它是脂質過氧化作用的特定產(chǎn)物,其穩(wěn)定且在所有正常生物體液和組織中的含量均可檢測到。磷脂中酯化水平的測量可用于確定目標靶位點脂質過氧化的程度。

 

產(chǎn)品名稱及描述貨號指標說明
DHN-MA EIA Kit501140DHN-MA, a4-HNE meta bolite與人類,小鼠,大鼠,狗和豬的樣品兼容
8-Isoprostane ELISA Kit5163518-異前列腺素使用AChE示蹤劑進行過夜檢測(孵育時間= 18小時);檢測范圍0.8-500 pg/ml;檢出限(80% B/B0)約3 pg / ml
8-Isoprostane Express ELISA Kit5163608-異前列腺素使用AChE示蹤劑4小時測定;檢測范圍2.5-1500 pg/ml;檢出限(80% B/B0)約10pg / ml
STAT-8-Isoprostane ELISA Kit5004318-異前列腺素使用AP示蹤劑檢測速度極快(約2小時)。檢測范圍23.4-3000 pg/ml;檢出限(80% B/B0)約45 pg/ml
Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit705002LPO設計用于單管分光光度計以讀取結果
Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit (96 well)705003LPO設計用于可重復使用的玻璃板
TBARS Assay Kit10009055MDA-TBA加合物測定脂質過氧化的標準方法;用熒光法測量時,反應可產(chǎn)生更高的靈敏度,但可以選擇比色法
TBARS (TCA Method) Assay Kit700870MDA-TBA加合物通過合并TCA沉淀程序,具有改進樣品處理和減少工作量的優(yōu)勢;保持與原始TBARS分析相同的可靠性和準確性;包括樣品酸沉淀方案以避免混淆可溶性TBARS

 

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      作為一家具有高端的技術實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術開發(fā)區(qū),服務面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質的物流服務。為了更好的服務客戶,公司組建了一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)團隊-艾美捷生物技術中心,進入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質的產(chǎn)品推薦給國內生物領域的同仁們!

 

      艾美捷科技與國內外優(yōu)秀的生物試劑供應商優(yōu)保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT  Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson  Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult  Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen  Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US  Biological、Solis BioDyne等,可以在短時間內為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務。

 


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