藻膽蛋白Phycobiliproteins [R-藻紅蛋白（R-PE）和別藻藍(lán)蛋白（APC）]是用生物學(xué)檢測(cè)的超靈敏熒光染料。它們比傳統(tǒng)的有機(jī)熒光團(tuán)靈敏度高100倍以上。即使在諸如流式細(xì)胞術(shù)和免疫測(cè)定的實(shí)際應(yīng)用中，藻膽蛋白綴合的抗體的靈敏度通常遠(yuǎn)大于相應(yīng)的有機(jī)熒光染料的靈敏度。 藻膽蛋白是非常亮的熒光標(biāo)記，具有多個(gè)位點(diǎn)，可與許多生物和合成材料形成穩(wěn)定的結(jié)合。與化學(xué)合成熒光染料相比，藻膽蛋白由于其相對(duì)高的熒光量子產(chǎn)率和消光系數(shù)而發(fā)出強(qiáng)烈的熒光信號(hào)。因?yàn)樗鼈兊臒晒獠粫?huì)被生物分子猝滅，所以藻膽蛋白可以在許多應(yīng)用發(fā)揮很大的作用。藻膽蛋白與生物分子（例如IgG，Protein A或鏈霉親和素）綴合，已經(jīng)在流式細(xì)胞術(shù)，熒光激活細(xì)胞分選（FACS），免疫熒光成像和有限程度的活性氧物種檢測(cè)中取得了巨大成功，目前市面上主要的兩種的藻膽蛋白是的R藻紅蛋白（RPE）和別藻藍(lán)蛋白（APC）。  

藻紅蛋白 (PE)

藻紅蛋白 (PE) 是一種從紅藻中分離出來分子量為240kDa的藻膽蛋白。它呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的橙黃色熒光（比熒光素亮約25倍），摩爾消光系數(shù)為1,960,000cm^-1M^-1熒光量子產(chǎn)率為0.84。在天然狀態(tài)下PE的吸收光譜有三個(gè)特征吸收峰，在565nm處有一個(gè)最大吸收峰，在496nm和545nm處有兩個(gè)二級(jí)吸收峰，在574nm處有最大發(fā)射值。這三個(gè)吸收峰提高了PE與配備藍(lán)色(488nm)、綠色(532nm)和黃色激光器(561-568nm)的成像儀器的兼容性。在使用PE之前，它必須首先與具有生物特異性的分子偶聯(lián)，例如抗體或鏈霉親和素等。PE和PE偶聯(lián)物通常用于流式細(xì)胞術(shù)、熒光芯片和ELISA。由于其快速的光漂白特性PE在免疫熒光顯微鏡中的用途有限。  

PE的優(yōu)勢(shì)：

• 長(zhǎng)波長(zhǎng)發(fā)射可最大限度地減少生物材料自發(fā)熒光的干擾

• 藻膽素與蛋白質(zhì)骨架的共價(jià)結(jié)合使熒光淬滅的影響最小

• 極高的水溶性便于進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)

• 較大的斯托克位移，可用于多重染色分析

• 多個(gè)位點(diǎn)可與合成的有機(jī)化合物（如抗體、CY染料或AF染料）穩(wěn)定結(jié)合

• 偶聯(lián)物可用于多色流式細(xì)胞術(shù)，可使用單個(gè)激發(fā)光產(chǎn)生多個(gè)發(fā)射信號(hào)

表1.PE光譜信息一覽：

ε=最大吸收波長(zhǎng)處的摩爾消光系數(shù)。 

Φ=水性緩沖液(pH7.2)中的熒光量子產(chǎn)率。  

PE相關(guān)產(chǎn)品

我們提供多類的PE產(chǎn)品，包括CD抗體、二抗、鏈霉親和素偶聯(lián)物、標(biāo)記試劑盒、PE串聯(lián)染料等。為了快速的用PE標(biāo)記抗體和其他蛋白質(zhì)，請(qǐng)使用不含硫酸銨緩沖液的凍干PE。硫酸銨的去除消除了繁瑣的蛋白質(zhì)純化過程（例如透析），從而實(shí)現(xiàn)快速簡(jiǎn)便的標(biāo)記偶聯(lián)。我們還提供PE串聯(lián)染料，用于使用單一激發(fā)光源的多色流式細(xì)胞術(shù)。

• 用于白細(xì)胞群和亞群免疫表型分析的CD抗體偶聯(lián)物

• 二抗偶聯(lián)物

• 鏈霉親和素偶聯(lián)物

• 用于蛋白質(zhì)標(biāo)記的PE和串聯(lián)染料

• PE和串聯(lián)染料抗體標(biāo)記試劑盒

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

別藻藍(lán)蛋白(APC)

別藻藍(lán)蛋白(APC)是一種105kDa的藻膽蛋白，存在于藍(lán)細(xì)菌和藍(lán)藻中。它呈現(xiàn)出明亮的紅色熒光，摩爾消光系數(shù)為700,000cm^-1M^-1熒光量子產(chǎn)率為0.68，與具有較大消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的PE相比，APC沒有那么明亮。天然狀態(tài)下APC的熒光光譜以兩個(gè)吸收峰為特征，一個(gè)在651nm處的主要吸收峰和一個(gè)在625nm處的次要吸收峰，以及在660nm處的單個(gè)發(fā)射最大峰。這種雙重吸收最大值提高了與配備紅色激光(633-647nm)成像儀器的兼容性。與PE一樣，APC在使用前必須先與具有生物特異性的分子偶聯(lián)，例如抗體和鏈霉親和素等。APC偶聯(lián)物經(jīng)常用于流式細(xì)胞術(shù)、熒光芯片和ELISA，由于其快速的光漂白特性，在免疫熒光顯微鏡中的用途有限。  

APC的優(yōu)勢(shì)

• 長(zhǎng)波長(zhǎng)發(fā)射可最大限度地減少生物材料自發(fā)熒光的干擾

• 藻膽素與蛋白質(zhì)骨架的共價(jià)結(jié)合使熒光猝滅的影響最小

• 極高的水溶性便于進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)

• 較大的斯托克位移，可用于多重染色分析

• 多個(gè)位點(diǎn)可與合成的有機(jī)化合物（如抗體、CY染料或AF染料）穩(wěn)定結(jié)合

• 偶聯(lián)物可用于多色流式細(xì)胞術(shù)，可使用單個(gè)激發(fā)光產(chǎn)生多個(gè)發(fā)射信號(hào)

表2.APC光譜信息一覽：

ε=最大吸收波長(zhǎng)處的摩爾消光系數(shù)。 

Φ=水性緩沖液(pH7.2)中的熒光量子產(chǎn)率。  

APC相關(guān)產(chǎn)品：

我們提供多類的APC產(chǎn)品，包括CD抗體、二抗、鏈霉親和素偶聯(lián)物、標(biāo)記試劑盒、APC串聯(lián)染料等。為了快速的用APC標(biāo)記抗體和其他蛋白質(zhì)，請(qǐng)使用不含硫酸銨緩沖液的凍干APC。硫酸銨的去除消除了繁瑣的蛋白質(zhì)純化過程（例如透析），從而實(shí)現(xiàn)快速簡(jiǎn)便的標(biāo)記偶聯(lián)。我們還提供APC串聯(lián)染料，用于使用單一激發(fā)光源的多色流式細(xì)胞術(shù)。

• 用于白細(xì)胞群和亞群免疫表型分析的CD抗體偶聯(lián)物

• 二抗偶聯(lián)物

• 鏈霉親和素偶聯(lián)物

• 用于蛋白質(zhì)標(biāo)記的APC和串聯(lián)染料

• APC和串聯(lián)染料抗體標(biāo)記試劑盒

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

PE和APC串聯(lián)染料

PE和APC串聯(lián)染料是由兩個(gè)不同的熒光團(tuán)共價(jià)連接組成，一個(gè)供體（例如R-PE或APC）和一個(gè)發(fā)射更長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光受體（例如Cy5、Cy7或iFluor 647）。在這種構(gòu)象中，一個(gè)熒光團(tuán)（稱為“供體”）的激發(fā)導(dǎo)致能量轉(zhuǎn)移到另一個(gè)熒光團(tuán)（稱為“受體”）并發(fā)出熒光。這種從供體到受體的能量轉(zhuǎn)移是通過福斯特共振能量轉(zhuǎn)移或FRET發(fā)生的。在流式細(xì)胞術(shù)中，串聯(lián)染料非常適合用于細(xì)胞的多色參數(shù)分析，因?yàn)樗鼈冎恍枰獑蝹€(gè)激發(fā)光源和有著更大的斯托克斯位移。如圖：FITC、PE、PE-Cy5和PE-Cy7無需熒光補(bǔ)償即可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行四色分析。四種熒光團(tuán)都被488nm氬離子激光有效地同時(shí)激發(fā)。  

FITC（綠色）、PE（黃色）、PE-Cy5（橙色）和PE-Cy7（紅色）的吸收和發(fā)射光譜顯示出清晰的光譜分離，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行四色分析。四種熒光團(tuán)都被488nm氬激光線（藍(lán)色）有效激發(fā)。FITC可以使用FITC過濾器進(jìn)行可視化。PE可以使用Cy3過濾器進(jìn)行可視化。PE-Cy5和PE-Cy7可以分別使用Cy5和Cy7過濾器進(jìn)行可視化。  

串聯(lián)染料使用注意事項(xiàng)：

• 避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在光照下，串聯(lián)染料對(duì)光非常敏感，應(yīng)始終避光。

• 不要冷凍串聯(lián)偶聯(lián)物，這會(huì)導(dǎo)致供體變性

• 注意，固定和破膜的操作會(huì)降低串聯(lián)染料的亮度

• 在用于多色流式細(xì)胞術(shù)時(shí)請(qǐng)使用適當(dāng)?shù)膶?duì)照，例如用于背景、未染色細(xì)胞的同種型對(duì)照和用于補(bǔ)償?shù)膯紊珜?duì)照

• 由于這是兩個(gè)或多個(gè)具有重疊發(fā)射光譜的串聯(lián)染料，請(qǐng)?jiān)诜治鰯?shù)據(jù)之前確定是否需要熒光補(bǔ)償

相關(guān)產(chǎn)品推薦：

Biogradetech生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國(guó)加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。