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植物組織分離和升級(jí)版植物快速PCR方案

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2020-08-07     
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      【前情回顧】:

 

      【1】植物蛋白提取方案:PEB蛋白提取緩沖液,點(diǎn)擊了解

      【2】純化高質(zhì)量植物DNA,您缺一個(gè)植物DNA提純?cè)噭┖校?/span>點(diǎn)擊了解

      【3】植物microRNA純化方案:植物microRNA提純?cè)噭┖校?/span>點(diǎn)擊了解

      【4】植物染色質(zhì)提取方案,點(diǎn)擊了解

     【5】植物染色質(zhì)免疫沉淀方案,點(diǎn)擊了解

     【6】植物病原體檢測方案,點(diǎn)擊了解

      蛋白質(zhì)純化是旨在從細(xì)胞,組織或整個(gè)生物體中分離出一種或幾種蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)純化對(duì)于表征目的蛋白質(zhì)的功能,結(jié)構(gòu)和相互作用至關(guān)重要。蛋白質(zhì)分離與提取是生命科學(xué)研究基礎(chǔ)中的基礎(chǔ)。植物細(xì)胞由于存在細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu),因此比動(dòng)物細(xì)胞蛋白的提取相對(duì)復(fù)雜。

 

植物dna提取

 

      提取植物中的DNA對(duì)植物基因工程,植物生理、病理研究等方面具有重要作用。不同植物的核酸結(jié)合蛋白的情況各不相同,因而需要采取不同的提取方法。植物中次生代謝產(chǎn)物多酚類化合物會(huì)影響DNA降解,同時(shí)多糖的污染也會(huì)影響植物DNA純度。因此從富含多酚和多糖的植物組織中分離獲得高質(zhì)量的基因組DNA難度較大。一般常用方法如下:

 

      一,CTAB 法

 

      CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法,CTAB是一種陽離子去污劑,它能與核酸形成復(fù)合物,這些復(fù)合物在低鹽溶液中會(huì)因溶解度的降低而沉淀,而在高鹽溶液中可解離,從而使DNA和多糖分開,再用乙醇沉淀DNA除去CTAB。在該法中使用的聚維酮 (PVP)與多酚結(jié)合形成復(fù)合物,從而可有效避免多酚類化合物影響DNA降解。

 

      二,SDS 法

 

      相比于CTAB,SDS法更加方便簡單。近年來科研者們提出了利用SDSTris-Cl-EDTA直接裂解細(xì)胞使其釋放出DNA的方法,后續(xù)的DNA純化過程中通常采用酚/氯仿處理,但對(duì)于植物DNA純化不是一個(gè)很好的選擇,因?yàn)榉拥氖褂每山档虳NA的提取效率和純度。實(shí)驗(yàn)證明,若采用較大的離心力和較長的離心時(shí)間,然后用氯仿一異戊醇代替酚來去除變性蛋白質(zhì),可以克服由于酚的摻入及殘留對(duì)以后酶切帶來的困難。

 

      三,氯化節(jié)法

 

      氯化節(jié)法的提取獲得率較高。原因可能為氯化節(jié)不僅與植物細(xì)胞壁上的多糖經(jīng)基反應(yīng)生成醚,而且與細(xì)胞液中多糖物質(zhì)反應(yīng)破壞糖鏈,有利于DNA的釋放和提純。

 

      四,高鹽低pH法

 

      高鹽低pH法是指以無機(jī)鹽和異丙烯為提純?cè)噭┨崛NA的方法。通常采用的無機(jī)鹽為低pH的醋酸鉀,用來沉淀蛋白質(zhì)。該方法方便省時(shí),所需樣品量少。

 

      五,果膠酶法

 

      利用果膠酶對(duì)植物破碎細(xì)胞進(jìn)行抽提的一種技術(shù)。

 

果膠酶法

      如何提取植物組織中的可溶性蛋白質(zhì)和代謝物?如何更快更簡便的獲得植物PCR擴(kuò)增所需的模板?艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商,為您推薦植物組織提取試劑盒和升級(jí)版植物快速PCR試劑盒。

 

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號(hào)規(guī)格說明
Plant Tissue Extraction KitK29650次提取植物可溶性蛋白質(zhì)和代謝物,用于各種下游應(yīng)用,例如蛋白質(zhì)印跡,2D凝膠電泳,免疫沉淀測定,酶活性測定和代謝物定量等。
PlantAdvance™ PCR KitM114425次在專利提取緩沖液中將一小片植物樣品“渦旋-煮沸-渦旋”只需15分鐘,即可獲得可用于PCR的模板。gDNA提取過程消除了常規(guī)植物組織液氮冷凍,機(jī)械破壞,有機(jī)提取,柱DNA純化或酒精沉淀等。

 

      植物組織提取試劑盒特色與優(yōu)勢

 

      1.從各種干燥和新鮮植物組織中提取可溶性蛋白以及其他生物分子和代謝物的有效方法;

      2.無需使用液氮,操作快速簡單;

      3.易于使用,可確保恒定的蛋白質(zhì)產(chǎn)量?2-9 mg / ml(取決于樣品類型)。

 

      廠家驗(yàn)證結(jié)果圖

 

廠家驗(yàn)證結(jié)果圖

 

     (A)植物組織裂解物的SDS-PAGE:各25μl生菜(20μg,泳道2),青椒(20μg,泳道3),鱷梨(40μg,泳道4)和蘭花葉(10μg,泳道5)加載到4-20% SDS-PAGE上,并在電泳后用考馬斯亮蘭染色。按照試劑盒方案制備植物裂解物。泳道1:Marker。

     (B)使用PicoProbe™G6P熒光測定試劑盒(Cat#K687)測量蘭花葉裂解液(5μg)中的葡萄糖-6-磷酸。

    (C)使用PicoProbe™G6PDH活性測定試劑盒(Cat#K751)測量蘭花葉裂解物(0.6μg)中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的活性。

 

       升級(jí)版植物快速PCR試劑盒特色與優(yōu)勢:

 

      1.無需耗時(shí)的DNA純化步驟;

      2.只需要少量樣品;

      3.適用于各種植物樣品的簡單通用protocol;

      4.應(yīng)用:植物PCR,基因/轉(zhuǎn)基因檢測,植物樣品基因分型。

 

      升級(jí)版植物快速PCR試劑盒的使用流程圖:

 

升級(jí)版植物快速PCR試劑盒的使用流程圖

 

       廠家對(duì)靈敏度的驗(yàn)證結(jié)果圖:

 

從各種葉片樣品中擴(kuò)增出700 bp的植物28S

 

從各種葉片樣品中擴(kuò)增出700 bp的植物28S。


 

       作為一家具有高端的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!

 

      艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級(jí)代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短時(shí)間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

 

產(chǎn)品中心分類
  • 高品質(zhì)保障 成熟的生產(chǎn)研發(fā)技術(shù)
  • 高性價(jià)比 價(jià)宜質(zhì)優(yōu),性價(jià)比高
  • 高效省心 從購買到使用,放心無憂
  • 安全運(yùn)輸 完善的保護(hù)措施安全運(yùn)輸

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