一、核酸檢測(cè)

2020年最令人談虎色變的莫過(guò)于新型冠狀病毒（2019 Novel Coronavirus, 2019-nCoV）了。處在疫情最嚴(yán)重的城市，武漢艾美捷科技的伙伴們?cè)谧龊冒踩雷o(hù)的同時(shí)，時(shí)刻關(guān)注著疫情防治和病毒診斷的相關(guān)信息，更期待能為擊退這次疫情助力！今天小艾準(zhǔn)備為大家梳理一下新冠病毒檢測(cè)的常規(guī)技術(shù)和方法。

目前，最常規(guī)的檢測(cè)方法是通過(guò)核酸和抗體免疫反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，核酸檢測(cè)主要檢測(cè)鼻咽拭子中的病毒核酸，抗體免疫檢測(cè)則通常是檢測(cè)患者血清或血漿樣本中的 IgM抗體及IgG 抗體。核酸檢測(cè)主要用于確診，免疫檢測(cè)試劑則多用于篩查。

2019-nCoV是一種RNA病毒，它的遺傳物質(zhì)是核糖核酸，其特異性核酸序列是與2019-nCoV其他病原體的標(biāo)志物。而2019-nCoV核酸檢測(cè)的目的就是為了在感染患者體內(nèi)找到該病毒的存在。目前，新型冠狀病毒核酸檢測(cè)普遍采用的是實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)（RT-qPCR）。

RT-qPCR核酸檢測(cè)的技術(shù)原理是：利用反轉(zhuǎn)錄酶在適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件下，以疑似患者痰液、鼻咽拭子等樣本中提取出來(lái)的病毒單鏈RNA為模板，合成互補(bǔ)鏈cDNA，再引入特異性擴(kuò)增引物，通過(guò)DNA聚合酶大量富集目標(biāo)DNA片段，放大病毒核酸的信號(hào)；在熒光探針的結(jié)合下，每擴(kuò)增一條特異性的DNA鏈就會(huì)形成一個(gè)熒光分子。熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步，通過(guò)熒光定量qPCR儀的接收分析，可獲得樣本的熒光強(qiáng)度增長(zhǎng)曲線，再與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比可計(jì)算得出該樣本中的病毒核酸含量。由于經(jīng)過(guò)設(shè)計(jì)的病毒特異性引物只能結(jié)合病毒的基因序列，因此只有被新型冠狀病毒感染的細(xì)胞組織或血液樣本才能使儀器產(chǎn)生熒光信號(hào)，該樣本來(lái)源才會(huì)被確診為病毒陽(yáng)性患者。

目前，普遍使用的新型冠狀病毒核算檢測(cè)試劑盒組分包括RT-qPCR反應(yīng)體系（Taq DNA聚合酶、Mg²⁺等）、一對(duì)特異性引物以及一個(gè)探針，該探針為新型冠狀病毒的一段特異性寡核苷酸序列。艾美捷科技可提供RT-qPCR試劑盒助力新型冠狀病毒核酸檢測(cè)：

該產(chǎn)品是基于多重?zé)晒釸T-PCR原理，可以以冠狀病毒RNA為模板進(jìn)行多重定量PCR反應(yīng)，有效檢出冠狀病毒的ORF1ab、N基因和E基因。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。

產(chǎn)品特點(diǎn):

• 特異性好，靈敏度高：本產(chǎn)品使用DNA/LNA水解探針?lè)ㄅc高品質(zhì)熱啟動(dòng)taq DNA酶，檢測(cè)靈敏度和特異性通常要顯著高于使用SYBR Green等熒光染料的方法。

• 可用于多重檢測(cè)：最多可進(jìn)行多達(dá)四重的反應(yīng)，可同時(shí)有效檢出冠狀病毒的ORF1ab、N基因和E基因。

• 操作簡(jiǎn)單，使用便捷：本產(chǎn)品包含RT-qPCR所需的通用組分，用戶只需自備引物、探針、樣品RNA。

• 逆轉(zhuǎn)錄和qPCR在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，反應(yīng)體系兼容UDG/dUTP防污染系統(tǒng)，降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。

二、抗體檢測(cè)法

與核酸檢測(cè)相比，抗體檢測(cè)樣本為血清或血漿，受樣本采樣的影響較小，有利于早期診斷和排除可疑病例，同時(shí)檢測(cè)方便、快速、適合大規(guī)模篩查。

IgG和IgM是最常用的傳染病抗體標(biāo)志物。人體在接觸外來(lái)病原體的時(shí)候，最早產(chǎn)生的抗體是IgM——通常用作急性感染的標(biāo)志物，由B細(xì)胞表面受體直接分泌，產(chǎn)生IgM的B細(xì)胞進(jìn)入淋巴結(jié)，在進(jìn)一步成熟后，分化為漿細(xì)胞，大量產(chǎn)生IgG（可作為恢復(fù)期的標(biāo)志物）。因此，應(yīng)盡量釆集患者急性期(最好在發(fā)病后7天內(nèi))、恢復(fù)期(發(fā)病后第3~4周)雙份血清用于新冠病毒抗體的測(cè)定。艾美捷科技可提供抗IgM或抗IgG，助力新型冠狀病毒IgM/IgG抗體檢測(cè)試劑盒以及檢測(cè)試紙的生產(chǎn)與研發(fā)：

備注：以上僅列舉了部分抗人IgM/IgG二抗，更多其他宿主、其他標(biāo)記的片段化及全分子二抗，詳詢艾美捷科技！

血清學(xué)IgM/IgG抗體檢測(cè)對(duì)發(fā)熱病人進(jìn)行快速初篩，可提高疑似病例確診率。如針對(duì)無(wú)癥狀人群大規(guī)模篩查，通過(guò)檢測(cè)IgM、IgG，有利于早期檢出，可作為核酸檢測(cè)的一個(gè)互補(bǔ)。 總之，新冠病毒抗體檢測(cè)可作為RT-qPCR核酸檢測(cè)的一個(gè)互補(bǔ)，它們的聯(lián)合檢測(cè)將會(huì)顯著提高檢測(cè)的靈敏度，減少誤診率或漏診率。

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