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m6A RNA甲基化從富集純化到二代測序,一招搞定!

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2021-08-12     
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炎炎夏日,當(dāng)大家都捧著西瓜,在電視前收看六邊形戰(zhàn)士馬龍?jiān)跂|京奧運(yùn)會(huì)拼搏的身影時(shí),作為科研工作者,卻只能一如既往的在科研崗位上辛苦耕耘。如何提高實(shí)驗(yàn)效率,再不耽誤發(fā)文章的情況下,擠出一點(diǎn)點(diǎn)時(shí)間看看比賽呢,估計(jì)是很多人共同的心聲!

 

工欲善其事必先利其器。一款好的產(chǎn)品能幫助客戶極大程度提高實(shí)驗(yàn)效率,減少工作量的同時(shí)還能降低實(shí)驗(yàn)操作帶來的風(fēng)險(xiǎn)。比如有一位客戶想從RNA開始,完成最終目標(biāo)——分子生物學(xué)分析。他的設(shè)計(jì)思路如圖:

 

total-rna.png

 

乍一看,貌似實(shí)驗(yàn)還是挺復(fù)雜的。但是不怕,因?yàn)樾“幸豢畛銎嬷苿俚姆▽殻褪莔6A RNA富集純化與二代測序試劑盒EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq Kit,貨號(hào)P-9016。它能幫你從RNA樣品開始,在不到6小時(shí)的時(shí)間內(nèi),完成m6A RNA富集純化——文庫建立——二代測序的所有過程,手動(dòng)操作時(shí)間還不到1小時(shí),真可謂一招搞定!

 

我們知道,m6A(N6-methyladenosine,6-甲基腺嘌呤)是真核生物mRNA內(nèi)部序列中最常見的一種甲基化修飾,占所有RNA甲基化修飾的80%以上,并且存在于各種物種中。m6A主要分布在mRNA上,在非編碼 RNA(ncRNA)如tRNA、rRNA和snRNA上也普遍存在。m6A 修飾由甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物 METTL3 催化,并被 m6A RNA 去甲基化酶 FTO 和 ALKBH5 去除,它們以 α-酮戊二酸 (α-KG) 和 Fe2+ 依賴性方式催化 m6A 去甲基化。

 

已知 METTL3、FTO 和 ALKBH5 在許多生物過程中發(fā)揮重要作用,從生長代謝到生育。作為一種動(dòng)態(tài)可逆的修飾方式,m6A RNA可以功能性的調(diào)節(jié)真核生物的轉(zhuǎn)錄組從而影響mRNA的剪接、出核、定位、翻譯和穩(wěn)定。m6A RNA出現(xiàn)在多種重要的細(xì)胞生命過程中,意味著mRNA甲基化參與了多種生物學(xué)過程,如干細(xì)胞分化、生物節(jié)律等,同時(shí)也參與了多種疾病的發(fā)生,包括腫瘤、肥胖和不育等。因此精準(zhǔn)地檢測m6A,對(duì)了解其與人類發(fā)育和常見疾病的廣泛聯(lián)系有著重要意義。

 

為準(zhǔn)確鑒定m6A,目前已經(jīng)開發(fā)了多種檢測方法,包括MeRIP-seq,PA-m6A-seq, miCLIP和m6A-CLIP。其中,MeRIP-seq已被廣泛用于m6A分析,但其精確度較低,且需要較大的樣本起始量(>300 ug),限制了組織或細(xì)胞RNA得率少時(shí)對(duì)m6A的研究。雖然PA-m6A-seq, miCLIP和m6A-CLIP在分辨率方面進(jìn)行了改進(jìn),但是重復(fù)性差且過程復(fù)雜,不僅費(fèi)時(shí)(>2天)且成本高。

 

而艾美捷這款EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq Kit,通過CUT&RUN技術(shù)原理實(shí)現(xiàn)對(duì)m6A RNA的富集純化以及二代測序。CUT&RUN 通過使用靶標(biāo)特異性一抗(m6A 抗體)和核酸酶分離與富集特異性目的片段。連接的第一鏈cDNA合成并用適配器標(biāo)記,再進(jìn)行文庫擴(kuò)增和加標(biāo)簽,并用二代測序分析。

如果需要對(duì)m6A RNA甲基化進(jìn)行定量,我們還有專門的試劑盒產(chǎn)品P-9005,EpiQuikTM m6A RNA Methylation Quantification Kit(Colorimetric).這可是我們的備貨爆款,常年現(xiàn)貨哦!

 

二代測序分析.png

 

試劑盒優(yōu)勢:

m6A-Seq試劑盒優(yōu)勢:.jpg

結(jié)果展示:

 

結(jié)果展示.png

 

艾美捷科技(AmyJet Scientific)作為一家具有高端的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)團(tuán)隊(duì)-艾美捷生物技術(shù)中心,進(jìn)入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!

 

艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級(jí)代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、BioVendor、Caisson Labs、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等,可以在短時(shí)間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

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