T淋巴細(xì)胞特異性識(shí)別抗原后，可被雙活化信號(hào)刺激后，通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)啟動(dòng)有關(guān)基因轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而發(fā)生增殖，這是淋巴細(xì)胞的基本功能，反映了其對(duì)抗原的識(shí)別和發(fā)生免疫應(yīng)答的能力。而流式細(xì)胞術(shù)，就是最常用的檢測(cè)T淋巴細(xì)胞活化增殖的方法。

      如何使用流式，簡(jiǎn)單快捷的檢測(cè)活化的血樣中T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)呢？

      作為專(zhuān)業(yè)的流式抗體與解決方案，艾美捷科技，為您推薦流式科研與診斷方案領(lǐng)導(dǎo)者EXBio的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)檢測(cè)試劑盒（T-cell BlastoFlowEx Kit）

	T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)檢測(cè)試劑盒
	T-cell BlastoFlowEx Kit
	貨號(hào)：ED7642
	規(guī)格：100 test
反應(yīng)種屬	人
應(yīng)用類(lèi)型	流式細(xì)胞術(shù)，F(xiàn)C
試劑盒原理	該試劑盒使用抗CD3和抗Ki67抗體混合物檢測(cè)增殖的淋巴細(xì)胞。

       試劑盒組分：

       實(shí)驗(yàn)流程：

       1.從培養(yǎng)箱中取出試管，取下并丟棄管蓋。每管中加入25 ul EDTA溶液，混合。

       2.在37℃下孵育10分鐘。

       3.加入2ml的PBS，混合。400g離心細(xì)胞5分鐘，移除上清液。

       4.輕輕搖動(dòng)管子擾亂沉淀。加入2ml的稀釋固定和裂解溶液，混合。室溫下孵育10分鐘。

       5.400g離心細(xì)胞5分鐘，移除上清液。

       6.加入0.5ml稀釋的破膜溶液，混合。室溫下孵育10分鐘。

       7.加入2ml的PBS。400g離心細(xì)胞5分鐘，移除上清液。

       8.加入50 ul的CD3/Ki-67 PE抗體預(yù)混液，混勻，室溫下孵育至少30分鐘。

       9.加入2ml PBS。400g離心細(xì)胞5分鐘，移除上清液。

       10.用0.1-0.3ml的1％甲醛PBS溶液或者稀釋的固定和裂解液（1份固定裂解液液+9份PBS的緩沖液）重懸細(xì)胞。在2-8℃下暗室條件下儲(chǔ)存處理后的樣品，直到分析。

       結(jié)果展示：

       1.用巨細(xì)胞病毒 -IE-1蛋白抗原肽體外刺激巨細(xì)胞病毒陽(yáng)性供體全血

       2.用巨細(xì)胞病毒 pp65抗原肽體外刺激巨細(xì)胞病毒陽(yáng)性供體全血

       3.全血在植物血凝素（PHA）管（貨號(hào)：ED7634）中刺激，用T細(xì)胞BlastoFlowEx試劑盒處理并在流式細(xì)胞儀中進(jìn)行分析。 CD3 + /單細(xì)胞的目標(biāo)亞群顯示為PE熒光的直方圖。根據(jù)刺激陰性對(duì)照管（貨號(hào)：ED7637）確定Ki-67陰性峰和Ki-67陽(yáng)性峰之間的區(qū)分線(xiàn)。

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