背景 

泛素是一種小的多肽，可以通過其C-末端與目標(biāo)蛋白質(zhì)上的賴氨酸殘基的胺基團(tuán)結(jié)合。這種結(jié)合被稱為單泛素化。額外的泛素結(jié)構(gòu)可以通過泛素中存在的七個(gè)賴氨酸殘基之一與初始泛素結(jié)合。這些泛素鏈的形成被稱為多泛素化。泛素化是一種常見的調(diào)節(jié)蛋白的穩(wěn)定性和功能的翻譯后修飾。 

蛋白的泛素化需要3種酶的參與，分別是泛素活化酶（ubiquitin-activating enzyme，E1）、泛素偶聯(lián)酶（ubiquitin conjugation enzyme，E2）和泛素連接酶（ubiquitin ligase，E3）。在3種酶的作用下，泛素（ubiquitin，ub）分子的C端羧基與底物蛋白賴氨酸（Lys）殘基的?氨基形成酰胺異構(gòu)肽。同時(shí)，泛素也能發(fā)生泛素化修飾形成不同的泛素鏈，而不同的泛素鏈又介導(dǎo)不同的生物功能。泛素化修飾不僅參與底物蛋白的26S蛋白酶體降解過程，還參與基因轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞周期、DNA損傷和免疫應(yīng)激等生物過程。 

大規(guī)模富集泛素聚合物是研究泛素化系統(tǒng)的關(guān)鍵技術(shù)。傳統(tǒng)的泛素化蛋白質(zhì)表征策略通常需要使用表位標(biāo)簽對(duì)過表達(dá)的泛素進(jìn)行免疫沉淀，或使用泛素抗體（適用于大規(guī)模研究，但成本較高）。另一種方法是使用特定的泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域（UBA）來分離多泛素化蛋白質(zhì)，但這些蛋白質(zhì)對(duì)泛素的親和力較低。此外，這些策略需要包含去泛素化酶和蛋白酶體活性的抑制劑，以保護(hù)多泛素化蛋白質(zhì)的完整性，這些條件可能會(huì)改變細(xì)胞生理狀態(tài)，從而可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生負(fù)面影響或引入實(shí)驗(yàn)誤差。  

Biogradetech開發(fā)了串聯(lián)泛素親和磁珠系列產(chǎn)品來克服這些問題，串聯(lián)泛素親和磁珠本質(zhì)上是串聯(lián)的UBA，其與四聚泛素的解離常數(shù)在納摩爾范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)證明，即使在沒有抑制劑的情況下，它也能保護(hù)蛋白質(zhì)免受去泛素化和蛋白酶體介導(dǎo)的降解的影響。其對(duì)多泛素化蛋白質(zhì)的納摩爾親和力使得從細(xì)胞系和組織中高效分離和表征這些蛋白質(zhì)成為可能。該系列產(chǎn)品的優(yōu)越性使其能夠高效檢測(cè)多泛素化蛋白質(zhì)的天然狀態(tài)，而其多功能性則滿足了廣泛的實(shí)驗(yàn)需求。 

串聯(lián)泛素親和磁珠是將串聯(lián)的UBA結(jié)構(gòu)域直接耦合到磁珠上，用于通過免疫印跡和/或下游蛋白質(zhì)組學(xué)研究來鑒定和表征多泛素化蛋白質(zhì)。串聯(lián)泛素親和磁珠方便地實(shí)現(xiàn)了多泛素化蛋白質(zhì)的“一步式”下拉純化。   

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)： 

1.可快速有效的實(shí)現(xiàn)泛素化蛋白的富集和純化 

2.相較于單個(gè)UBA結(jié)構(gòu)域，對(duì)多泛素化蛋白質(zhì)具有高達(dá)1000倍的親和力 

3.與泛素抗體相比有更高的特異性和親和力 

4.保護(hù)蛋白質(zhì)不被去泛素化，同時(shí)可避免靶蛋白發(fā)生蛋白酶體介導(dǎo)的降解

5.避免過度表達(dá)帶表位標(biāo)簽的泛素進(jìn)行下拉純化 

6.磁珠使得下拉純化更加高效，并且背景信號(hào)更低

※通用性&特異性親和磁珠產(chǎn)品推薦

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