此方法涉及抗IgM 抗體的IgG 耦聯(lián)蛋白A 或G 珠子（方法見下文）。這些珠子就可以在常規(guī)免疫共沉淀程序中使用IgM 抗體。通過結(jié)合抗-IgM 抗體，IgM 可以間接結(jié)合珠子。
下面的過程介紹了用DMP 如何把抗IgM 抗體與蛋白A 或G 涂層的珠子耦合：

試劑：

200mM 硼酸鹽緩沖液+ 3M 氯化鈉pH 值9.0

含20mM（DMP）的200mM 硼酸緩沖液+ 3M 氯化鈉，pH 值9.0

200mM 乙醇胺pH 值8.0（乙醇胺儲液1:80 稀釋）

磷酸鹽緩沖液（PBS）

PBS+ 0.1％ 疊氮化鈉

200mM 甘氨酸pH 值2.5

蛋白A 或G 珠子（Sepharose）

方法：

我們建議每ml 濕珠子使用每2mg 抗體（使用適當(dāng)?shù)目贵w/蛋白A 或G 結(jié)合物）。

1.使用前1 小時將250mg 蛋白A 或G Sepharose（珠子）加入2ml PBS+0.1％ 疊氮鈉。這使得珠子膨脹。

2. 將珠子與適當(dāng)濃度的抗體室溫混合2 小時（旋轉(zhuǎn)或滾動）。

3. 2500rpm 離心5 分鐘。

4. 10 倍體積200mM 硼酸緩沖液+ 3M 氯化鈉洗珠子兩次。

5. 20mM DMP 重懸珠子。

6. 室溫旋轉(zhuǎn)/振蕩珠子30 分鐘。

7. 將珠子2500rpm 離心5 分鐘。

8. 200mM 硼酸鹽緩沖液+ 3M 氯化鈉洗珠子2 次。

9. 20mM 乙醇胺洗珠子1 次。這步終止耦合反應(yīng)。

10. 20mM 乙醇胺重懸珠子并室溫旋轉(zhuǎn)2 小時。

11. 將珠子2500rpm 離心5 分鐘。

12. PBS 洗珠子2 次。

13. 200mM 甘氨酸洗珠子2 次。

14. PBS 洗珠子2 次。

15. 珠子可以4°C 儲存在PBS + 0.1％ 疊氮鈉溶液里（PBS︰珠=1:1）。

16. 這些珠子可用于IgM 抗體的免疫沉淀實(shí)驗(yàn)。從這里就可以按照我們前面描述的免疫沉淀實(shí)驗(yàn)方法繼續(xù)進(jìn)行免疫沉淀程序了。