TECHNICAL COLUMN
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一、流式細(xì)胞儀:射流系統(tǒng)

懸浮緩沖液中被染色細(xì)胞樣品通過(guò)流式細(xì)胞儀時(shí),由于鞘液的作用,細(xì)胞被限制在液流的軸線(xiàn)上,從而能通過(guò)一個(gè)非常小的噴嘴。這種微小 的“流液束”使細(xì)胞一個(gè)接一個(gè)地通過(guò)激光。細(xì)胞/顆粒通過(guò)通道時(shí)所散射的光線(xiàn)將被多個(gè)檢測(cè)器檢測(cè)到。其中光柱前有一個(gè)檢測(cè)器,稱(chēng)為前 向散射 (Forward Scatter,或簡(jiǎn)稱(chēng) FS),而光柱的旁邊則有幾個(gè)檢測(cè)器,稱(chēng)為側(cè)向散射 (Side Scatter,或簡(jiǎn)稱(chēng) SS)。熒光檢測(cè)器是用作檢測(cè) 由陽(yáng)性染色的細(xì)胞/顆粒散發(fā)的熒光。
二、流式細(xì)胞儀:前向和側(cè)向散射光的檢測(cè)
顆粒/細(xì)胞通過(guò)光束時(shí)使光線(xiàn)散射,并通過(guò)前向散射 (FS) 和側(cè)向散射 (SS) 而被檢測(cè)到。散射光和熒光會(huì)被檢測(cè)并一并分析。其中前向散射與 細(xì)胞大小有關(guān),而側(cè)向散射則取決于顆粒/細(xì)胞的密度(即胞漿顆粒數(shù)量、細(xì)胞膜尺寸)。因此,透過(guò)這種方式,根據(jù)細(xì)胞大小和密度通常可 把不同細(xì)胞群區(qū)分開(kāi)。
細(xì)胞散射的光線(xiàn)方向與以下有關(guān):
細(xì)胞大小(前向散射;FS)
粒度(側(cè)向散射;SS)
下圖顯示綠色激光照射細(xì)胞時(shí)的光散射模式:

此技術(shù)的一個(gè)有用的例子是使用流式細(xì)胞儀分析血液樣本。
側(cè)向散射和前向散射數(shù)值都很高的龐大細(xì)胞群屬較大和較高粒度的粒細(xì)胞。
單核細(xì)胞屬形狀較大的細(xì)胞,但粒度較低,因此其細(xì)胞群的前向散射數(shù)值高而側(cè)向散射數(shù)值低。
前向散射較低的獨(dú)立細(xì)胞群屬較小的淋巴細(xì)胞和淋巴母細(xì)胞。它們不是粒狀細(xì)胞,因此側(cè)向散射也較低。
因此,這些細(xì)胞可以根據(jù)其前向散射和側(cè)向散射分成不同的細(xì)胞群。

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