組蛋白有四種類型：H2A、H2B、H3、H4，組蛋白是染色體基本結(jié)構(gòu)蛋白，因富含堿性氨基酸 Arg 和 Lys 而呈堿性，可與酸性的 DNA 緊密結(jié)合。因?yàn)榻M蛋白是偏堿性的，因此我們可以使用酸法來提取。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：

1、將 3-5×105 個(gè)細(xì)胞種到 6 孔板中，接著進(jìn)行自己需要的實(shí)驗(yàn)處理，處理結(jié)束后開始收蛋白，先用 1×PBS 將細(xì)胞洗兩次，每次吸盡上清。

2、每孔加入 200ul NETN 裂解液，冰上裂解 15min

3、用細(xì)胞刮刮細(xì)胞，將細(xì)胞收集于 1.5mlEP 管中，1500g,4℃，離心 10min

4、離心結(jié)束后可以在管底看到一小團(tuán)接近透明的沉淀，小心吸盡上清，用 1ML NETN buffer 洗沉淀一次或兩次，1500g,4℃，離心 10min

5、吸盡上清，小心吸，沉淀容易被吸走，加入 0.2M HCL 100ul （濃鹽酸的濃度為 12M）冰水裂解 30min,(30min 后沉淀變成一個(gè)白色的小團(tuán)塊)

6、12000RPM，4℃，15min 離心，此時(shí)組蛋白已經(jīng)溶解在上清中，將上清轉(zhuǎn)移到新的 EP 管中，加入 20ul 的 1M Tris ph=8.0 中和酸性（5 倍體積的 HCL 加 1 倍體積的 1M Tris PH=8.0, 如 100ul 的上清中，可加入 20ul 的 1M Tris。

若中和不充分，則在下一步加入 SDS 的時(shí)候溶液會(huì)呈現(xiàn)黃色，可適量補(bǔ)加 1M Tris PH=8.0，只到溶液恢復(fù)藍(lán)色）。

7、可用考馬斯法測(cè)蛋白濃度

8、用 SDS 煮蛋白，100℃，10min.。接下來可進(jìn)行 Western blot 實(shí)驗(yàn)。

9、跑膠時(shí)，上樣量為 5ug 時(shí)比較適宜。可以根據(jù)自己的具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)行調(diào)整。