真核細(xì)胞的細(xì)胞骨架是由微絲、微管和中間纖維組成。肌動(dòng)蛋白單體（G-Actin）一個(gè)接一個(gè)連成一串肌動(dòng)蛋白鏈，而微絲是由兩股方向相同的肌動(dòng)蛋白鏈以螺旋的形式組成的呈圓筒狀的纖維。微絲能被組裝和去組裝。當(dāng)單體上結(jié)合的是ATP時(shí)，就會(huì)有較高的相互親和力，單體趨向于聚合成多聚體，就是組裝。而當(dāng)ATP水解成ADP后，單體親和力就會(huì)下降，多聚體趨向解聚，即是去組裝。微管是由微管蛋白單體以非共價(jià)鍵結(jié)合在一起構(gòu)成的蛋白多聚體。微管蛋白有2種亞基，即α-微管蛋白（α-tubulin）和β-微管蛋白（β-tubulin）。2個(gè)亞基結(jié)合在一起并以線性排列，形成一條微管原纖維。13條這樣的微管原纖維圍在一起，形成一個(gè)中空的管狀纖維結(jié)構(gòu)，直徑約22～25nm，即為微管。微管蛋白的組裝與去組裝與GTP和GDP有關(guān)。

actin聚合方案

原理：

此肌動(dòng)蛋白聚合分析生化試劑盒基于在聚合過(guò)程中pyrene（芘）結(jié)合Actin時(shí)熒光增強(qiáng)的原理。隨著時(shí)間的推移，在聚合過(guò)程中，當(dāng)芘G-actin（單體）形成芘F-actin（纖維形肌動(dòng)蛋白）時(shí)能夠檢測(cè)到熒光增強(qiáng)。此外，通過(guò)使用預(yù)先形成的芘F-actin，還可以進(jìn)行解聚。肌動(dòng)蛋白聚合分析生化試劑盒是一種非常快速和經(jīng)濟(jì)的研究肌動(dòng)蛋白聚合/解聚的方案。

應(yīng)用：

1.通過(guò)添加組織提取物，肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白或化合物來(lái)分析其對(duì)Actin聚合或解聚的影響。

2.通過(guò)添加F-actin成核蛋白，化合物或提取物來(lái)分析其對(duì)Actin聚合的影響。

3.通過(guò)添加F-肌動(dòng)蛋白切斷蛋白，化合物或組織提取物來(lái)分析其對(duì)F-actin穩(wěn)態(tài)水平的影響。

4.確定在各種實(shí)驗(yàn)條件下肌動(dòng)蛋白聚合的臨界濃度。

Tubulin 聚合方案

1、tubulin聚合分析有兩種形式：1）光散射（也稱為吸光度或濁度）；2）基于DAPI熒光團(tuán)的熒光形式。 兩種方法都對(duì)聚合反應(yīng)的抑制劑和增強(qiáng)劑敏感。

2、標(biāo)準(zhǔn)的Tubulin聚合曲線：I（成核期），II（生長(zhǎng)期），III（穩(wěn)態(tài)期）（圖1）

3、在聚合反應(yīng)增強(qiáng)劑（Paclitaxel 紫杉醇）和抑制劑（Nocodazole 諾考達(dá)唑）存在下的Tubulin聚合曲線：（貨號(hào) BK006P）（圖2）

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