真核細胞的細胞骨架是與維持細胞形態(tài)結(jié)構和細胞運動有關的纖維網(wǎng)絡，由微絲、微管和中間纖維組成。肌動蛋白單體（G-Actin）一個接一個連成一串肌動蛋白鏈，而微絲是由兩股方向相同的肌動蛋白鏈以螺旋的形式組成的呈圓筒狀的纖維。微絲能被組裝和去組裝。當單體上結(jié)合的是ATP時，就會有較高的相互親和力，單體趨向于聚合成多聚體，就是組裝。而當ATP水解成ADP后，單體親和力就會下降，多聚體趨向解聚，即是去組裝。

 

 

      肌動蛋白是如何聚合與解聚的？如何研究肌動蛋白的這一功能？是否有這樣的分析方法呢？

 

 

      作為專業(yè)的生命科學解決方案供應商，艾美捷科技為您推薦全球暢銷的肌動蛋白聚合生化分析試劑盒：

 

      原理：

       此肌動蛋白聚合分析生化試劑盒基于在聚合過程中pyrene（芘）結(jié)合Actin時熒光增強的原理。隨著時間的推移，在聚合過程中，當芘G-actin（單體）形成芘F-actin（纖維形肌動蛋白）時能夠檢測到熒光增強。此外，通過使用預先形成的芘F-actin，還可以進行解聚。肌動蛋白聚合分析生化試劑盒是一種非常快速和經(jīng)濟的研究肌動蛋白聚合/解聚的方案。

 

      應用：

      1.通過添加組織提取物，肌動蛋白結(jié)合蛋白或化合物來分析其對Actin聚合或解聚的影響。

      2.通過添加F-actin成核蛋白，化合物或提取物來分析其對Actin聚合的影響。

      3.通過添加F-肌動蛋白切斷蛋白，化合物或組織提取物來分析其對F-actin穩(wěn)態(tài)水平的影響。

      4.確定在各種實驗條件下肌動蛋白聚合的臨界濃度。

 

 

      儀器設備：

      熒光分光光度計（比色皿或96孔板），在365nm激發(fā)波長下具有4-10nm帶寬，在407nm發(fā)射波長下具有4-10nm帶寬。

 

 

      G-actin聚合形成F-actin的過程：

 

 

 

 

      actin聚合的三個階段：

 

 

 

      G-actin聚合過程精彩視頻：

 

 

 

      應用實例：

 

      使用此肌動蛋白聚合分析生化試劑盒研究Arp2/3和WASP的VCA結(jié)構域?qū)ctin聚合速率的影響。如下圖：

 

 

      已發(fā)表高分文章：

      1. An oncogenic role of Agrin in regulating focal adhesion integrity in hepatocellular carcinoma.Nature Communications. 2015.

      2. Fluorogenic probes for live-cell imaging of the cytoskeleton. Nature Methods. 2014.

      3. Phosphorylation of CRN2 by CK2 regulates F-actin and Arp2/3 interaction and inhibits cell migration.Scientific Reports. 2012.

      4.Chlamydia trachomatis Tarp cooperates with the Arp2/3 complex to increase the rate of actin polymerization.Biochemical and Biophysical Research Communications. 2012.

 

 

      Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質(zhì)，活細胞成像等相關領域，提供對應的蛋白質(zhì)，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線還在不斷的擴大中。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務。

 

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