泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-proteasome system, UPS)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)降解的主要途徑，參與細(xì)胞內(nèi)80%以上蛋白質(zhì)的降解。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)降解蛋白的途徑包括兩個(gè)主要階段。第一階段為泛素與蛋白底物的相互作用，第二階段為蛋白酶體對底物的降解。

一、泛素-蛋白酶體系統(tǒng)

泛素-蛋白酶體系統(tǒng)由以下幾個(gè)組分構(gòu)成：①泛素，②泛素活化酶E1，③泛素結(jié)合酶E2，④泛素連接酶E3，⑤蛋白酶體（2.5MDa）

二、雙泛素底物

泛素-蛋白酶體（ubiquitin-proteasome system，UPS）途徑介導(dǎo)的蛋白降解是機(jī)體調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白水平與功能的一個(gè)重要機(jī)制。負(fù)責(zé)執(zhí)行這個(gè)調(diào)控過程的組成成分包括泛素及其啟動酶系統(tǒng)和蛋白酶體系統(tǒng)。泛素啟動酶系統(tǒng)負(fù)責(zé)活化泛素，并將其結(jié)合到待降解的蛋白上，形成靶蛋白多聚泛素鏈，即泛素化。蛋白酶體系統(tǒng)可以識別已泛素化的蛋白并將其降解。此外，細(xì)胞內(nèi)還有另一類形成反向調(diào)節(jié)的解離泛素鏈分子的蛋白酶——去泛素化酶(Deubiquitinase，DUB)。

三、全泛素及多聚泛素鏈

根據(jù)蛋白底物所添加泛素分子數(shù)目的不同，泛素化修飾分為單泛素化修飾和多泛素化修飾。為您提供針對各種位點(diǎn)突變以及帶有不同標(biāo)記的泛素重組蛋白：

四、去泛素化酶(DUB)

去泛素化酶是一類數(shù)量很大的蛋白酶家族，人類基因組編碼大約100個(gè)去泛素化酶，主要分為五個(gè)家族，分別是泛素羧基末端水解酶（UCH）家族，泛素特異性蛋白酶（USP/UBP）家族，Otubaim（OTU）家族，Josephin結(jié)構(gòu)域蛋白家族及JAMM家族。

五、分離富集泛素化蛋白

基于UBD對泛素的高親和力，泛素研究專家LifeSensors已開發(fā)出利用串聯(lián)泛素結(jié)合實(shí)體（Tandem Ubiquitin Binding Entities，TUBE）從細(xì)胞和組織裂解液中特異性分離富集泛素化蛋白的技術(shù)。TUBEs由多個(gè)UBDs串聯(lián)構(gòu)成，對泛素鏈親和性極高，而且，TUBEs通過與泛素鏈的結(jié)合可以保護(hù)蛋白質(zhì)不被去泛素化，同時(shí)避免靶蛋白發(fā)生蛋白酶體介導(dǎo)的降解，為研究泛素化蛋白質(zhì)組學(xué)提供了很好的工具。

六、如何判斷蛋白是否泛素化? 是哪種類型的泛素化修飾？

UbiTest檢測原理：先通過TUBEs富集純化樣本中的泛素化總蛋白，隨后，將分離到的泛素化蛋白經(jīng)或者不經(jīng)去泛素化酶DUBs處理，（+）/（-）DUBs處理的蛋白樣本用靶蛋白的特異性抗體進(jìn)行免疫印跡（WB）分析，通過條帶比對分析實(shí)現(xiàn)對泛素化蛋白的定性及半定量檢測。