SYSY是m6A特異性抗體的D一家商業(yè)供應(yīng)商。我們的產(chǎn)品已在700多篇科研發(fā)表論文中使用，從而使得研究RNA甲基化的全新方法得以發(fā)展。單克隆和重組抗體變體的開(kāi)發(fā)使得非常成功的多克隆抗m6a抗體得到了補(bǔ)充，并保證了Z佳的可重復(fù)性和批次間一致性。抗m6A抗體適用于廣泛的應(yīng)用，例如MeRIP、m6A-CLIP和miCLIP測(cè)序，經(jīng)典IP、斑點(diǎn)印跡和ELISA。

m6A 抗體

簡(jiǎn)介

DNA和RNA水平上的核酸修飾在許多不同的生物過(guò)程中起著重要作用。在原核生物中，在DNA 5'-GATC-3'模序上腺苷殘基的DAM甲基化使得細(xì)胞可在錯(cuò)配修復(fù)過(guò)程中區(qū)分親本鏈和子鏈（A L Lu, D Y Chang, 1988）。在真核生物中，DNA不同的可遺傳CpG甲基化模式在基因表達(dá)的差異表觀遺傳調(diào)控中發(fā)揮重要作用（Meehan et al., 1992）。

RNA分子受多種轉(zhuǎn)錄后修飾的影響。在成熟過(guò)程中，mRNA分子經(jīng)歷剪接、5′加帽和3′-聚腺苷酸化，這些都是獲得具有完備功能的mRNA所必需的（Carter, 1994）。

最近，單核苷酸殘基的其他化學(xué)修飾已表明會(huì)參與蛋白質(zhì)翻譯和RNA加工及其穩(wěn)定性的微調(diào)。其中Z重要的修飾是不同RNA殘基在不同位置的甲基化，如m1A、m5C、 m6Am和最后但同樣重要的N6 -甲基腺苷，也稱為m6A，它是Z豐富且可能也是Z重要的RNA甲基化變體（Zhou et al., 2020）。而像METTL甲基化轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物這樣的m6A writers和像FTO這樣的去甲基化erasers （圖1），它們可在甲基化轉(zhuǎn)移酶識(shí)別位點(diǎn)上微調(diào)m6A RNA修飾的可逆狀態(tài)，即所謂的DRACH模序（Sergeeva et al., 2020）。SYSY抗體從一開(kāi)始便參與其中。

圖1： 轉(zhuǎn)錄后RNA甲基化和去甲基化是由writers （METTL復(fù)合體）和erasers （如FTO）進(jìn)行的。而由此產(chǎn)生的位點(diǎn)特異性RNA修飾會(huì)進(jìn)一步影響RNA加工、翻譯和穩(wěn)定性。

探索一切的起點(diǎn)，剪接體

1987年，Peter Bringmann和Reinhard Luehrmann開(kāi)發(fā)了第一個(gè)針對(duì)m6A的多克隆抗體，用于研究這種RNA修飾在真核剪接體中的相關(guān)性。這些抗體使得m6A修飾的小核RNA （snRNAs） U2、U4和U6能夠從小核蛋白（snRNPs）中定量免疫分離（Bringmann, Lührmann, 1987）。

1997年，SySy將R. Luehrmann和P. Bringmann的原始m6A抗血清納入其目錄，成為了m6A特異性抗體的第一家商業(yè)供應(yīng)商。

通過(guò)MeRIP測(cè)序發(fā)現(xiàn)m6ARNA甲基化

隨后，N6 -甲基腺苷或m6A修飾被證實(shí)參與了更多的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控過(guò)程，而轉(zhuǎn)錄組的m6A甲基化成為一個(gè)全新的、快速發(fā)展的研究領(lǐng)域。Kate Meyer （Meyer et al., 2012）和Dan Dominissini （Dominissini et al., 2012 and 2013）發(fā)表的關(guān)鍵論文為我們親和純化的m6A兔多克隆抗體（cat. no. 202 003）在全球的成功鋪平了道路。Meyer和Dominissini也開(kāi)發(fā)了基于抗體的m6A測(cè)序方法，這是一種基于對(duì)攜帶m6A修飾的免疫分離RNA片段（100 -200 nt長(zhǎng)）進(jìn)行平行測(cè)序的方法（圖2）。

圖 2：MeRIP測(cè)序是基于對(duì)免疫分離m6A修飾的RNA片段的平行測(cè)序。

這種新技術(shù)，又名為MeRIP測(cè)序，使得科學(xué)家能夠發(fā)現(xiàn)眾多轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機(jī)制，且所有這些機(jī)制都是由m6A修飾調(diào)節(jié)的，也引起了科學(xué)發(fā)表論文數(shù)量的持續(xù)增長(zhǎng)（圖3）。

 圖3：m6A相關(guān)的科學(xué)發(fā)表論文數(shù)量隨著時(shí)間的發(fā)展而增長(zhǎng)。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)M6A峰富集在3' -UTR區(qū)域、停止密碼子附近和長(zhǎng)外顯子內(nèi)（7、8）。研究表明，m6A修飾可以影響RNA生命周期的每個(gè)過(guò)程，以及許多生理過(guò)程，例如干細(xì)胞發(fā)育、翻譯調(diào)節(jié)、癌癥、脂肪形成等等（Linder et al., 2015）。

先進(jìn)技術(shù)

通過(guò)MeRIP測(cè)序，m6A殘基可以映射到100-200 nt長(zhǎng)區(qū)域。通過(guò)將m6A修飾分配到已識(shí)別的DRACH模序上，可以極大縮小m6A殘基的確切位置。然而，對(duì)于單核苷酸分辨率，必須開(kāi)發(fā)更先進(jìn)的技術(shù)。M6A - clip和miCLIP是基于m6A位點(diǎn)特異性UV誘導(dǎo)的交聯(lián)抗體，在cDNA合成過(guò)程中會(huì)誘導(dǎo)可預(yù)測(cè)的突變和截?cái)嗄Ｊ健＿@使得m6A殘基的映射更加精確（Linder et al., 2015, Ke et al., 2015）。

SYSY抗體可助你在RNA甲基化研究中更勝一籌！

參考文獻(xiàn)：

A L Lu, D Y Chang, 1988: Repair of single base-pair transversion mismatches of Escherichia coli in vitro: correction of certain A/G mismatches is independent of dam methylation and host mutHLS gene functions. PMID: 3284785

Bringmann, Lührmann, 1987: Antibodies specific for N6-methyladenosine react with intact snRNPs U2 and U4/U6. PMID: 2951275

Carter, 1994: Spatial localization of pre-mRNA transcription and processing within the nucleus. PMID: 7765739

Dominissini et al., 2012: Topology of the human and mouse m6A RNA methylomes revealed by m6A-seq. PMID: 22575960

Dominissini et al., 2013: Transcriptome-wide mapping of N(6)-methyladenosine by m(6)A-seq based on immunocapturing and massively parallel sequencing. PMID: 23288318

Ke et al., 2015: A majority of m6A residues are in the last exons, allowing the potential for 3' UTR regulation. PMID: 26404942

Linder et al., 2015: Single-nucleotide-resolution mapping of m6A and m6Am throughout the transcriptome. PMID: 26121403

Meehan et al., 1992: Transcriptional repression by methylation of CpG. PMID: 1297654

Meyer et al., 2012: Comprehensive analysis of mRNA methylation reveals enrichment in 3' UTRs and near stop codons. PMID: 22608085

Sergeeva et al., 2020: Modification of Adenosine196 by Mettl3 Methyltransferase in the 5'-External Transcribed Spacer of 47S Pre-rRNA Affects rRNA Maturation. PMID: 32344536

Zhou et al., 2020: Principles of RNA methylation and their implications for biology and medicine. PMID: 32920520

Synaptic Systems（SySy）品牌成立于德國(guó)，專注于研發(fā)和生產(chǎn)針對(duì)突觸和神經(jīng)科學(xué)相關(guān)抗體，以及用于細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)和高分辨率顯微鏡的各種抗體，除此之外，還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產(chǎn)品組合，全方面滿足客戶的各種需求。抗體產(chǎn)品線主要有：突觸活性區(qū)域相關(guān)抗體、突觸后蛋白相關(guān)抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關(guān)抗體、Alzheimer's相關(guān)抗體、細(xì)胞骨架、離子通道相關(guān)抗體等。該品牌產(chǎn)品專業(yè)且質(zhì)量好，在國(guó)內(nèi)外備受好評(píng)。作為SySy在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的SySy產(chǎn)品。