SBI：細(xì)胞系及外泌體

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時(shí)間：2025-05-29

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外泌體是大多數(shù)細(xì)胞類型在體內(nèi)和體外分泌的直徑為 60 - 180 nm 的膜性囊泡，包含的 RNA 和蛋白質(zhì)亞群因分泌細(xì)胞類型而異，因此在生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)和功能表征方面具有重要作用。外泌體作為納米級(jí)載體，可將信號(hào) RNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)至其他細(xì)胞。研究外泌體內(nèi)容物因而被稱為獲取生物標(biāo)志物的 “液體活檢”，有助于了解其在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用。

外泌體與癌癥

腫瘤分泌的外泌體含有完整且具有功能的 mRNA、小 RNA 和蛋白質(zhì)，可改變細(xì)胞環(huán)境以促進(jìn)腫瘤生長。腫瘤轉(zhuǎn)移涉及操縱腫瘤微環(huán)境，以在局部和遠(yuǎn)處部位優(yōu)化生存和生長條件。通過外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊，為腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)程植入準(zhǔn)備好潛在位置，從而在實(shí)際轉(zhuǎn)移發(fā)生前完成預(yù)處理。SBI 已從多種體外培養(yǎng)的人類癌癥模型細(xì)胞系中純化外泌體，以加速對(duì)其信號(hào)內(nèi)容物的研究以及這些腫瘤外泌體的功能研究。

研究亮點(diǎn)：

* 高度純化的外泌體標(biāo)準(zhǔn)品

* 用于蛋白質(zhì)和 RNA 貨物研究

* 來自多種模型細(xì)胞系的人類癌癥外泌體

* 來自骨髓和前脂肪細(xì)胞的人類間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體

* 用于構(gòu)建遞送載體的小鼠樹突狀細(xì)胞外泌體

干細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞外泌體：

間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是再生醫(yī)學(xué)的首選干細(xì)胞類型，其外泌體已被證明可促進(jìn)組織損傷修復(fù)并減少炎癥反應(yīng)。人們對(duì)探索 MSC 外泌體貨物以及改造它們以用于潛在治療應(yīng)用非常感興趣。SBI 提供從人類骨髓和前脂肪細(xì)胞的 MSCs 中提取的高度純化的外泌體，以推動(dòng)相關(guān)研究發(fā)展。對(duì)于動(dòng)物模型研究，還提供小鼠骨髓來源的未成熟樹突狀細(xì)胞系外泌體。這些外泌體在轉(zhuǎn)染外源 RNA 后可被改造為體內(nèi)遞送載體，甚至可用于將一些藥物遞送至靶細(xì)胞。

·在外泌體缺失的FBS中生長的細(xì)胞系（Exo-FBS）

·使用ExoQuick-TC純化外泌體

·具有NanoSight的尺寸和完整性

·CD63 Western blot分析驗(yàn)證

·外泌體提供：>1x10^6外泌體（50 ug蛋白）

細(xì)胞系及外泌體信息：

貨號(hào)	描述	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
EXOP-100A-1	MCF-7 Human breast cancer, noninvasive cell line: >1x10^6 frozen exosomes	MCF-7人乳腺癌，無創(chuàng)細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-105A-1	MDA-MB-231 Human breast cancer, aggressive/invasive/metastatic cell line: >1x10^6 frozen	MDA-MB-231人乳腺癌，侵襲性/侵襲性/轉(zhuǎn)移性細(xì)胞系：>1x10^6冷凍	50ug
EXOP-110A-1	HEK293 Human embryonic kidney cell line: >1x10^6 frozen exosomes	HEK293人胚胎腎細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-115A-1	PC-3 Human prostate cancer cells derived from metastatic cancer cell line: >1x10^6 frozen exosomes	從轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞系提取的PC-3人前列腺癌細(xì)胞：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-120A-1	A549 Human non-small cell lung cancer cell line: >1x10^6 frozen exosomes	A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-125A-1	H841 Human small cell lung cancer cell line: >1x10^6 frozen exosomes	H841人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-130A-1	H196 Human small cell lung cancer cell line: >1x10^6 frozen exosomes	H196人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-135A-1	DMS114 Human small cell lung cancer cell line: >1x10^6 frozen exosomes	DMS114人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-140A-1	PCS-500-011 Human pre-adipose derived mesenchymal stem cell: >1x10^6 frozen exosomes	人前脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞：1x10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-145A-1	PCS-500-012 Human bone marrow-derived mesenchymal stem cell line: >1x10^6 frozen exosomes	PCS-500-012人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-200A-1	JAWSII Mouse bone marrow immature dendritic cell line: >1x10^6 frozen exosomes	小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞系：bbb10 × 10^6冷凍外泌體	50ug
EXOP-300A-1	Human pooled serum: >1x10^6 frozen exosomes	人混合血清：100 × 10^6個(gè)冷凍外泌體	50ug

純化外泌體的 CD63 驗(yàn)證

通過西方印跡法對(duì)純化外泌體進(jìn)行 CD63 驗(yàn)證。

從細(xì)胞系和人類血清中提取的純化外泌體樣本用 RIPA 緩沖液裂解，制備外泌體蛋白裂解液。每份樣本取約 20 μg 蛋白質(zhì)，通過梯度 SDS-PAGE 分離后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。使用 SBI 的抗 CD63 抗體（貨號(hào) EXOAB-CD63A-1）以 1:1000 的稀釋比例檢測(cè) CD63 表達(dá)。利用辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗以 1:10000 的比例檢測(cè)，并成像分析。所有純化的外泌體樣本均呈 CD63 陽性，表現(xiàn)出與已發(fā)表的外泌體 CD63 圖譜相符的可變條帶模式。

純化外泌體的完整性

取約 5 uL 純化外泌體樣本，加入 995 μL 經(jīng) 0.2 μm 過濾的 1×PBS（1:200 稀釋）。將稀釋后的樣本置于設(shè)置為 33°C 的 VWR 500 型超聲波水浴中孵育 10 分鐘，以確保充分分散外泌體顆粒。然后將樣本稀釋 1:10 并以 2.5k 的速度渦旋 10 秒。最終 1:2000 稀釋的樣本用于每份樣本分析，以收集 1000 - 3000 條顆粒軌跡。將樣本注入 NanoSight LM10HSB，設(shè)置注射泵參數(shù)，將相機(jī)靈敏度設(shè)為自動(dòng) 16（最靈敏的自動(dòng)設(shè)置）。所有數(shù)據(jù)均重復(fù)三次采集。純化的外泌體顯示出預(yù)期的粒徑分布特征，峰值直徑在 90 - 110 nm 之間，濃度約為 1×10?? 個(gè)外泌體 / mL，符合培養(yǎng)基外泌體的預(yù)期范圍。