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品牌專題
中性蛋白酶(Dispase)是一種無(wú)哺乳動(dòng)物源(AOF)的金屬中性蛋白酶,采用沃辛頓公司研發(fā)的方法進(jìn)行純化。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適合用于原代細(xì)胞和傳代(繼代培養(yǎng))細(xì)胞培養(yǎng)的制備,因?yàn)樗鼘?duì)細(xì)胞膜較為溫和。這種蛋白酶還可作為細(xì)胞分離和組織解離應(yīng)用中的輔助酶,通常與膠原酶一起使用。
產(chǎn)品核心特性:
·來(lái)源:細(xì)菌 Bacillus polymyxa,切割纖維連接蛋白(Fibronectin)和 IV 型膠原,溫和解離細(xì)胞間連接。
·適用場(chǎng)景:所有規(guī)格通用,包括心臟組織消化、神經(jīng)細(xì)胞分離、腫瘤微環(huán)境分析和內(nèi)皮/上皮細(xì)胞分離。
·優(yōu)勢(shì): 活性不受血清抑制,對(duì)細(xì)胞損傷小,適合活細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(如 scRNA-seq、流式細(xì)胞術(shù));不含動(dòng)物源性成分,符合臨床前研究標(biāo)準(zhǔn)。
心臟組織消化 與膠原酶 IV 和 DNase I 聯(lián)用,用于心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞分離 | 神經(jīng)細(xì)胞分離 背根神經(jīng)節(jié)(DRG)、中樞神經(jīng)元或小膠質(zhì)細(xì)胞解離 | 腫瘤微環(huán)境分析 實(shí)體瘤組織消化(與膠原酶/DNase I 聯(lián)用) |
三款貨號(hào)的差異(僅包裝規(guī)格不同)
| 貨號(hào) | 包裝量 | 儲(chǔ)存形式 | 適用實(shí)驗(yàn)規(guī)模 |
| LS02100 | 1 克 | 凍干粉 | 小規(guī)模實(shí)驗(yàn)(單次或少量樣本) |
| LS02104 | 5 克 | 凍干粉 | 中規(guī)模研究(多次實(shí)驗(yàn)或高通量篩選) |
| LS02106 | 25 克 | 凍干粉 | 大規(guī)模生產(chǎn)或長(zhǎng)期需求(工業(yè)級(jí)) |
典型應(yīng)用方法(所有規(guī)格通用)
1. 心臟組織解離:
·濃度:1.2 U/mL(或 100 μg/mL)
·緩沖液:含 Ca??/Mg??的 DPBS
·聯(lián)用酶:膠原酶 IV(LS004186) + DNase I(LS002007)
·條件:37°C 消化 40-45 分鐘。
2. 神經(jīng)組織解離:
·濃度:0.7 U/mL(或 50-100 μg/mL)
·聯(lián)用酶:膠原酶 + DNase I(DRG) 或 木瓜蛋白酶(腦/脊髓組織)
·條件:37°C 或低溫 25°C(神經(jīng)元保護(hù))。
3. 腫瘤組織解離:
·濃度:0.5-2.0 mg/mL(依組織硬度調(diào)整)
·聯(lián)用酶:膠原酶(LS004154) + DNase I
·條件:37°C 消化 30-60 分鐘。
根據(jù)組織類型調(diào)整濃度:
·高硬度組織(如實(shí)體瘤、成體心臟):1-2 mg/mL。
·脆弱組織(如胚胎組織、神經(jīng)元):0.5-1 mg/mL。
其它產(chǎn)品信息:
| 特性 | 詳情 |
| 分子量 | 36 千道爾頓(kDa) |
| 最適 pH | 在較寬 pH 范圍(4.0-9.0)內(nèi)穩(wěn)定,最適 pH 為 5.9-7.0 |
| 穩(wěn)定性 / 儲(chǔ)存條件 | 2-8°C 下可穩(wěn)定保存 12 個(gè)月;用水或常用平衡鹽溶液 / 培養(yǎng)基復(fù)溶后需分裝并凍存于 - 20°C |
| 特異性 | 非特異性切割含有亮氨酸(Leu)和苯丙氨酸(Phe)的肽鍵 |
| 激活劑 | 二價(jià)陽(yáng)離子(如 Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+) |
| 抑制劑 | EDTA(1mM)、EGTA、1-10 - 鄰菲羅啉及重金屬離子 |
| 應(yīng)用 | 常用于分離表皮與真皮(保留完整上皮層)、干細(xì)胞、肝細(xì)胞及其他細(xì)胞的分離; 由于涉及變量多樣性,具體分離條件需針對(duì)每種細(xì)胞 / 組織通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定 |
參考文獻(xiàn):
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