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Worthington:Neutral Protease (Dispase)

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2025-05-29     
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Dispase.png 

 

中性蛋白酶(Dispase)是一種無(wú)哺乳動(dòng)物源(AOF)的金屬中性蛋白酶,采用沃辛頓公司研發(fā)的方法進(jìn)行純化。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適合用于原代細(xì)胞和傳代(繼代培養(yǎng))細(xì)胞培養(yǎng)的制備,因?yàn)樗鼘?duì)細(xì)胞膜較為溫和。這種蛋白酶還可作為細(xì)胞分離和組織解離應(yīng)用中的輔助酶,通常與膠原酶一起使用。


產(chǎn)品核心特性

·來(lái)源:細(xì)菌 Bacillus polymyxa,切割纖維連接蛋白(Fibronectin)和 IV 型膠原,溫和解離細(xì)胞間連接。

·適用場(chǎng)景:所有規(guī)格通用,包括心臟組織消化、神經(jīng)細(xì)胞分離、腫瘤微環(huán)境分析和內(nèi)皮/上皮細(xì)胞分離。

·優(yōu)勢(shì): 活性不受血清抑制,對(duì)細(xì)胞損傷小,適合活細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(如 scRNA-seq、流式細(xì)胞術(shù));不含動(dòng)物源性成分,符合臨床前研究標(biāo)準(zhǔn)。

心臟組織消化

與膠原酶 IV 和 DNase I 聯(lián)用,用于心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞分離

神經(jīng)細(xì)胞分離

背根神經(jīng)節(jié)(DRG)、中樞神經(jīng)元或小膠質(zhì)細(xì)胞解離

腫瘤微環(huán)境分析

實(shí)體瘤組織消化(與膠原酶/DNase I 聯(lián)用)


三款貨號(hào)的差異(僅包裝規(guī)格不同) 

貨號(hào)包裝量儲(chǔ)存形式適用實(shí)驗(yàn)規(guī)模
LS021001 克凍干粉小規(guī)模實(shí)驗(yàn)(單次或少量樣本)
LS021045 克凍干粉中規(guī)模研究(多次實(shí)驗(yàn)或高通量篩選)
LS0210625 克凍干粉大規(guī)模生產(chǎn)或長(zhǎng)期需求(工業(yè)級(jí))

 

典型應(yīng)用方法(所有規(guī)格通用)

1. 心臟組織解離:

·濃度:1.2 U/mL(或 100 μg/mL)

·緩沖液:含 Ca??/Mg??的 DPBS

·聯(lián)用酶:膠原酶 IV(LS004186) + DNase I(LS002007)

·條件:37°C 消化 40-45 分鐘。

2. 神經(jīng)組織解離:

·濃度:0.7 U/mL(或 50-100 μg/mL)

·聯(lián)用酶:膠原酶 + DNase I(DRG) 或 木瓜蛋白酶(腦/脊髓組織)

·條件:37°C 或低溫 25°C(神經(jīng)元保護(hù))。

3. 腫瘤組織解離:

·濃度:0.5-2.0 mg/mL(依組織硬度調(diào)整)

·聯(lián)用酶:膠原酶(LS004154) + DNase I

·條件:37°C 消化 30-60 分鐘。

 

根據(jù)組織類型調(diào)整濃度:

·高硬度組織(如實(shí)體瘤、成體心臟):1-2 mg/mL。

·脆弱組織(如胚胎組織、神經(jīng)元):0.5-1 mg/mL。

 

其它產(chǎn)品信息:

特性詳情
分子量36 千道爾頓(kDa)
最適 pH在較寬 pH 范圍(4.0-9.0)內(nèi)穩(wěn)定,最適 pH 為 5.9-7.0
穩(wěn)定性 / 儲(chǔ)存條件2-8°C 下可穩(wěn)定保存 12 個(gè)月;用水或常用平衡鹽溶液 / 培養(yǎng)基復(fù)溶后需分裝并凍存于 - 20°C
特異性非特異性切割含有亮氨酸(Leu)和苯丙氨酸(Phe)的肽鍵
激活劑二價(jià)陽(yáng)離子(如 Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+
抑制劑EDTA(1mM)、EGTA、1-10 - 鄰菲羅啉及重金屬離子
應(yīng)用常用于分離表皮與真皮(保留完整上皮層)、干細(xì)胞、肝細(xì)胞及其他細(xì)胞的分離; 由于涉及變量多樣性,具體分離條件需針對(duì)每種細(xì)胞 / 組織通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定


參考文獻(xiàn):

1. PDFM. Corrales, Benjamin T. Cocanougher et al. “A single-cell transcriptomic atlas of complete insect nervous systems across multiple life stages.” Neural Development[2022-08-24]

2. U. Laemmli. “Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4.” Nature[1970-08-15]

3. PDFO. H. Lowry, N. J. Rosebrough et al. “Protein measurement with the Folin phenol reagent..” The Journal of biological chemistry[1951-11-01]

4. PDFBenjamin T. Cocanougher, J. Wittenbach et al. “Comparative single-cell transcriptomics of complete insect nervous systems.” bioRxiv[2019-09-30]

5. PDFSelina M Garcia, J. Naik et al. “Acid-sensing ion channel 1a activates IKCa/SKCa channels and contributes to endothelium-dependent dilation.” The Journal of General Physiology[2022-12-09]

6. PDFEdgar Creus-Bachiller, J. Fernández-Rodríguez et al. “Expanding a precision medicine platform for malignant peripheral nerve sheath tumors: New patient‐derived orthotopic xenografts, cell lines and tumor entities.” Molecular Oncology[2023-10-05]

7. PDFSiyeon Rhee, D. Paik et al. “Endocardial/endothelial angiocrines regulate cardiomyocyte development and maturation and induce features of ventricular non-compaction.” bioRxiv[2020-07-26]

8. PDFA. Pippow. “Differences of Ca2+ Handling Properties and Differential Processing of Olfactory Information in Identified Central Olfactory Neurons.”[2008-05-16]

9. PDFTianying Su, Geoffrey M. Stanley et al. “Single cell analysis of early progenitor cells that build coronary arteries.” Nature[2018-05-30]



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