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我們提供最全面的組蛋白修飾研究產(chǎn)品,涵蓋實(shí)驗(yàn)流程的每一步,從上游到下游。
組蛋白是真核生物染色質(zhì)的主要蛋白質(zhì)成分,參與基因調(diào)控。H3和H4組蛋白的尾部從核小體中伸出,可以發(fā)生翻譯后修飾,從而改變組蛋白與DNA和核蛋白的相互作用,導(dǎo)致表觀遺傳變化,調(diào)節(jié)許多正常和疾病相關(guān)的過(guò)程。EpiGentek提供了一系列完整的試劑盒,可用于定量H3組蛋白的甲基化、乙酰化和磷酸化修飾(參見(jiàn)我們提供的組蛋白修飾表格)。

源文件下載:https://www.epigentek.com/docs/histonetable.pdf
組蛋白甲基化
組蛋白甲基化是一種表觀遺傳修飾,通過(guò)組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)將甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移到組蛋白尾部(尤其是N端尾部)。組蛋白去甲基化則由組蛋白去甲基化酶(HDMs)催化,去除甲基基團(tuán)。這兩種修飾通過(guò)改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)調(diào)控基因表達(dá)。
組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)構(gòu)成染色質(zhì)的基本單位——核小體。組蛋白甲基化或去甲基化可導(dǎo)致染色質(zhì)緊縮(異染色質(zhì),轉(zhuǎn)錄不活躍)或松散(常染色質(zhì),轉(zhuǎn)錄活躍),從而調(diào)控基因表達(dá)。
甲基基團(tuán)在組蛋白上的位置和數(shù)量決定染色質(zhì)是否可用于轉(zhuǎn)錄。例如:
H4K20me1(組蛋白H4賴氨酸20單甲基化)導(dǎo)致染色質(zhì)緊縮,抑制轉(zhuǎn)錄;
H3R17me1(組蛋白H3精氨酸17單甲基化)則激活轉(zhuǎn)錄。
賴氨酸甲基化既可激活(如H3K4、K36、K79)也可抑制(如H3K9、K27、H4K20)基因表達(dá)。
研究組蛋白甲基化和去甲基化有助于理解“組蛋白密碼”及其對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。異常組蛋白修飾與癌癥、自身免疫性疾病、炎癥和神經(jīng)性疾病等多種疾病相關(guān)。檢測(cè)組蛋白修飾不僅揭示疾病表觀遺傳機(jī)制,還為開發(fā)靶向組蛋白修飾的藥物提供了重要依據(jù)。
組蛋白乙酰化
組蛋白乙酰化是一種表觀遺傳修飾,通過(guò)在組蛋白N端尾部的賴氨酸殘基上添加乙酰基團(tuán)實(shí)現(xiàn)。這一過(guò)程由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)催化,HATs根據(jù)細(xì)胞內(nèi)位置和組蛋白特異性分為細(xì)胞質(zhì)和核兩種類型。相反,組蛋白去乙酰化酶(HDACs)負(fù)責(zé)去除乙酰基團(tuán),稱為組蛋白去乙酰化。
組蛋白乙酰化和去乙酰化通過(guò)調(diào)控染色質(zhì)結(jié)構(gòu)影響基因表達(dá)。乙酰化使染色質(zhì)松散(常染色質(zhì)),促進(jìn)轉(zhuǎn)錄活性;去乙酰化則使染色質(zhì)緊縮(異染色質(zhì)),抑制轉(zhuǎn)錄活性。
HDACs分為四大類:
I類:HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC8;
II類:HDAC4、HDAC5、HDAC6、HDAC7、HDAC9、HDAC10;
III類:SIRT1至SIRT7(依賴NAD?);
IV類:HDAC11。
分類依據(jù)是與酵母蛋白的同源性。
研究組蛋白乙酰化和去乙酰化有助于揭示“組蛋白密碼”的機(jī)制,并為開發(fā)HDAC靶向藥物提供基礎(chǔ)。HDAC抑制劑(HDACi)已用于情緒穩(wěn)定、抗癲癇、癌癥治療(特異性靶向腫瘤細(xì)胞)以及神經(jīng)退行性和炎癥性疾病的治療。
組蛋白磷酸化
組蛋白磷酸化是一種翻譯后修飾,影響絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸殘基。它涉及向組蛋白尾部添加磷酸基團(tuán),可在染色質(zhì)重塑中發(fā)揮作用。所有四種核小體組蛋白尾部都可能被磷酸化。組蛋白磷酸化的一個(gè)最著名功能是細(xì)胞對(duì)DNA損傷的響應(yīng)。盡管已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多磷酸化位點(diǎn),但新的位點(diǎn)仍在持續(xù)的表觀遺傳研究中被發(fā)現(xiàn)。
組蛋白研究步驟詳細(xì)信息
1. 組蛋白提取
EpiQuik總組蛋白提取試劑盒可讓研究人員可靠且便捷地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離組蛋白,僅需一小時(shí)。這些試劑盒推薦用于準(zhǔn)備組蛋白提取物,用于EpiGentek的組蛋白修飾分析試劑盒或多種下游應(yīng)用,包括組蛋白乙酰化、甲基化、磷酸化和SUMO化。
編號(hào) | 名稱 | 描述 |
OP-0006 | EpiQuik總組蛋白提取試劑盒 | 用于分離具有翻譯后修飾(PTMs)的組蛋白 |
OP-0007 | EpiQuik總組蛋白提取HT試劑盒 | 用于從培養(yǎng)于96孔板的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離組蛋白 |
2. 核蛋白提取
EpiQuik核提取試劑盒可讓研究人員可靠且便捷地從細(xì)胞或組織中分離核蛋白,僅需一小時(shí)。提取物可用于EpiGentek的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)、組蛋白去甲基化酶、組蛋白去乙酰化酶(HDAC)和組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)試劑盒,或用于多種應(yīng)用,包括Western blot、蛋白-DNA結(jié)合分析、核酶分析以及任何需要優(yōu)化核蛋白的程序。
編號(hào) | 名稱 | 描述 |
OP-0002 | EpiQuik核提取試劑盒 | 用于從細(xì)胞或組織中分離和提取核蛋白,保持酶活性 |
OP-0022 | EpiQuik核提取試劑盒II(無(wú)核酸) | 用于從細(xì)胞或組織中分離無(wú)核酸的核蛋白,保持酶活性 |
3. 組蛋白H3和H4多重分析
通過(guò)EpiQuik組蛋白H3和H4修飾多重分析試劑盒,您可以全面了解樣本的組蛋白修飾狀態(tài)。這種類似ELISA的方法僅需標(biāo)準(zhǔn)微孔板讀取器。通過(guò)同時(shí)測(cè)量21種不同的組蛋白H3修飾、10種不同的組蛋白H4修飾或22種不同的循環(huán)組蛋白H3修飾,節(jié)省時(shí)間和成本。這些試劑盒包含了所有最重要且經(jīng)過(guò)良好表征的模式。
編號(hào) | 名稱 | 描述 |
P-3100 | EpiQuik組蛋白H3修飾多重分析試劑盒 | 組蛋白提取物,21種不同的組蛋白H3修飾 |
P-3102 | EpiQuik組蛋白H4修飾多重分析試劑盒 | 組蛋白提取物,10種不同的組蛋白H4修飾 |
P-3106 | EpiQuik循環(huán)修飾組蛋白H3多重分析試劑盒 | 血清/血漿樣本,定量22種不同的循環(huán)組蛋白H3修飾 |
4. 組蛋白定量
定量組蛋白甲基化或乙酰化對(duì)于研究基因表達(dá)模式特別有用。EpiGentek提供了一系列完整的類似ELISA的試劑盒,用于定量H3或H4在特定賴氨酸上的甲基化或乙酰化,包括比色和熒光版本。
組蛋白H3和H4甲基化定量試劑盒包括: (*熒光版本)
| 組蛋白 | 貨號(hào) | 組蛋白 | 貨號(hào) | 組蛋白 | 貨號(hào) | 組蛋白 | 貨號(hào) |
| H3K4me1 | P-3024 | H3K9me3 | P-3034 | H3K36me1 | P-3046 | H3K79me3 | P-3058 |
| H3K4me1* | P-3025 | H3K9me3* | P-3035 | H3K36me1* | P-3047 | H3K79me3* | P-3059 |
| H3K4me2 | P-3022 | H3K9Pan | P-3036 | H3K36me2 | P-3048 | H3K79Pan | P-3060 |
| H3K4me2* | P-3023 | H3K9Pan* | P-3037 | H3K36me2* | P-3049 | H3K79Pan* | P-3061 |
| H3K4me3 | P-3026 | H3K27me1 | P-3038 | H3K36me3 | P-3050 | H4K20me1 | P-3064 |
| H3K4me3* | P-3027 | H3K27me1* | P-3039 | H3K36me3* | P-3051 | H4K20me1* | P-3065 |
| H3K4Pan | P-3028 | H3K27me2 | P-3040 | H3K36Pan | P-3052 | H4K20me2 | P-3066 |
| H3K4Pan* | P-3029 | H3K27me2* | P-3041 | H3K36Pan* | P-3053 | H4K20me2* | P-3067 |
| H3K9me1 | P-3030 | H3K27me3 | P-3042 | H3K79me1 | P-3054 | H4K20me3 | P-3068 |
| H3K9me1* | P-3031 | H3K27me3* | P-3043 | H3K79me1* | P-3055 | H4K20me3* | P-3069 |
| H3K9me2 | P-3032 | H3K27Pan | P-3044 | H3K79me2 | P-3056 | H4K20Pan | P-3070 |
| H3K9me2* | P-3033 | H3K27Pan* | P-3045 | H3K79me2* | P-3057 | H4K20Pan* | P-3071 |
組蛋白H3和H4乙酰化定量試劑盒包括: (*熒光版本)
| 組蛋白 | 貨號(hào) | 組蛋白 | 貨號(hào) | 組蛋白 | 貨號(hào) | 組蛋白 | 貨號(hào) |
| H3K9ac | P-4010 | H3K18ac* | P-4015 | H3K56ac* | P-4021 | H4K12ac | P-4028 |
| H3K9ac* | P-4011 | H3K27ac | P-4059 | H4K5ac | P-4022 | H4K12ac* | P-4029 |
| H3K14ac | P-4012 | H3K36ac | P-4018 | H4K5ac* | P-4023 | H4K16ac | P-4026 |
| H3K14ac* | P-4013 | H3K36ac* | P-4019 | H4K8ac | P-4024 | H4K16ac* | P-4027 |
| H3K18ac | P-4014 | H3K56ac | P-4020 | H4K8ac* | P-4025 |
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5. 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙酰化酶(HDAC)
蛋白質(zhì)乙酰化和去乙酰化之間的平衡控制著多種生理和病理細(xì)胞過(guò)程。研究維持這種平衡的酶——組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)和組蛋白去乙酰化酶(HDACs)。我們有試劑盒可以快速測(cè)量HAT活性或定量整個(gè)HDAC家族(1-11)的成員。
| 編號(hào) | 名稱 | 描述 |
| P-4003 | EpiQuik HAT活性/抑制分析試劑盒 | 安全且快速地測(cè)量組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶活性/抑制 |
| P-4034 P-4035* | Epigenase HDAC活性/抑制直接分析試劑盒 (*熒光版本) | 測(cè)量核提取物或純化的HDAC同工型(HDACs 1-11)中HDAC酶的總活性/抑制 |
| 查看編號(hào) | EpiQuik HDAC1 -7分析試劑盒 | 通過(guò)類似ELISA的方法定量測(cè)量HDAC 1-11蛋白的總量 |
6. 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)和去甲基化酶
賴氨酸甲基化標(biāo)記組蛋白尾部和球狀域的多個(gè)位置,其水平由甲基轉(zhuǎn)移酶(“書寫者”)和去甲基化酶(“擦除者”)特異性平衡。使用我們便捷的類似ELISA的分析方法,直接測(cè)量HMT或組蛋白去甲基化酶的活性水平,研究組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)或去甲基化酶的功能。
組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)分析包括:
| 編號(hào) | 名稱 | 描述 |
| P-3002 | EpiQuik組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制分析試劑盒(H3K4) | 測(cè)量特異性靶向組蛋白H3賴氨酸4的HMT活性 |
| P-3003 | EpiQuik組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制分析試劑盒(H3K9) | 測(cè)量特異性靶向組蛋白H3賴氨酸9的HMT活性 |
| P-3005 | EpiQuik組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制分析試劑盒(H3K27) | 測(cè)量特異性靶向組蛋白H3賴氨酸27的HMT活性 |
| P-3088 | Epigenase PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶(II型特異性)活性/抑制分析試劑盒 | 使用核提取物或純化酶測(cè)量總II型PRMT活性 |
組蛋白去甲基化酶分析包括: (*熒光版本)
| 編號(hào) | 名稱 | 描述 |
| P-3078 P-3079* | Epigenase LSD1去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒 | 通過(guò)直接檢測(cè)LSD1轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量LSD1活性 |
| P-3080 P-3081* | Epigenase JMJD2去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒 | 通過(guò)直接檢測(cè)JMJD2轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量JMJD2活性 |
| P-3082 P-3083* | Epigenase JARID去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒 | 通過(guò)直接檢測(cè)JARID轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量JARID活性 |
| P-3084 P-3085* | Epigenase JMJD3/UTX去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒 | 通過(guò)直接檢測(cè)JMJD3/UTX轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量JMJD3或UTX活性 |
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