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EpigenTek:組蛋白修飾全流程

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2025-02-05     
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EpigenTek.png

 

我們提供最全面的組蛋白修飾研究產(chǎn)品,涵蓋實(shí)驗(yàn)流程的每一步,從上游到下游。

 

組蛋白是真核生物染色質(zhì)的主要蛋白質(zhì)成分,參與基因調(diào)控。H3和H4組蛋白的尾部從核小體中伸出,可以發(fā)生翻譯后修飾,從而改變組蛋白與DNA和核蛋白的相互作用,導(dǎo)致表觀遺傳變化,調(diào)節(jié)許多正常和疾病相關(guān)的過(guò)程。EpiGentek提供了一系列完整的試劑盒,可用于定量H3組蛋白的甲基化、乙酰化和磷酸化修飾(參見(jiàn)我們提供的組蛋白修飾表格)。

EpigenTek-1.png

源文件下載:https://www.epigentek.com/docs/histonetable.pdf

 

組蛋白甲基化

組蛋白甲基化是一種表觀遺傳修飾,通過(guò)組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)將甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移到組蛋白尾部(尤其是N端尾部)。組蛋白去甲基化則由組蛋白去甲基化酶(HDMs)催化,去除甲基基團(tuán)。這兩種修飾通過(guò)改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)調(diào)控基因表達(dá)。

組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)構(gòu)成染色質(zhì)的基本單位——核小體。組蛋白甲基化或去甲基化可導(dǎo)致染色質(zhì)緊縮(異染色質(zhì),轉(zhuǎn)錄不活躍)或松散(常染色質(zhì),轉(zhuǎn)錄活躍),從而調(diào)控基因表達(dá)。

甲基基團(tuán)在組蛋白上的位置和數(shù)量決定染色質(zhì)是否可用于轉(zhuǎn)錄。例如:

H4K20me1(組蛋白H4賴氨酸20單甲基化)導(dǎo)致染色質(zhì)緊縮,抑制轉(zhuǎn)錄;

H3R17me1(組蛋白H3精氨酸17單甲基化)則激活轉(zhuǎn)錄。

賴氨酸甲基化既可激活(如H3K4、K36、K79)也可抑制(如H3K9、K27、H4K20)基因表達(dá)。

 

研究組蛋白甲基化和去甲基化有助于理解“組蛋白密碼”及其對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。異常組蛋白修飾與癌癥、自身免疫性疾病、炎癥和神經(jīng)性疾病等多種疾病相關(guān)。檢測(cè)組蛋白修飾不僅揭示疾病表觀遺傳機(jī)制,還為開發(fā)靶向組蛋白修飾的藥物提供了重要依據(jù)。

 

組蛋白乙酰化

組蛋白乙酰化是一種表觀遺傳修飾,通過(guò)在組蛋白N端尾部的賴氨酸殘基上添加乙酰基團(tuán)實(shí)現(xiàn)。這一過(guò)程由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)催化,HATs根據(jù)細(xì)胞內(nèi)位置和組蛋白特異性分為細(xì)胞質(zhì)和核兩種類型。相反,組蛋白去乙酰化酶(HDACs)負(fù)責(zé)去除乙酰基團(tuán),稱為組蛋白去乙酰化。
組蛋白乙酰化和去乙酰化通過(guò)調(diào)控染色質(zhì)結(jié)構(gòu)影響基因表達(dá)。乙酰化使染色質(zhì)松散(常染色質(zhì)),促進(jìn)轉(zhuǎn)錄活性;去乙酰化則使染色質(zhì)緊縮(異染色質(zhì)),抑制轉(zhuǎn)錄活性。


HDACs分為四大類:

I類:HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC8;

II類:HDAC4、HDAC5、HDAC6、HDAC7、HDAC9、HDAC10;

III類:SIRT1至SIRT7(依賴NAD?);

IV類:HDAC11。

分類依據(jù)是與酵母蛋白的同源性。


研究組蛋白乙酰化和去乙酰化有助于揭示“組蛋白密碼”的機(jī)制,并為開發(fā)HDAC靶向藥物提供基礎(chǔ)。HDAC抑制劑(HDACi)已用于情緒穩(wěn)定、抗癲癇、癌癥治療(特異性靶向腫瘤細(xì)胞)以及神經(jīng)退行性和炎癥性疾病的治療。

 

組蛋白磷酸化

組蛋白磷酸化是一種翻譯后修飾,影響絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸殘基。它涉及向組蛋白尾部添加磷酸基團(tuán),可在染色質(zhì)重塑中發(fā)揮作用。所有四種核小體組蛋白尾部都可能被磷酸化。組蛋白磷酸化的一個(gè)最著名功能是細(xì)胞對(duì)DNA損傷的響應(yīng)。盡管已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多磷酸化位點(diǎn),但新的位點(diǎn)仍在持續(xù)的表觀遺傳研究中被發(fā)現(xiàn)。

 

組蛋白研究步驟詳細(xì)信息

 

1. 組蛋白提取

EpiQuik總組蛋白提取試劑盒可讓研究人員可靠且便捷地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離組蛋白,僅需一小時(shí)。這些試劑盒推薦用于準(zhǔn)備組蛋白提取物,用于EpiGentek的組蛋白修飾分析試劑盒或多種下游應(yīng)用,包括組蛋白乙酰化、甲基化、磷酸化和SUMO化。

編號(hào)

名稱

描述

OP-0006

EpiQuik總組蛋白提取試劑盒

用于分離具有翻譯后修飾(PTMs)的組蛋白

OP-0007

EpiQuik總組蛋白提取HT試劑盒

用于從培養(yǎng)于96孔板的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離組蛋白

 

2. 蛋白提取

EpiQuik核提取試劑盒可讓研究人員可靠且便捷地從細(xì)胞或組織中分離核蛋白,僅需一小時(shí)。提取物可用于EpiGentek的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)、組蛋白去甲基化酶、組蛋白去乙酰化酶(HDAC)和組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)試劑盒,或用于多種應(yīng)用,包括Western blot、蛋白-DNA結(jié)合分析、核酶分析以及任何需要優(yōu)化核蛋白的程序。

編號(hào)

名稱

描述

OP-0002

EpiQuik核提取試劑盒

用于從細(xì)胞或組織中分離和提取核蛋白,保持酶活性

OP-0022

EpiQuik核提取試劑盒II(無(wú)核酸)

用于從細(xì)胞或組織中分離無(wú)核酸的核蛋白,保持酶活性

 

3. 組蛋白H3和H4多重分析

通過(guò)EpiQuik組蛋白H3和H4修飾多重分析試劑盒,您可以全面了解樣本的組蛋白修飾狀態(tài)。這種類似ELISA的方法僅需標(biāo)準(zhǔn)微孔板讀取器。通過(guò)同時(shí)測(cè)量21種不同的組蛋白H3修飾、10種不同的組蛋白H4修飾或22種不同的循環(huán)組蛋白H3修飾,節(jié)省時(shí)間和成本。這些試劑盒包含了所有最重要且經(jīng)過(guò)良好表征的模式。

編號(hào)

名稱

描述

P-3100

EpiQuik組蛋白H3修飾多重分析試劑盒

組蛋白提取物,21種不同的組蛋白H3修飾

P-3102

EpiQuik組蛋白H4修飾多重分析試劑盒

組蛋白提取物,10種不同的組蛋白H4修飾

P-3106

EpiQuik循環(huán)修飾組蛋白H3多重分析試劑盒

血清/血漿樣本,定量22種不同的循環(huán)組蛋白H3修飾

 

4. 組蛋白定量

定量組蛋白甲基化或乙酰化對(duì)于研究基因表達(dá)模式特別有用。EpiGentek提供了一系列完整的類似ELISA的試劑盒,用于定量H3或H4在特定賴氨酸上的甲基化或乙酰化,包括比色和熒光版本。

 

組蛋白H3和H4甲基化定量試劑盒包括: (*熒光版本)

組蛋白貨號(hào)組蛋白貨號(hào)組蛋白貨號(hào)組蛋白貨號(hào)
H3K4me1P-3024H3K9me3P-3034H3K36me1P-3046H3K79me3P-3058
H3K4me1*P-3025H3K9me3*P-3035H3K36me1*P-3047H3K79me3*P-3059
H3K4me2P-3022H3K9PanP-3036H3K36me2P-3048H3K79PanP-3060
H3K4me2*P-3023H3K9Pan*P-3037H3K36me2*P-3049H3K79Pan*P-3061
H3K4me3P-3026H3K27me1P-3038H3K36me3P-3050H4K20me1P-3064
H3K4me3*P-3027H3K27me1*P-3039H3K36me3*P-3051H4K20me1*P-3065
H3K4PanP-3028H3K27me2P-3040H3K36PanP-3052H4K20me2P-3066
H3K4Pan*P-3029H3K27me2*P-3041H3K36Pan*P-3053H4K20me2*P-3067
H3K9me1P-3030H3K27me3P-3042H3K79me1P-3054H4K20me3P-3068
H3K9me1*P-3031H3K27me3*P-3043H3K79me1*P-3055H4K20me3*P-3069
H3K9me2P-3032H3K27PanP-3044H3K79me2P-3056H4K20PanP-3070
H3K9me2*P-3033H3K27Pan*P-3045H3K79me2*P-3057H4K20Pan*P-3071


組蛋白H3和H4乙酰化定量試劑盒包括: (*熒光版本) 

組蛋白貨號(hào)組蛋白貨號(hào)組蛋白貨號(hào)組蛋白貨號(hào)
H3K9acP-4010H3K18ac*P-4015H3K56ac*P-4021H4K12acP-4028
H3K9ac*P-4011H3K27acP-4059H4K5acP-4022H4K12ac*P-4029
H3K14acP-4012H3K36acP-4018H4K5ac*P-4023H4K16acP-4026
H3K14ac*P-4013H3K36ac*P-4019H4K8acP-4024H4K16ac*P-4027
H3K18acP-4014H3K56acP-4020H4K8ac*P-4025


更多組蛋白H3和H4甲基化或乙酰化定量試劑盒,歡迎垂詢Epigentek中國(guó)區(qū)獨(dú)家代理,艾美捷科技


5. 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙酰化酶(HDAC)

蛋白質(zhì)乙酰化和去乙酰化之間的平衡控制著多種生理和病理細(xì)胞過(guò)程。研究維持這種平衡的酶——組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)和組蛋白去乙酰化酶(HDACs)。我們有試劑盒可以快速測(cè)量HAT活性或定量整個(gè)HDAC家族(1-11)的成員。

編號(hào)名稱描述
P-4003EpiQuik HAT活性/抑制分析試劑盒安全且快速地測(cè)量組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶活性/抑制
P-4034 P-4035*Epigenase HDAC活性/抑制直接分析試劑盒 (*熒光版本)測(cè)量核提取物或純化的HDAC同工型(HDACs 1-11)中HDAC酶的總活性/抑制
查看編號(hào)EpiQuik HDAC1 -7分析試劑盒通過(guò)類似ELISA的方法定量測(cè)量HDAC 1-11蛋白的總量


6. 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)和去甲基化酶

賴氨酸甲基化標(biāo)記組蛋白尾部和球狀域的多個(gè)位置,其水平由甲基轉(zhuǎn)移酶(“書寫者”)和去甲基化酶(“擦除者”)特異性平衡。使用我們便捷的類似ELISA的分析方法,直接測(cè)量HMT或組蛋白去甲基化酶的活性水平,研究組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)或去甲基化酶的功能。

 

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMT)分析包括:

編號(hào)名稱描述
P-3002EpiQuik組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制分析試劑盒(H3K4)測(cè)量特異性靶向組蛋白H3賴氨酸4的HMT活性
P-3003EpiQuik組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制分析試劑盒(H3K9)測(cè)量特異性靶向組蛋白H3賴氨酸9的HMT活性
P-3005EpiQuik組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制分析試劑盒(H3K27)測(cè)量特異性靶向組蛋白H3賴氨酸27的HMT活性
P-3088Epigenase PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶(II型特異性)活性/抑制分析試劑盒使用核提取物或純化酶測(cè)量總II型PRMT活性


組蛋白去甲基化酶分析包括: (*熒光版本)

編號(hào)名稱描述
P-3078 P-3079*Epigenase LSD1去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒通過(guò)直接檢測(cè)LSD1轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量LSD1活性
P-3080 P-3081*Epigenase JMJD2去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒通過(guò)直接檢測(cè)JMJD2轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量JMJD2活性
P-3082 P-3083*Epigenase JARID去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒通過(guò)直接檢測(cè)JARID轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量JARID活性
P-3084 P-3085*Epigenase JMJD3/UTX去甲基化酶活性/抑制分析試劑盒通過(guò)直接檢測(cè)JMJD3/UTX轉(zhuǎn)化的去甲基化產(chǎn)物測(cè)量JMJD3或UTX活性


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