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Worthington:LS05003 重組 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2025-10-09     
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在分子生物學研究中,逆轉(zhuǎn)錄酶絕非 通用工具”—— 當研究聚焦于 HIV 病毒復制機制、RNA 修飾位點定位或線粒體 DNAmtDNA)特殊修飾時,普通逆轉(zhuǎn)錄酶往往因 無法保留特異性分子信息”“不匹配研究場景需求” 而導致實驗受阻。而 Worthington Biochem LS05003 重組 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶,憑借其在三大核心研究領(lǐng)域的文獻實證應(yīng)用,成為解決 精準逆轉(zhuǎn)錄需求” 的關(guān)鍵工具,為科研人員提供從 實驗設(shè)計” 到 結(jié)果驗證” 的全流程可靠支撐。

 

一、直擊 HIV-1 免疫調(diào)控研究痛點:精準量化逆轉(zhuǎn)錄效率,解密宿主抗病毒機制

Several cell-intrinsic effectors drive type I interferon-mediated restriction of HIV-1 in primary CD4+ T?cells

HIV-1 的復制抑制機制是艾滋病治愈研究的核心方向,而 “逆轉(zhuǎn)錄效率” 作為病毒復制的關(guān)鍵限速步驟,其定量檢測直接決定了宿主免疫調(diào)控作用的驗證準確性。此前,通用逆轉(zhuǎn)錄酶常因 “無法模擬 HIV 天然逆轉(zhuǎn)錄特性” 導致檢測偏差,而 LS05003 的出現(xiàn),徹底解決了這一難題。

HIV-1 復制的宿主免疫調(diào)控研究中,LS05003 的核心應(yīng)用場景為 “HIV-1 逆轉(zhuǎn)錄效率定量檢測”:

當科研人員探究 “I 型干擾素如何通過細胞效應(yīng)因子限制原代 CD4+ T 細胞中 HIV-1 復制” 時,需對比 “干擾素處理組” 與 “對照組” 的病毒逆轉(zhuǎn)錄活性 —— 通過提取兩組細胞的 HIV-1 病毒 RNA,用 LS05003 催化 RNA 向 cDNA 的精準轉(zhuǎn)化(其源自 HIV 的酶學特性確保逆轉(zhuǎn)錄過程貼合病毒天然狀態(tài)),再結(jié)合定量 PCR(qPCR)檢測 cDNA 含量,即可直觀分析干擾素對 HIV-1 逆轉(zhuǎn)錄的抑制效果,進而明確宿主免疫調(diào)控的分子機制。

這一應(yīng)用不僅被證實有效,更成為 HIV 免疫機制研究中 “逆轉(zhuǎn)錄效率定量” 的標準化實驗方案,避免了通用酶導致的結(jié)果偏差。

 

二、賦能 RNA 修飾檢測技術(shù)革新:保留修飾信息,解鎖全轉(zhuǎn)錄組修飾圖譜

RNA 修飾(如 m6A、a6A、m7G)是表觀遺傳學的前沿熱點,但其檢測長期受限于 “修飾位點難定位、信息易丟失” 的痛點 —— 常規(guī)逆轉(zhuǎn)錄酶在催化 RNA 轉(zhuǎn) cDNA 時,易破壞修飾位點特征,導致后續(xù)測序無法捕捉關(guān)鍵信息。而 LS05003 憑借 “高效逆轉(zhuǎn)錄 + 修飾信息保留” 的雙重特性,成為 RNA 修飾檢測技術(shù)開發(fā)的核心工具,覆蓋四大關(guān)鍵應(yīng)用場景:

1. a6A 修飾 mRNA 的代謝標記 - 測序(a6A-seq 技術(shù))

《a6A-seq: N6-allyladenosine-based cellular messenger RNA metabolic labelling and sequencing》

開發(fā) a6A-seq 技術(shù)時,需實現(xiàn) “細胞內(nèi) a6A 修飾 mRNA 的標記 - 測序閉環(huán)”。科研人員向細胞中加入 a6A 前體完成 mRNA 代謝標記后,提取標記 mRNA,用 LS05003 將其逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA—— 該酶能完整保留 a6A 修飾的分子特征,確保后續(xù)高通量測序可精準定位全轉(zhuǎn)錄組的 a6A 修飾位點,為 mRNA 代謝修飾研究提供了 “從標記到檢測” 的關(guān)鍵橋梁。

2. m6A 修飾的單核苷酸分辨率檢測(m6A-label-seq 等技術(shù))

Detection of m6A RNA modifications at single-nucleotide resolution using m6A-selective allyl chemical labeling and sequencing

m6A 修飾的單堿基定位是解析其功能的核心。在開發(fā) m6A-label-seq 或 “選擇性烯丙基標記測序” 技術(shù)時,經(jīng)特異性標記的 m6A 位點需通過 cDNA 測序驗證 ——LS05003 可高效催化標記 mRNA 轉(zhuǎn) cDNA,且不干擾 m6A 標記基團的識別,使測序結(jié)果能精準對應(yīng) mRNA 中的單個 m6A 修飾堿基,解決了 “修飾位點模糊” 的行業(yè)難題。

 

3. 哺乳動物 mRNA 內(nèi)部 m7G 修飾全轉(zhuǎn)錄組圖譜繪制

Transcriptome-wide Mapping of Internal?N7-Methylguanosine Methylome in Mammalian mRNA

繪制 m7G 修飾圖譜需覆蓋 mRNA 全長,避免遺漏內(nèi)部修飾位點。LS05003 在催化哺乳動物細胞總 mRNA 逆轉(zhuǎn)錄時,能實現(xiàn)全長 cDNA 轉(zhuǎn)化,確保 mRNA 內(nèi)部的 m7G 修飾信息完整保留,結(jié)合測序與生物信息分析,可高效篩選出 cDNA 中 m7G 修飾的序列特征,最終完成全轉(zhuǎn)錄組 m7G 修飾圖譜的繪制(文獻 8 證實),為 m7G 調(diào)控 mRNA 翻譯的研究奠定基礎(chǔ)。

 

4. RNA 修飾位點精準定位(Graft-seq 技術(shù))

Graft-seq precisely maps RNA modifications via site-specific chemical grafting strategy

Graft-seq 技術(shù)通過化學嫁接標記 RNA 修飾位點,需依賴 cDNA 測序反向推導修飾位置。LS05003 在催化 “化學嫁接后的 RNA” 逆轉(zhuǎn)錄時,不僅不受化學基團影響(保持高效活性),還能讓修飾位點的化學標記在 cDNA 中清晰可測,科研人員可通過測序定位化學標記,精準反推出 RNA 原始修飾位點,實現(xiàn) “單堿基級” 的修飾定位。

 

三、突破線粒體 DNA 修飾研究瓶頸:捕獲 mtDNA 特殊修飾,解析線粒體表觀遺傳

N6-Deoxyadenosine Methylation in Mammalian Mitochondrial DNA

線粒體 DNA(mtDNA)的 N6 - 脫氧腺苷(N6-dA)甲基化修飾是線粒體表觀遺傳學的新興方向,但 mtDNA 的特殊性(樣本難提取、修飾直接檢測難)讓研究一度停滯。LS05003 憑借 “適配特殊核酸模板” 的特性,成為 mtDNA 修飾檢測的關(guān)鍵工具。

在哺乳動物線粒體 DNA 修飾研究中,LS05003 的核心場景為 “mtDNA N6-dA 修飾檢測的 cDNA 轉(zhuǎn)化”:

科研人員從哺乳動物細胞中提取純凈的 mtDNA(或其轉(zhuǎn)錄生成的線粒體 RNA)后,面臨的核心問題是 “如何將 mtDNA/RNA 轉(zhuǎn)化為可測序的 cDNA,同時保留 N6-dA 修飾信息”——LS05003 可高效催化這一轉(zhuǎn)化過程:若以 mtDNA 為模板,可先將其轉(zhuǎn)錄為 RNA 再逆轉(zhuǎn)錄;若直接使用線粒體 RNA,可一步完成逆轉(zhuǎn)錄,且全程不破壞 N6-dA 修飾的分子特征。后續(xù)通過 cDNA 測序與序列比對,即可篩選出含 N6-dA 修飾的片段,最終明確 mtDNA 中 N6-dA 修飾的分布區(qū)域與豐度,填補了線粒體 DNA 修飾研究的技術(shù)空白。

 

四、LS05003 的核心價值:不止是逆轉(zhuǎn)錄酶,更是前沿科研的 “成果加速器”

HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶核心優(yōu)勢

·更高耐熱性:在 37℃、42℃下活性與 AMV RT(禽成髓細胞瘤病毒逆轉(zhuǎn)錄酶)、M-MLV RT(莫洛尼鼠白血病病毒逆轉(zhuǎn)錄酶)相當,50℃時活性保留率顯著更高。

·抗病毒研究適配:是評估抗病毒劑的優(yōu)質(zhì)靶點。

·高靈敏度:適用于 RT-PCR 應(yīng)用,檢測靈敏度高。

·高 G/C 轉(zhuǎn)錄本適配:可高效逆轉(zhuǎn)錄高 G/C 含量的 RNA 轉(zhuǎn)錄本,解決此類模板 cDNA 合成效率低的問題。

 

LS05003 的產(chǎn)品特性也為實驗保駕護航:高比活(≥5,000 units/mg 蛋白)確保逆轉(zhuǎn)錄效率,-20℃穩(wěn)定儲存無需復雜操作,適配多種核酸模板(病毒 RNA、mRNA、mtDNA/RNA),讓科研人員無需為 “酶的穩(wěn)定性”“模板兼容性” 分心,專注于核心研究。

 

產(chǎn)品特性

具體參數(shù)

貨號

LS05003,200 U

LS05006,5x200 U

LS05000,定制包裝

名稱

Reverse Transcriptase, Recombinant HIV

重組 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶

純度標準

色譜法純化,無雜酶污染(如 DNA 酶、RNA 酶),確保逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)特異性

活性規(guī)格

≥5,000 units/mg 蛋白,滿足不同實驗規(guī)模需求

包裝選項

LS05003(200 units,適合預實驗)、LS05006(5×200 units,適合常規(guī)實驗)、LS05000(大包裝,適合高通量實驗)

運輸與儲存

需干冰運輸,-20℃儲存,避免反復凍融

質(zhì)量文檔

提供完整的安全數(shù)據(jù)表(SDS),包含酶的活性驗證、純度檢測、儲存條件等信息

 

 

 

相比于Merck的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶(Cat# 382129),Worthington同款酶,具有相同的活性,更低的價格,更快的貨期,歡迎垂詢Worthington中國區(qū)總代理,艾美捷科技,400-6800-868!


Worthington.png

 

選擇 LS05003,就是選擇 “有文獻支撐的可靠” 與 “賦能前沿的可能”

對于 HIV-1 免疫調(diào)控、RNA 修飾檢測、線粒體 DNA 修飾研究領(lǐng)域的科研人員而言,LS05003 絕非 “普通的逆轉(zhuǎn)錄酶”—— 它是解決實驗痛點的 “鑰匙”,是加速研究進程的 “引擎”,更是讓成果更具說服力的 “文獻背書工具”。

當你的研究因 “逆轉(zhuǎn)錄不精準”“修飾信息丟失”“特殊模板難處理” 而停滯時,LS05003 早已在文獻中證明:它能做到你需要的一切。選擇 Worthington Biochem LS05003,讓前沿科研不再受限于工具,讓每一次實驗都向 “突破性成果” 更近一步。



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