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膠原酶原料認(rèn)證:
粗膠原酶制劑含有兩種不同膠原酶的幾種亞型,一種巰基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一種胰蛋白酶樣酶和一種氨基肽酶。這種膠原溶解和蛋白水解活性的組合可有效分解細(xì)胞間基質(zhì),這是組織解離的重要組成部分。該復(fù)合物的一種成分是水解酶,其優(yōu)先降解天然膠原蛋白中的螺旋區(qū)域,優(yōu)先在序列Pro-Y-Gly-Pro中的Y-Gly鍵處降解,其中Y通常是中性氨基酸。這種裂解產(chǎn)生易受進(jìn)一步肽酶消化的產(chǎn)物。粗膠原酶被半胱氨酸、EDTA或鄰菲咯啉等金屬螯合劑抑制,但不受DFP抑制。它還被α2-巨球蛋白(一種大的血漿糖蛋白)抑制。Ca2+是酶活性所必需的。每種膠原酶的特定酶譜與獲得待研究細(xì)胞的組織(或與細(xì)胞的用途)相關(guān),并且由于相關(guān)性,Worthington已經(jīng)建立了幾種類型的粗膠原酶:類型1,2,3和4。
1型粗膠原酶具有膠原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
2型含有較高水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
3型含有最低水平的二級蛋白酶。
4型胰蛋白酶活性特別低,以限制對膜蛋白和受體的損傷。
5型含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。
6型含有高膠原酶活性,酪蛋白酶與膠原酶的比例~2:1。設(shè)計(jì)用于富集相對于 I 型膠原酶 II 型(col H)膠原酶(col G)。
7型膠原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型膠原酶高四倍。 純化的膠原酶,代碼:CLSPA,含有最少的二級蛋白水解活性以及高膠原酶活性。
艾美捷科技作為Worthington全國總代理,為您推薦Worthington主要產(chǎn)品膠原酶。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| 膠原蛋白酶 | WBC-LS005337 | 查看 |
新增功能! 無動物型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2 膠原酶來源于在完全不含動物成分的培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物,專為必須防止引入潛在動物源性病原體的生物工藝應(yīng)用而設(shè)計(jì)。二級蛋白酶的水平與1型和2型膠原酶相似。
CLSAFA 是最初的 AFA 等級,旨在具有類似于 1 型和 2 型膠原酶的膠原酶和二級蛋白酶。
CLSAFB含有比CLSAFA更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。
CLSAFC具有特別低的胰蛋白酶活性,類似于4型膠原酶。
STZ1 和 STZ2,0.22μ 過濾 STEMxyme? AOF 膠原酶/中性蛋白酶(Dispase?)混合物,用于原代和干細(xì)胞分離。
膠原酶測定是Mandl的修飾,其中膠原酶與天然膠原蛋白一起孵育五小時(shí),并使用Moore和Stein,JBC,176,367,(1948)比色茚三酮方法確定膠原蛋白分解的程度。釋放的氨基酸以每毫克膠原酶的微摩爾亮氨酸表示。Worthington還提供預(yù)包裝形式的每種類型的0.22μm過濾制劑,用于直接復(fù)溶并用于細(xì)胞分離和培養(yǎng)程序。酶類型和不同組織的有效性之間的相關(guān)性一直很好,但并不完美,部分原因是使用參數(shù)可變。然而,大多數(shù)研究人員認(rèn)為粗膠原酶批次的組織分型是一項(xiàng)有價(jià)值的服務(wù)。沃辛頓膠原酶和污染物測定的詳細(xì)描述可以在沃辛頓酶手冊中找到。此外,組織特異性參考文獻(xiàn)和詳細(xì)的分離條件可在沃辛頓組織解離指南中找到。
膠原酶用途:粗膠原酶廣泛用于酶促原代細(xì)胞分離和組織解離程序。大多數(shù)研究人員使用粗膠原酶制劑,如1型、2型、3型和4型或色譜純化的膠原酶(代碼:CLSPA);后者通常與彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶等次級酶結(jié)合。為了獲得最佳結(jié)果,蛋白水解活性的精確混合物必須針對要解離的組織進(jìn)行調(diào)整。不同組織的類型和有效性之間的相關(guān)性一直很好,但并不完美,并且可能部分取決于使用參數(shù)和目標(biāo)以及批次間的變化。
膠原酶相關(guān)產(chǎn)品:膠原蛋白 (CL) 脫氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF) 彈性蛋白酶 透明質(zhì)酸酶 透明質(zhì)酸酶 中性蛋白酶(分散酶,NPRO) 木瓜蛋白酶(PAP/PAPL/PAP2)蛋白酶 K (PROK) 胰蛋白酶 (TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK) 胰蛋白酶抑制劑 (LBI/OI/SI/SIC)
Worthington是一家通過的ISO9001認(rèn)證的家族企業(yè)。主要生產(chǎn)用于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。作為生命科學(xué)領(lǐng)域知名的酶類供應(yīng)商,以及細(xì)胞分離酶的專家級公司,其核心酶產(chǎn)品包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。

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