熒光染料又稱為熒光探針, 因具備檢測速度快、重復性好、用樣量少、無輻射等優(yōu)點，成為大家廣泛使用的熒光標示劑。同時也是細胞生物學等科學研究中不可或缺的重要工具，利用熒光探針可測定RNA和DNA的結構、研究DNA堿基損傷修復、辨別蛋白質分子中氨基的狀態(tài)和蛋白質分子的活性區(qū), 檢測pmol級的蛋白質 ,區(qū)分不同構象的核酸以及有關藥物的化學反應活性。熒光免疫分析采用時間-分辨技術可用于許多蛋白質、激素、病毒抗原及DNA雜交體的分析。激光誘導熒光光譜在活細胞、活體體液、DNA堿基序列和細菌原體的鑒定、惡性腫瘤的早期診斷和治療中起到了重要的作用。

由于大多數熒光染料不具備選擇性，被固載在生物活性載體的熒光染料，可利用生物活性物質之間的選擇性（抗原抗體，生物素鏈霉親和素），或者通過染料分子用適當的修飾官能團，通過官能團之間的相互反應，實現(xiàn)對目標物質的靶向性標記，下面我們就來給大家介紹常見的幾類活性熒光染料：

活性熒光素及其衍生物廣泛用于共價標記生物分子，例如抗體，碳水化合物，核酸，蛋白質，肽和寡核苷酸。各活化官能團對應的反應基團如下：

琥珀酰亞胺酯（Succinimidyl esters）/ NHS酯-用于標記抗體，蛋白質，肽，胺修飾的寡核苷酸和其他生物分子上的游離氨基（-NH 2）

馬來酰亞胺（Maleimides）-用于標記抗體，蛋白質和肽上的巰基

疊氮化物(Azides)-通過點擊化學法（Click）標記乙烯基

炔烴(Alkynes)-通過點擊化學方法標記疊氮化物

酰肼(Hydrazides)-用于標記醛基和酮基

羧酸(Carboxylic acids)-經碳二亞胺預活化后用于標記胺或用于醇的Steglich酯化

氨基(Amines)-具有游離氨基的熒光染料，用于與各種親電子化合物（如活化的酯和環(huán)氧化物）偶聯(lián)。

四嗪（Tetrazines）-通過反電子需求Diels-Alder反應標記反式環(huán)辛烯(TCO)，，環(huán)丙烯和其他活化的烯烴。

亞磷酰胺(Phosphoramidite)-亞磷酰胺標記的染料可用于標記寡核苷酸

環(huán)炔(Cycloalkyne)-具有環(huán)炔基部分的染料可用于無銅點擊化學反應。

氨基活性熒光染料：

羰基活性染料：

炔烴活性染料：

更多活性染料選擇請參見下圖：

看到這兒，您心動了嗎？馬上聯(lián)系小艾吧