微球（又稱乳膠微球或乳膠顆粒）, 是膠體粒度范圍內(nèi)的球形顆粒, 由諸如聚苯乙烯等非晶態(tài)聚合物形成。

熒光微球一般指微球的表面標(biāo)有熒光物質(zhì)(包括表面包覆)或微球體內(nèi)結(jié)構(gòu)含有熒光物質(zhì)(如包埋或聚合)的微球,受到外界能量刺激能激發(fā)出熒光。它是一種載有熒光分子的功能性微球,其外形一般為球形。近年來(lái),隨著熒光探針技術(shù)研究的深入,人們已經(jīng)能夠制備各種各樣的粒徑從納米級(jí)到亞微米級(jí)的熒光微球。

熒光微球作為一類特殊的功能微球,以其穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)、窄的粒徑分布、好的單分散性和高效的發(fā)光效率,吸引了國(guó)內(nèi)外研究者廣泛的關(guān)注,且在許多領(lǐng)域尤其是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有很重要的應(yīng)用。首先，熒光微球的載體多為有機(jī)或無(wú)機(jī)聚合物材料。

熒光微球的應(yīng)用：

①在標(biāo)記和示蹤方面的應(yīng)用

通過(guò)在聚合物微球表面或內(nèi)部引入一種或多種熒光物質(zhì)制備的熒光微球,可應(yīng)用到細(xì)胞標(biāo)記、生物分子標(biāo)記及在活性條件下的示蹤,也可固定蛋白質(zhì)分子等,并跟蹤其功能化過(guò)程。

②在檢測(cè)方面的應(yīng)用

將表面帶有能與被檢測(cè)物結(jié)合的配體的熒光微球與放射標(biāo)記的被檢測(cè)物相混合,體系中能與微球結(jié)合的被檢測(cè)物,其放射能激發(fā)熒光物質(zhì)產(chǎn)生熒光,而不能與微球結(jié)合的被檢測(cè)物,其放射能在水中淹滅,不能激發(fā)熒光,從而可以對(duì)被檢測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)。此外，熒光微球能夠攜帶許多熒光分子,較弱的刺激就可以引發(fā)較強(qiáng)的信號(hào),所以只需要少量的低能輻射就能產(chǎn)生熒光信號(hào),避免了使用傳統(tǒng)的放射性微球造成的輻射危險(xiǎn),并在不損失檢測(cè)靈敏度的前提下降低了成本。

③在免疫分析、藥物篩選方面的應(yīng)用

1）熒光微球由于其可作為診斷試劑而應(yīng)用于免疫分析。

熒光微球作為不同檢測(cè)對(duì)象的固定化載體應(yīng)用于生物樣品檢測(cè)中,不同熒光微球?qū)?yīng)不同的捕獲抗體,識(shí)別不同的抗原,從而實(shí)現(xiàn)多種待測(cè)抗原定性及定量檢測(cè)。

2）熒光微球表面連接可與待測(cè)物結(jié)合的受體,將待測(cè)物(配體)進(jìn)行放射性同位素標(biāo)記,兩者混合后,能與微球結(jié)合的待測(cè)物的放射性能激發(fā)熒光物質(zhì)產(chǎn)生熒光,而不能與微球結(jié)合的待測(cè)物,由于距離微球較遠(yuǎn),則不能激發(fā)熒光物質(zhì)產(chǎn)生熒光,從而達(dá)到了篩選的目的。高通量藥物篩選(HTS)是使用機(jī)器人和自動(dòng)化系統(tǒng),從大量的樣本中鑒別出對(duì)確定的分子靶標(biāo)有相互作用的少量活性化合物的一種現(xiàn)代藥物篩選技術(shù)。熒光微球的發(fā)展促進(jìn)了HTS的開發(fā)與發(fā)展。

④在固定化酶，基因研究方面的應(yīng)用

1）酶可以通過(guò)物理吸附或化學(xué)鍵合方式固定在熒光微球上,由于酶的立體形態(tài)被固定,使其不但具有較高的pH穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性和貯存穩(wěn)定性,而且易與反應(yīng)物分離，可以重復(fù)使用,提高使用效率。因此,在微球載體上固定化酶或其它生物活性物質(zhì), 更有利于其功能的發(fā)揮。

2）納米級(jí)熒光微球的尺寸與生物分子如核苷酸、蛋白質(zhì)等尺度相當(dāng),表面連接或包埋大量熒光分子聚合物。將此類微球連接在核苷酸鏈上,便可替代傳統(tǒng)芯片雜交熒光標(biāo)記技術(shù),實(shí)現(xiàn)熒光信號(hào)的放大,從而大大降低了基因芯片的成本。

⑤在標(biāo)準(zhǔn)物和生物探針?lè)矫娴膽?yīng)用

1）熒光微球在細(xì)胞流式記數(shù)測(cè)定方面有很重要的應(yīng)用 ,如用做測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物以及用來(lái)校準(zhǔn)細(xì)胞流式記數(shù)儀。

2）制備含有Cd Te量子點(diǎn)的聚苯乙烯微球,其表面吸附兔的免疫球蛋白后，可以作為蛋白質(zhì)靈敏檢測(cè)探針,且這種生物功能性標(biāo)記的量子點(diǎn)微球具有簡(jiǎn)單、快速和實(shí)用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

 今天給大家?guī)?lái)的是微球領(lǐng)域知名的供應(yīng)商Spherotech的SPHERO^TM熒光微球：

SPHERO^TM熒光微球是通過(guò)用熒光基團(tuán)溶液染色聚苯乙烯顆粒或通過(guò)在聚苯乙烯核心顆粒存在下聚合苯乙烯中的熒光團(tuán)來(lái)制備的。我們可以提供不同尺寸、不同顏色熒光基團(tuán)、不同熒光強(qiáng)度和表面官能團(tuán)的各種熒光微球。選擇用于制備SPHERO^TM熒光顆粒的熒光團(tuán)是非水溶性的，因此是非常穩(wěn)定的。這些熒光團(tuán)一旦結(jié)合到顆粒中，就不會(huì)浸出，并且它們的顏色和熒光在在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下可保存很長(zhǎng)時(shí)間。SPHERO^TM熒光微球顏色及管夠光譜如下圖所示：

SPHERO^TM熒光微球有各種尺寸和熒光強(qiáng)度的單個(gè)或多個(gè)熒光團(tuán)，尺寸和熒光的變化系數(shù)都很小。它們可用于乳膠凝集、熒光顯微鏡、共聚焦熒光顯微鏡。這些顆粒中的許多可以用于流式細(xì)胞術(shù)。四個(gè)通道2.9μm尼羅紅顆粒（目錄號(hào)FP-3056-2）的流式細(xì)胞儀直方圖如圖20所示。SPHEROTM熒光顆粒的更多流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)如下圖

部分熒光微球的流式細(xì)胞數(shù)據(jù)：

*使用具有以下激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的Dako Cyan ADP獲得的尺寸大于1.0um的微球的數(shù)據(jù)：

Violet 1:Ex 405nm，Em.450/50nm；Violet 2：Ex.405nm，Em.530/40nm；FITC：Ex.488nm，Em.530/40nm；PE：Ex. 488nm，Em. 575/25nm；

TR：Ex 488nm，Em.613/20nm；PE-Cy5:Ex 488nm，Em.680/30nm；PE-Cy7:Ex 488nm，Em.＞750nm；APC：Ex. 633nm，Em. 665/20nm；

APC-Cy7:633nm，Em.>750 nm

SPHERO^TM聚苯乙烯熒光微球：

高熒光強(qiáng)度和低熒光強(qiáng)度的微球：

熒光PMMA微球：

多重?zé)晒饣鶊F(tuán)的微球：

FITC標(biāo)記的微球(可用于流式細(xì)胞儀的校準(zhǔn)及不同的流式細(xì)胞數(shù)據(jù)的歸一化)：

Spherotech公司是全球知名的微球產(chǎn)品生產(chǎn)商之一。 Beckton Dickinson(BD)公司即用Spherotech的Rainbow熒光微球來(lái)對(duì)其流式細(xì)胞儀進(jìn)行靈敏度的校驗(yàn)。Spherotech公司生產(chǎn)的微球廣泛的應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和診斷，包括免疫熒光和免疫酶學(xué)檢測(cè)等。其微球適用于熒光顯微鏡技術(shù)、激光共聚焦(Confocal)技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、影像細(xì)胞術(shù)、磁性細(xì)胞分離技術(shù)、磁珠酶免測(cè)定法(EIA)等多種檢測(cè)方法。Spherotech常規(guī)生產(chǎn)高質(zhì)量的乳膠微球、熒光微球、順磁性微球、鐵磁性微球和多種有色微球，這些微球表面可根據(jù)應(yīng)用的需要添加不同的功能基團(tuán)(如羧基和氨基等)。此外，Spherotech公司還生產(chǎn)各種包被有抗體或配體，如親合素、鏈霉親合素和生物素等的微球，用于免疫學(xué)的研究和臨床。  

作為Spherotech在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的Spherotech的產(chǎn)品。