在蛋白質(zhì)泛素化修飾研究中，K63連接的多泛素鏈因其獨(dú)特的非降解性信號(hào)功能備受關(guān)注——它調(diào)控DNA修復(fù)、自噬、免疫信號(hào)傳導(dǎo)等關(guān)鍵通路，卻因細(xì)胞內(nèi)豐度低、易被去泛素化酶（DUBs）水解而難以精準(zhǔn)捕獲。LifeSensors的UM404M K63 TUBE磁珠（貨號(hào)：UM-0404M-1000）通過串聯(lián)泛素結(jié)合實(shí)體（TUBEs）技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)K63鏈的高效富集，成為解鎖復(fù)雜泛素網(wǎng)絡(luò)的“金鑰匙” 。

產(chǎn)品名稱：UM404M K63 TUBE Magnetic Beads（LifeSensors）  

核心功能：特異性富集K63連接的多聚泛素鏈，用于泛素化修飾研究  

產(chǎn)品性能與技術(shù)優(yōu)勢(shì)

1. 超高親和力與選擇性：  

納摩爾級(jí)結(jié)合力：K63 TUBE磁珠通過串聯(lián)泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域（TUBE）設(shè)計(jì)，UM404M對(duì)K63鏈的解離常數(shù)（Kd）達(dá)~20 nM，比傳統(tǒng)泛素抗體親和力高100-1000倍，顯著降低非特異性結(jié)合。這種特異性源于其優(yōu)化的空間構(gòu)象，可精準(zhǔn)識(shí)別K63鏈獨(dú)特的延伸構(gòu)型。  

100倍鏈類型選擇性：對(duì)K63鏈的富集效率顯著高于K48/K11等類型（選擇性比>100:1），杜絕交叉反應(yīng)。

2. 高效保護(hù)泛素化修飾：  

傳統(tǒng)免疫沉淀中，DUBs會(huì)水解不穩(wěn)定的泛素鏈。UM404M的TUBE結(jié)構(gòu)能在無抑制劑添加的條件下，阻斷DUBs和蛋白酶體活性，防止樣本中泛素鏈降解，確保修飾完整性。

3. 兼容低豐度樣本：  

僅需2 mg蛋白裂解液即可高效富集K63泛素化蛋白，適用于珍貴臨床樣本（如腦組織、原代細(xì)胞）。  

已發(fā)表文獻(xiàn)中的關(guān)鍵應(yīng)用

1. DNA損傷修復(fù)與信號(hào)通路：  

·K63泛素鏈?zhǔn)荝ad6介導(dǎo)的DNA修復(fù)通路的必需信號(hào)。研究表明，UbK63R突變體會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)甲基磺酸甲酯（MMS）和UV敏感，證實(shí)K63鏈在基因組穩(wěn)定性中的核心作用。  

·應(yīng)用案例：通過K63 TUBE富集，可研究DNA損傷后修復(fù)蛋白的泛素化動(dòng)態(tài)。  

2. 膜蛋白運(yùn)輸與內(nèi)吞作用：  

·K63鏈?zhǔn)嵌嗯蒹w（MVB）分選途徑的特異性信號(hào)。酵母研究中，Gap1透膜蛋白和羧肽酶S（CPS）依賴K63泛素化進(jìn)入MVB途徑，而單泛素化僅介導(dǎo)內(nèi)吞。  

·應(yīng)用案例：結(jié)合免疫熒光技術(shù)，可追蹤K63泛素化對(duì)膜蛋白定位的影響（如GFP-CPS的液泡定位）。  

3. 免疫信號(hào)與疾病機(jī)制：  

·TBK1單倍劑量不足研究：通過K63 TUBE富集腦組織和成纖維細(xì)胞樣本，發(fā)現(xiàn)TBK1突變導(dǎo)致K63泛素化譜改變，為神經(jīng)退行性疾病提供新機(jī)制。  

·JAK2激酶調(diào)控：在骨髓惡性腫瘤中，K63 TUBE捕獲TPO刺激后JAK2的K63泛素化，揭示其通過非降解途徑調(diào)控造血干細(xì)胞功能。  

·Ataxin-3去泛素化酶靶點(diǎn)鑒定：在THP-1免疫細(xì)胞中，K63 TUBE篩選出Ataxin-3特異性作用的K63泛素化底物。  

4. 氧化應(yīng)激與蛋白酶體降解：  

·過氧化氫（H2O2）刺激下，酵母內(nèi)K63泛素鏈快速積累，調(diào)控翻譯應(yīng)激反應(yīng)。  

·突破性發(fā)現(xiàn)：K63鏈可作為“種子”觸發(fā)K48/K63分支泛素鏈形成，驅(qū)動(dòng)蛋白酶體降解（如TXN蛋白）。  

操作流程簡便高效

1. 樣本處理：裂解液加入磁珠，4°C旋轉(zhuǎn)孵育過夜。  

2. 清洗與洗脫：TBS-T緩沖液清洗3次，避免污染物殘留。  

3. 下游分析：  

·質(zhì)譜（MS）：直接在磁珠上酶解，鑒定K63泛素化蛋白。  

·Western Blot：配合K63鏈特異性抗體（如Anti-K63 Ubiquitin）驗(yàn)證。  

為什么選擇K63 TUBE磁珠？  

·解決行業(yè)痛點(diǎn)：傳統(tǒng)方法難以區(qū)分泛素鏈類型，且K63鏈豐度低、易被DUB降解。  

·推動(dòng)“泛素密碼”解碼：K63鏈在NF-kB激活、自噬、炎癥反應(yīng)中具有不可替代的功能。  

·臨床轉(zhuǎn)化潛力：為癌癥、神經(jīng)疾病、免疫紊亂的靶向治療提供分子標(biāo)志物。  

產(chǎn)品訂購信息   

產(chǎn)品名稱：UM404M K63 TUBE Magnetic Beads  

產(chǎn)品貨號(hào)：UM-0404M-1000

規(guī)格：1.0 mL/瓶  

適用場(chǎng)景：細(xì)胞信號(hào)、蛋白質(zhì)組學(xué)、疾病機(jī)制研究  

獲取渠道：LifeSensors中國區(qū)獨(dú)家代理商——艾美捷科技

技術(shù)服務(wù)：400-6800-868

參考文獻(xiàn)：  

1. Komander & Rapé (2012) The ubiquitin code  

2. Spence et al. (1995) K63鏈在DNA修復(fù)中的功能  

5. Khoshnood et al. (2021) TBK1突變與K63泛素化譜關(guān)聯(lián)  

13. Lv et al. (2017) JAK2的K63泛素化調(diào)控  

28. Ohtake et al. (2018) K63鏈觸發(fā)分支泛素化降解  

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