DNA損傷分析試劑盒為基礎(chǔ)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了強(qiáng)大的工具。這種創(chuàng)新的方法是基于在一個(gè)長(zhǎng)（8.2-8.8 kb）的線粒體DNA片段上進(jìn)行30個(gè)周期的定量PCR，然后使用實(shí)時(shí)PCR進(jìn)行定量。   

整套試劑盒可用于人、大鼠或小鼠的血液、細(xì)胞或組織。由于缺失和鏈斷裂造成的DNA損傷可以用此試劑盒檢測(cè)，使用微板格式的DNA分離技術(shù)，該試劑盒可以很容易地用于高通量格式。在這方面，Detroit R&D研發(fā)分析是一個(gè)很有前途的工具，因?yàn)榭焖伲僮骱?jiǎn)單，只需要少量的測(cè)試物質(zhì)。  

【Products】

【Cat# DD2H】: Real-Time PCR DNA Quantitation following QPCR for human 

【Cat# DD2M】: Real-Time PCR DNA Quantitation following QPCR for mouse 

【Cat# DD2R】: Real-Time PCR DNA Quantitation following QPCR for rat   

DNA損傷分析試劑盒，用于在體內(nèi)和體外測(cè)量8.8 kb線粒體DNA的損傷，通過(guò)QPCR分析，對(duì)復(fù)制的DNA進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR定量： 

試劑盒包含DNA聚合酶、QPCR引物和dNTPs，real-time PCR的引物，以及用于real-time PCR定量的8.8kb real-time PCR標(biāo)準(zhǔn)品(不包括SYBR Green master mix for real-time PCR)。重復(fù)分析20個(gè)樣品（45個(gè)反應(yīng)）。  

左：實(shí)時(shí)PCR標(biāo)準(zhǔn)品擴(kuò)增圖；右：實(shí)時(shí)PCR分析8.8kb線粒體DNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線

【Related Products】

【Catalog # MCN1, MCN2, MCN3】 ：Mitochondrial DNA Copy Number Kits 

這些是基于定量PCR的試劑盒，用于測(cè)量人、大鼠或小鼠的線粒體DNA拷貝數(shù)。該試劑盒包括小鼠、人或大鼠的引物，可產(chǎn)生200 kb的線粒體DNA序列。此外，該試劑盒還包括核DNA（b-actin）序列的引物，標(biāo)準(zhǔn)曲線的內(nèi)控物，含有Taq DNA聚合酶，dNTPs，MgCl₂和緩沖液的反應(yīng)混合物和測(cè)定板。  

【相關(guān)應(yīng)用】

LQPCR線粒體DNA損傷測(cè)定

使用表達(dá)DNA損傷敏感cox -2的XPA細(xì)胞進(jìn)行臨床前候選藥物篩選

候選藥物通常被生物轉(zhuǎn)化為有活性的毒性代謝物，通過(guò)COX-2過(guò)氧化物酶活性破壞DNA。Comet和OxyDNA檢測(cè)分別檢測(cè)斷裂DNA和氧化DNA。然而，候選藥物形成的數(shù)千種不同的DNAs，無(wú)法用這種方法檢測(cè)到。Detroit R&D開(kāi)發(fā)了一種LQPCR檢測(cè)方法，用于檢測(cè)數(shù)千種不同候選藥物引起的DNA損傷修復(fù)缺陷，著色性干皮病A組（XPA）人成纖維細(xì)胞系致敏DNA損傷發(fā)生的候選藥物。表達(dá)COX-2的XPA細(xì)胞具有較強(qiáng)的COX-2催化活性。

LQPCR DNA損傷檢測(cè)的應(yīng)用實(shí)例： 

用一種已知的COX-2激活的DNA損傷劑benzo(a)pyrene-7,8-dihydrodiol (BPD)，COX-2過(guò)氧化物酶活性的底物- tert-butyl hydroperoxide (t-BOOH)處理表達(dá)COX-2的XPA細(xì)胞。采用LQPCR分析DNA損傷。如上圖柱狀圖所示，COX-2依賴(lài)性DNA損傷在BPD治療后顯著增加。   

除了細(xì)胞系統(tǒng)外，LQPCR DNA損傷測(cè)定還可用于新鮮或冷凍的組織或血液標(biāo)本。因此，這種LQPCR DNA損傷試驗(yàn)不僅可以用于篩選細(xì)胞內(nèi)的候選藥物，也可以用于篩選體內(nèi)的候選藥物。   

Detroit R&D公司位于美國(guó)，研發(fā)實(shí)驗(yàn)室和辦公室位于密歇根州底特律市。由Dr. Hyesook Kim創(chuàng)立于1997年，通過(guò)領(lǐng)先的技術(shù)，致力于贏得科研工作者的絕對(duì)信任，提供優(yōu)質(zhì)，最高質(zhì)量的產(chǎn)品。Detroit R&D研發(fā)一直穩(wěn)步建立自己作為一個(gè)世界范圍內(nèi)的新型診斷和藥物篩選產(chǎn)品的來(lái)源。