Cayman的白蛋白（人）ELISA試劑盒是一種競爭性檢測方法，可用于定量血漿、血清和尿液中的人白蛋白。該檢測使用兩種標(biāo)準(zhǔn)：用于血漿和血清測量的血清白蛋白，以及用于尿液測量的從人類尿液中純化的白蛋白。該測定的范圍為7.8-1000ng/ml，血清和尿液中的中點（50%B/B0）分別為90-130ng/ml和50-80ng/ml，血清中的靈敏度（80%B/B0）約為25ng/ml，尿液中的靈敏度約為15ng/ml。

需要但未提供：請下載試劑盒小冊子，以驗證此檢測是否需要超純水（Milli-Q或同等產(chǎn)品）或任何其他成分。

警告：本品不適用于人類或獸醫(yī)。

檢測原理：

艾美捷Cayman的白蛋白(人)ELISA試劑盒（#501760），基于天然白蛋白與白蛋白-辣根過氧化物酶（HRP）綴合物（白蛋白-HRP追蹤器）對限量的白蛋白單克隆抗體的爭奪。由于白蛋白-HRP追蹤器的濃度保持恒定，而天然白蛋白的濃度變化，能夠與白蛋白單克隆抗體結(jié)合的白蛋白-HRP追蹤器的量將與孔中天然白蛋白的濃度成反比。這種抗體-白蛋白復(fù)合物與之前固定在孔中的山羊抗小鼠IgG結(jié)合。然后對板進(jìn)行洗滌以去除任何未結(jié)合的試劑，并向孔中加入TMB底物溶液（其中含有HRP的底物）。這一酶促反應(yīng)的產(chǎn)物具有明顯的黃色，并且在450納米處吸收強(qiáng)烈。通過分光光度法測定的這種顏色的強(qiáng)度與結(jié)合在孔中的白蛋白-HRP追蹤器的量成正比，這又與孵化期間孔中存在的游離白蛋白的量成反比，如方程式所述：

吸光度[結(jié)合白蛋白-HRP追蹤器]c1/[白蛋白]Aschematic

過程示意圖見圖1。

ELISA示意圖

計算：

數(shù)據(jù)準(zhǔn)備

以下是在圖形分析前推薦的數(shù)據(jù)準(zhǔn)備程序。

注意：如果板讀數(shù)器沒有從其他板的吸光度讀數(shù)中減去Blk孔的吸光度讀數(shù)，請確保現(xiàn)在這樣做。

1. 平均NSB孔的吸光度讀數(shù)。

2. 平均B?孔的吸光度讀數(shù)。

3. 從B?平均值中減去NSB平均值。這是校正后的B?或校正后的最大結(jié)合。

4. 計算剩余孔的B/B?（樣本或標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合/最大結(jié)合）。為此，從S1吸光度中減去平均NSB吸光度，并除以校正后的B?（來自步驟3）。對S2-S8和所有樣本孔重復(fù)此操作。（要獲得邏輯四參數(shù)擬合的%B/B?，將這些值乘以100。）

注意：TA值不用于標(biāo)準(zhǔn)曲線計算。相反，它們被用作診斷工具。TA孔的低吸光度或無吸光度可能表明酶-底物系統(tǒng)存在故障。

特征：

測量人血漿、血清和尿液中的白蛋白

檢測24個樣本，一式三份，36個樣本，共兩份

將血清白蛋白水平降至25 ng/ml，尿液白蛋白水平降至15 ng/ml

快速測定；在三小時內(nèi)得到結(jié)果

白蛋白(人)ELISA試劑盒文獻(xiàn)參考：

1.Quinlan,G.J.,Martin,G.S.,and Evans,T.W.Albumin:Biochemical propertiesand therapeutic potential.Hepatology 41(6),1211-1219(2005).

2.Speeckaert,M.M.,Speeckaert,R.,Van De Voorde,L.,et al.Immunochemicallyunreactive albumin in urine:Fiction or reality?Crit.Rev.Clin.Lab.Sci.48(2),87-96(2011).

3.Carvalho,J.R.and Machado,M.V.New insights about albumin and liverdisease.Ann.Hepatol.17(4),547-560(2018).

4.Corti,M.C.,Guralnik,J.M.,Salive,M.E.et al.Serum albumin level andphysical disability as predictorsof mortality in older persons.JAMA 272(13),1036-1042(1994).