PARP是一種在DNA修復(fù)、轉(zhuǎn)錄、凋亡和免疫功能中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶。PARP-1招募合成DNA酶來(lái)激活DNA修復(fù)。PARP-2維持基因組穩(wěn)定性并修復(fù)DNA單鏈斷裂(SSB。PARP-1和PARP-2在DNA修復(fù)系統(tǒng)中具有相同的調(diào)節(jié)機(jī)制，但它們與DNA斷裂結(jié)合的機(jī)制不同。PARP抑制劑與PARP酶結(jié)合后，PARP蛋白會(huì)與DNA損傷位點(diǎn)結(jié)合形成PARP-DNA復(fù)合物而無(wú)法分離，這就造成了其他DNA修復(fù)蛋白無(wú)法參與修復(fù)過(guò)程，甚至?xí)斐蛇M(jìn)一步形成DNA的雙鏈損傷，這就是制劑所造成的PARP Trap效應(yīng)。由于PARP Trap對(duì)腫瘤細(xì)胞的具有更強(qiáng)的殺傷效應(yīng)，因此，對(duì)抑制劑的PARP Trap能力檢測(cè)變的非常重要。

近期，國(guó)際團(tuán)隊(duì)在Molecular Cancer Therapeutics（AACR）在線發(fā)表了題為"Venadaparib Is a Novel and Selective PARP Inhibitor with Improved Physicochemical Properties, Efficacy, and Safety"的文章，合成了新型強(qiáng)效PARP抑制劑維那達(dá)帕利(Venadaparib，也稱為IDX-1197或NOV140101)，評(píng)估了Venadaparib對(duì)PARP酶、PAR形成和PARP捕獲活性的療效，以及對(duì)BRCA突變細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制作用，還建立了體外和體內(nèi)模型，以研究藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)、療效和毒性。Venadaparib將有望成為下一代PARP抑制劑。Venadaparib的療效和安全性的Ib/IIa期研究已經(jīng)啟動(dòng)。  

艾美捷PARPtrap檢測(cè)試劑盒(PARPtrap Assay Kit for PARP1)（80584），為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的科研探索貢獻(xiàn)一份力量。  

BPS Bioscience特別的PARPtrap檢測(cè)試劑盒，非常適用于藥物研發(fā)和高通量篩選應(yīng)用中，篩選增強(qiáng)PARP/DNA固定能力的小分子化合物。

貨號(hào) 名稱 規(guī)格 說(shuō)明

80584-1 PARPtrap Assay Kit for PARP1 96rxns. 篩選增強(qiáng)PARP1/DNA固定能力的小分子化合物，并用于確定化合物的IC50值。

80584-2 384rxns.

78296-1 PARPtrap Assay Kit for PARP2 96rxns. 篩選增強(qiáng)PARP2/DNA固定能力的小分子化合物，并用于確定化合物的IC50值。

78296-2 384rxns.

78317 PARPtrap Combo Assay Kit for PARP1 and PARP2 384rxns 篩選增強(qiáng)PARP1/2在DNA上的固定能力的小分子化合物，并用于確定化合物的IC50值。

* 以上均為熒光偏振測(cè)定法（fluorescence polarization, FP）

該項(xiàng)研究中使用了艾美捷 BPS Bioscience的PARPtrap Assay Kit for PARP1（80584），用于檢測(cè)PARP1捕獲檢測(cè)。  

產(chǎn)品解讀:

PARPtrap Assay Kit for PARP1（80584）

PARPtrap檢測(cè)試劑盒(PARPtrap Assay Kit for PARP1)旨在利用熒光偏振（FP）高通量篩選測(cè)定法測(cè)量PARP1/DNA復(fù)合物形成。PARP1以其DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域而聞名。與DNA的結(jié)合激活PARP1，在NAD+存在的情況下，PARP1會(huì)對(duì)自身進(jìn)行核糖基化（自動(dòng)核糖基化），這導(dǎo)致核糖聚合物的負(fù)電荷積累，從而導(dǎo)致PARP1從DNA上解離。然而，在一些抑制劑的存在下，PARP仍然與DNA結(jié)合，這種現(xiàn)象稱為困擾。已經(jīng)證明，被困的PARP-DNA復(fù)合物對(duì)癌細(xì)胞具有高度毒性，因此這類抑制劑對(duì)癌癥治療可能是可取的。

PARPtrap檢測(cè)試劑盒(PARPtrap Assay Kit for PARP1)的關(guān)鍵是熒光標(biāo)記的寡核苷酸雙鏈。在未發(fā)生核糖基化的情況下，PARP1與熒光探針結(jié)合，形成大的復(fù)合物，并導(dǎo)致高度偏振光的發(fā)射。然而，在自動(dòng)核糖基化后，PARP1從寡核苷酸雙鏈解離，然后自由旋轉(zhuǎn)，發(fā)射較少偏振光。添加PARP1抑制劑會(huì)導(dǎo)致PARP1被困在熒光寡核苷酸雙鏈中，并以劑量依賴的方式增加FP信號(hào)。

PARPtrap檢測(cè)試劑盒(PARPtrap Assay Kit for PARP1)是一種熒光偏振均相分析法。FP信號(hào)是使用能夠測(cè)量熒光偏振的熒光微孔板讀數(shù)器來(lái)測(cè)量的。

文獻(xiàn)參考：

Murai, J., et al. Molecular Cancer Therapeutics 2014. 13:433-443.

Murai, J., et. al. Cancer Research 2012. 72:5588-5599.

Zandarashvili, L., et al. Science 2020. 368(6486): eaax6367.

浦海景珊生物技術(shù)有限公司（Genvivo Biotech）是一家提供高端成像試劑的公司，Genvivo的目標(biāo)是開(kāi)發(fā)一系列適應(yīng)于超分辨成像的染料技術(shù)。PKMITO 系列線粒體染料，Gen Fluor 系列熒光染料及抗體是他們先推出的適應(yīng)于超分辨熒光成像產(chǎn)品。目前他們正在繼續(xù)深耕新一代產(chǎn)品研發(fā)，旨在為科研用戶和企業(yè)用戶提供特別的成像體驗(yàn)。其開(kāi)發(fā)的拳頭產(chǎn)品PKMITO 系列線粒體染料是基于北京大學(xué)學(xué)術(shù)成果轉(zhuǎn)化，是市面上持續(xù)時(shí)間特別長(zhǎng)，細(xì)胞毒性特別小的超分辨率的線粒體探針。