D-氨基酸氧化酶（DAAO）是一種氧化還原酶，它將D-氨基酸氧化脫氨基為相應(yīng)的α-酮酸。DAAO是一種黃酶，每單體含有1摩爾FAD。

特異性

D-型脯氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、丙氨酸、纈氨酸和苯丙氨酸是良好的底物（Scannone等人1964年，Dixon和Kleppe 1965b年）。據(jù)報道，該酶作用于L-脯氨酸（Wellner和Scannone 1964年）和D-乳酸（Yagi和Ozawa 1964b年）。pkDAOO的最佳底物是D-脯氨酸，而DAAOs對D-天冬氨酸表現(xiàn)出非常低或沒有活性（Tishkov和Khoronenkova 2005年）。

不同物種的DAAOs一級結(jié)構(gòu)中的底物結(jié)合域沒有顯示出高度同源性。這可能反映了不同來源的DAAOs在特異性上的廣泛變化（Tishkov和Khoronenkova 2005年）。

組成

活性pkDAAO全酶是一個由347個氨基酸組成的單體，可以發(fā)生二聚化。單體比二聚體更具活性，并且每個單體含有1摩爾非共價結(jié)合的FAD。截至2000年，所有已表征的DAAOs都含有非共價結(jié)合的FAD作為它們的輔助基團（Pilone 2000年）。

分子特征

編碼哺乳動物DAAO的基因在基因組中只有一個副本。一個1041 bp的開放閱讀框架編碼了酶的所有347個氨基酸。這表明沒有發(fā)生由蛋白酶催化的翻譯后加工（Fukui 1987年）。

豬D-氨基酸氧化酶的一級結(jié)構(gòu)由Ronchi等人（Ronchi等人1982年）確定，基因由Momoi等人（Momoi等人1988年）克隆。在不同來源的DAAOs中，一級結(jié)構(gòu)中有六個區(qū)域高度保守（Faotto等人1995年）。區(qū)域I包含共識序列GXGXXG，區(qū)域I和III已被發(fā)現(xiàn)涉及輔酶結(jié)合（Wierenga等人1983年）。區(qū)域II、IV和V包含活性位點殘基。Ser-Lys/His-Leu末端序列是過氧化物酶體靶向信號序列（Subramani 1993年，Pilone 2000年）。

哺乳動物DAAOs顯示出63%的同一性，而三種已知的微生物DAAOs（R. gracilis、T. variabilis和Fusarium solanii）顯示出18%的同一性。酵母和哺乳動物DAAOs之間觀察到30%的同一性（Pilone 2000年）。

艾美捷Worthington氨基酸氧化酶，D-（9000-88-8）的應(yīng)用：

酮酸制備

氧化還原研究

從外消旋混合物中分離L-氨基酸

FAD測定

D-丙氨酸測定

生物傳感器（Inaba等人2003年）

D-氨基酸氧化酶的特性：

CATH分類

類別：Alpha Beta

架構(gòu)：2層三明治和3層（aba）三明治

拓撲：D-氨基酸氧化酶；鏈A，第2個結(jié)構(gòu)域和Rossmann折疊

分子量：78.7 kDa（理論）

單體：38.0-39.0 kDa（Curti等人1973年，Tu等人1973年）

最佳pH值：

取決于底物：D-丙氨酸約為9（Dixon和Kleppe 1965c年）。

等電點：7.0，7.2（Tishkov和Khoronenkova 2005年）

消光系數(shù)：

75,420 cm-1 M-1（理論）

E1%,280 = 19.17（理論）

活性位點殘基：

酪氨酸（Y224）

天冬氨酸（D228）

精氨酸（R283）

（Pilone 2000年）

抑制劑：

2-羥酸，2-酮酸和2-氧丁酸（Dixon 1965b年）

代謝產(chǎn)物和藥物（Hamilton和Buckthal 1982年）

腺苷5'-單磷酸和苯胺（Yagi等人1972c年）

苯甲酸（Pollegioni等人2007年）

苯甲酸鈉（Nguyen等人2009年）

文獻參考：

Aki, K. , Tagagi, T. , Isemura, T. and Yamano, T.

Optical Rotatory Dispersion and Circular Dichroism of D-Amino Acid Oxidase , Biochim Biophys Acta 122 , 193 , 1966

Alston, T. , Porter, D. and Bright, H.

Suicide Inactivation of D-Amino Acid Oxidase by 1-Chloro-1-Nitroethane , J Biol Chem 258 , 1136 , 1983

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