一、產(chǎn)品概述

HdmX（又稱(chēng)MDM4）是p53信號(hào)通路的關(guān)鍵負(fù)調(diào)控因子，與MDM2協(xié)同作用抑制p53的轉(zhuǎn)錄活性并促進(jìn)其降解。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的抗HdmX/MDM4兔多克隆抗體（A300-287A）為針對(duì)人HdmX/MDM4蛋白的兔多克隆抗體，經(jīng)抗原親和純化，適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質(zhì)印跡（WB）檢測(cè)。抗體識(shí)別表位位于MDM4蛋白第125–175位氨基酸區(qū)域，可特異性檢測(cè)人源MDM4蛋白，為p53通路研究提供可靠工具。

二、關(guān)鍵規(guī)格

參數(shù) | 詳細(xì)信息

靶標(biāo) | HdmX / MDM4

反應(yīng)性 | 人

應(yīng)用 | IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第125–175位氨基酸區(qū)域

同型 | IgG

偶聯(lián)物 | 未偶聯(lián)

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1000 ug/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉

三、生物學(xué)背景

MDM4（Gene ID 4194，Uniprot O15151，官方基因名MDM4，p53 regulator）是mouse double minute 4的人類(lèi)同源物，又稱(chēng)HDMX、MDMX或MRP1。MDM4蛋白包含RING指結(jié)構(gòu)域，可與p53直接相互作用。雖然MDM4本身缺乏E3泛素連接酶活性，但它通過(guò)與結(jié)構(gòu)相似的MDM2結(jié)合，增強(qiáng)MDM2介導(dǎo)的p53泛素化和蛋白酶體降解。此外，MDM4還可直接抑制p53的轉(zhuǎn)錄激活功能，是p53通路中不可或缺的負(fù)調(diào)控因子。

MDM4在多種腫瘤中過(guò)表達(dá)，通過(guò)抑制p53活性促進(jìn)腫瘤發(fā)生和耐藥性，因此成為癌癥研究和藥物開(kāi)發(fā)的重要靶點(diǎn)。本抗體識(shí)別的表位位于MDM4蛋白的第125–175位區(qū)域，該區(qū)域靠近N端p53結(jié)合域，適合檢測(cè)全長(zhǎng)MDM4及其相互作用復(fù)合物。

別稱(chēng)：Double minute 4蛋白、HDMX、MDM2樣p53結(jié)合蛋白、MDM4蛋白變異體G/Y、MRP1、p53結(jié)合蛋白MDM4等。

四、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性

抗體以1000 ug/ml濃度提供于Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8）中，含0.09%疊氮化鈉防腐劑。收到后請(qǐng)于2–8°C條件下儲(chǔ)存，嚴(yán)禁冷凍。反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白變性或聚集。在此條件下，自收貨之日起可穩(wěn)定保存1年。

注意：疊氮化鈉具有毒性，且可能抑制HRP活性。如用于HRP檢測(cè)系統(tǒng)（如WB中的化學(xué)發(fā)光），應(yīng)確保充分洗滌；若需去除防腐劑，可使用脫鹽柱或透析。

五、應(yīng)用與推薦稀釋度

蛋白質(zhì)印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:1000 – 1:5000

封閉與抗體稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過(guò)夜孵育（推薦4°C）

標(biāo)準(zhǔn)WB二抗：山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（貨號(hào)A120-101P）

免疫沉淀后WB的特殊注意事項(xiàng)

當(dāng)檢測(cè)免疫沉淀復(fù)合物中的MDM4時(shí)，常規(guī)抗兔IgG二抗會(huì)識(shí)別免疫沉淀所用抗體的重鏈（約55 kDa）和輕鏈（約25 kDa）。MDM4的分子量約為55–60 kDa，與IgG重鏈大小接近，可能被重鏈信號(hào)掩蓋。因此，免疫沉淀產(chǎn)物的WB檢測(cè)推薦使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體，并在封閉緩沖液中添加5%正常豬血清（貨號(hào)S100-020），以選擇性識(shí)別輕鏈而避免重鏈干擾。

免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 ug抗體 / mg細(xì)胞裂解液

六、注意事項(xiàng)

1. 僅限研究使用：本產(chǎn)品僅用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷、治療或人體相關(guān)應(yīng)用。

2. 安全操作：緩沖液含疊氮化鈉，操作時(shí)請(qǐng)佩戴防護(hù)手套和護(hù)目鏡，避免皮膚接觸。

3. 批次驗(yàn)證：不同批次抗體濃度已標(biāo)準(zhǔn)化為1000 ug/ml，但建議收到新批次后在特定應(yīng)用中進(jìn)行稀釋度驗(yàn)證。

本抗體為研究MDM4在p53信號(hào)通路、腫瘤發(fā)生及耐藥性中的功能提供了高特異性的檢測(cè)工具。