一、產(chǎn)品概述

beta Actin（β-肌動蛋白）是真核細(xì)胞中普遍表達(dá)的高度保守的細(xì)胞骨架蛋白，廣泛用作Western Blot、IHC等實(shí)驗(yàn)的內(nèi)參對照。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本產(chǎn)品（A300-491A）為針對人beta Actin N端區(qū)域的兔多克隆抗體，經(jīng)抗原親和純化，可同時識別人和小鼠來源的beta Actin。初步數(shù)據(jù)表明，該抗體還可識別高度同源的gamma Actin。產(chǎn)品適用于免疫組織化學(xué)（IHC）和蛋白質(zhì)印跡（WB），具有極高的檢測靈敏度（WB稀釋比高達(dá)1:25,000），是蛋白表達(dá)定量和細(xì)胞結(jié)構(gòu)研究的理想內(nèi)參工具。

二、關(guān)鍵規(guī)格

參數(shù) | 詳細(xì)信息

靶標(biāo) | beta Actin

反應(yīng)性 | 小鼠、人

應(yīng)用 | IHC, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第1–50位氨基酸（N端）

同型 | IgG

偶聯(lián)物 | 未偶聯(lián)

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1000 ug/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉

三、分子生物學(xué)背景

beta Actin（基因名ACTB，Gene ID 60，Uniprot P60709）是六種高度保守的肌動蛋白異構(gòu)體之一，在真核細(xì)胞中普遍表達(dá)。作為細(xì)胞骨架的主要組成部分，beta Actin具有以下核心功能：

維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)：形成微絲網(wǎng)絡(luò)，賦予細(xì)胞機(jī)械強(qiáng)度和形態(tài)。

調(diào)控細(xì)胞運(yùn)動：參與細(xì)胞遷移、分裂、胞質(zhì)分裂及細(xì)胞連接形成。

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)：與多種信號蛋白相互作用，影響基因表達(dá)和細(xì)胞命運(yùn)。

由于beta Actin在各組織、各發(fā)育階段及多種實(shí)驗(yàn)條件下表達(dá)水平相對穩(wěn)定，它被廣泛用作蛋白質(zhì)印跡（WB）和免疫組織化學(xué)（IHC）中的上樣對照或內(nèi)參，用于校正蛋白定量和檢測體系的一致性。

注意：本抗體免疫原為beta Actin N端第1–50位氨基酸。該區(qū)域在beta Actin與gamma Actin（基因ACTG1）之間高度保守，因此初步數(shù)據(jù)顯示A300-491A也可能識別gamma Actin（Gene ID 71）。在解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果時需考慮此交叉反應(yīng)性。

別稱：細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白1、beta細(xì)胞骨架肌動蛋白、BRWS1、PS1TP5結(jié)合蛋白1等。

四、儲存與穩(wěn)定性

抗體以1000 ug/ml濃度提供于Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8）中，含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。收到后請于2–8°C條件下垂直保存，切勿冷凍。冷凍會導(dǎo)致蛋白變性和聚集，影響抗體結(jié)合活性。在正確儲存條件下，自收貨之日起可穩(wěn)定保存1年。

重要提示：疊氮化鈉會抑制辣根過氧化物酶（HRP）活性。若后續(xù)使用HRP偶聯(lián)二抗進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測，請確保洗滌步驟充分；如需完全去除疊氮化鈉，可使用脫鹽柱或透析。

應(yīng)用與推薦工作條件

蛋白質(zhì)印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:10,000 – 1:25,000（超高靈敏度）

封閉與抗體稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育（推薦4°C）

推薦二抗：山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（貨號A120-101P）

五、性能特點(diǎn)

beta Actin在常見細(xì)胞裂解液（如HeLa、HEK293T、NIH/3T3）中表達(dá)豐度極高，通常僅需5–10 ug總蛋白即可獲得強(qiáng)信號。

稀釋度1:25,000已足以檢測大多數(shù)樣品中的內(nèi)源性beta Actin。對于特別豐富的樣品，可進(jìn)一步稀釋至1:50,000。

超高稀釋比意味著極低的抗體消耗：一支100 ul抗體（1000 ug/ml，即100 ug總量）可制備高達(dá)2,500 ml工作液（按1:25,000計(jì)算），顯著降低單次實(shí)驗(yàn)成本。

六、優(yōu)化建議

起始稀釋度：建議從1:20,000開始。若信號過強(qiáng)（出現(xiàn)飽和或背景彌散），可提高至1:25,000或更高；若信號偏弱，可降至1:10,000。

上樣量：對于全細(xì)胞裂解液，建議上樣5–20 ug總蛋白。過高的上樣量可能導(dǎo)致信號飽和，不適合作為定量內(nèi)參。

曝光時間：由于beta Actin豐度高，化學(xué)發(fā)光曝光時間通常很短（數(shù)秒至1分鐘），注意避免過曝導(dǎo)致條帶合并。

七、注意事項(xiàng)

1. 研究用途限制：本產(chǎn)品僅供生命科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷、治療或人體相關(guān)應(yīng)用。

2. 安全操作規(guī)范：緩沖液含0.09%疊氮化鈉，操作時請佩戴實(shí)驗(yàn)手套和護(hù)目鏡，避免皮膚接觸或吸入。

3. 交叉反應(yīng)性說明：本抗體可同時識別beta Actin和gamma Actin，在需要特異性區(qū)分兩種異構(gòu)體的實(shí)驗(yàn)中請謹(jǐn)慎使用。

4. 批次驗(yàn)證：盡管濃度已標(biāo)準(zhǔn)化為1000 ug/ml，不同批次間可能存在細(xì)微差異，建議收到新抗體后進(jìn)行稀釋度驗(yàn)證。

本抗體憑借其超高的檢測靈敏度（WB高達(dá)1:25,000）、人鼠跨物種反應(yīng)性以及明確優(yōu)化的IHC修復(fù)條件，是蛋白表達(dá)定量、細(xì)胞定位研究以及多實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化中的可靠內(nèi)參工具。