IGFBP-6 ELISA用于測(cè)定人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品中的胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6（IGFBP-6）。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品 IGFBP-6 ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

 IGFBP-6 ELISA檢測(cè)原理：

該檢測(cè)基于多克隆抗體和在真核細(xì)胞中表達(dá)的重組IGFBP-6。這是一種夾心法，利用兩種高親和力的特異性抗體。首先，樣品中的IGFBP-6與微量滴定板上的固定抗體結(jié)合。在兩步序列中，生物素偶聯(lián)的抗IGFBP-6抗體和鏈霉抗生物素蛋白過(guò)氧化物酶結(jié)合。隨后，過(guò)氧化物酶催化酶反應(yīng)，導(dǎo)致藍(lán)色。藍(lán)色的強(qiáng)度取決于樣品中的分析物含量。通過(guò)加入停止溶液來(lái)停止反應(yīng)，并通過(guò)測(cè)量吸光度來(lái)量化顏色強(qiáng)度（黃色）。

樣本類型

血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本可用于本試驗(yàn)。研究了抗凝劑對(duì)本試劑盒中IGFBP-6測(cè)量的影響，包括相應(yīng)的EDTA血漿、肝素血漿和血清樣本。平均而言，EDTA（n=10）和肝素（n=5）血漿中血清IGFBP-6的恢復(fù)率分別為102%和98%。

樣本收集

使用標(biāo)準(zhǔn)靜脈穿刺進(jìn)行血液采樣。應(yīng)避免溶血樣本。

所需樣本體積：10 ?L

樣本穩(wěn)定性

在密封良好的樣本瓶中：

- 20-25°C儲(chǔ)存：最多2天

- -20°C儲(chǔ)存：至少1年

- 最多1次冷凍-解凍周期

在分離凝血和/或細(xì)胞成分后，建議盡快冷藏或冷凍樣本，并避免超過(guò)1次冷凍-解凍周期。隨著周期的增加，觀察到樣本依賴的信號(hào)增加。

干擾

通常應(yīng)避免溶血、黃疸和脂血樣本。通過(guò)向血清樣本中添加甘油三酯、血紅蛋白或膽紅素，并測(cè)量IGFBP-6的恢復(fù)，進(jìn)行了干擾測(cè)試。在100 mg/mL、5 mg/mL和200 ?g/mL的濃度下，未檢測(cè)到顯著（<30%）干擾。

樣本稀釋

- 稀釋：用稀釋緩沖液VP稀釋1:51

- 在PE/PP管中取500 ?L稀釋緩沖液VP（在較大的系列中推薦使用重復(fù)吸管）；加入10 ?L樣本（稀釋1:51）。對(duì)于雙重測(cè)定，必須在試驗(yàn)中使用兩個(gè)100 ?L的樣本。

- 注意：血清和血漿樣本至少需要用稀釋緩沖液VP稀釋1:20。

- 根據(jù)預(yù)期的IGFBP-6值，樣本可以進(jìn)一步稀釋在稀釋緩沖液中。

- 樣本稀釋后的穩(wěn)定性：在20-25°C下最多1小時(shí)。

通過(guò)稀釋（1:5至1:640）具有不同IGFBP-6含量的天然血清（樣品1-3）來(lái)測(cè)試試劑盒的線性。圖2顯示了預(yù)期濃度和測(cè)量濃度的比較。很明顯，1:10的稀釋不足以使所有樣品呈線性。這些結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析符合NCCLS/CLSI EP6-A 2003標(biāo)準(zhǔn)。線性要求最小稀釋度≥1:20。樣品稀釋的線性在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)是可接受的。

與理論預(yù)期濃度相比，y軸上顯示了測(cè)量的IGFBP-6濃度的線性。如果稀釋度為1:20，則給出濃度高達(dá)0.5 ng/mL的線性關(guān)系。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng)。

作為ALPCO在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。