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這種貓總IgE檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法(ELISA),用于檢測(cè)貓血清或血漿中IgE的測(cè)定。僅供研究使用。不用于診斷程序。
作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品IgE(貓)ELISA, 96孔。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
IgE(貓)ELISA, 96孔 | ALP-41-IGEFE-E01 | 查看 |
IgE(貓)ELISA, 96孔檢測(cè)原理:
雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)的原理在圖1中表示。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中,樣本中的IgE與已經(jīng)吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgE抗體發(fā)生反應(yīng)。洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合的抗IgE抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的IgE形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后,通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)來檢測(cè)結(jié)合的酶。結(jié)合酶的量與測(cè)試樣本中IgE的濃度成正比;因此,450納米處的吸光度是測(cè)試樣本中IgE濃度的量度。測(cè)試樣本中的IgE量可以通過從標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行插值,并根據(jù)樣本稀釋進(jìn)行校正。

未提供但必需的材料
精密移液管(2 ?l至100 ?l)用于制作和分發(fā)稀釋液
試管
微孔板洗滌/抽吸器或噴霧瓶
蒸餾水或去離子水
微孔板讀數(shù)器
用于準(zhǔn)備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
計(jì)時(shí)器
樣本收集用的離心機(jī)
血漿樣本收集用的抗凝劑
樣本收集和處理
所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險(xiǎn)物品。在處理和處置時(shí)遵循通用預(yù)防措施。如果血液樣本出現(xiàn)凝血、嚴(yán)重溶血、脂血,或樣本的完整性受到關(guān)注,應(yīng)做記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。下面列出的樣本收集和儲(chǔ)存條件是作為一般指導(dǎo)方針。樣本的穩(wěn)定性尚未評(píng)估。
血清樣本 - 應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。血液凝固后通過離心分離血清。移除血清并立即進(jìn)行檢測(cè)或分裝后儲(chǔ)存于-80°C(最好)或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
血漿樣本 - 應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中,然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行檢測(cè)或分裝后儲(chǔ)存于-80°C(最好)或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
已知干擾物質(zhì) - 疊氮化物和硫柳汞在高于0.1%的濃度下會(huì)抑制酶反應(yīng)。
樣本稀釋
檢測(cè)要求在使用前對(duì)每個(gè)測(cè)試樣本進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行檢測(cè)時(shí),所有樣本都應(yīng)以雙份進(jìn)行檢測(cè)。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋比例應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度,以便稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本水平,在運(yùn)行整個(gè)板之前,強(qiáng)烈建議對(duì)一個(gè)或兩個(gè)代表性樣本進(jìn)行連續(xù)稀釋。使用前立即稀釋樣本,并在2小時(shí)內(nèi)使用。
血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋比例為1:1,000。要準(zhǔn)備1:1,000的樣本稀釋液,將5 ?L的樣本轉(zhuǎn)移到495 ?L的1X稀釋液中。這會(huì)產(chǎn)生1:100的稀釋液。接下來,將1:100的稀釋液通過轉(zhuǎn)移50 ?L到450 ?L的1X稀釋液中進(jìn)行稀釋。這會(huì)產(chǎn)生1:1,000的稀釋液。在每個(gè)階段徹底混合。
試劑準(zhǔn)備
使用前將所有試劑置于室溫(16°C至25°C)。
稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液是5倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水按1:5稀釋(1份緩沖液濃縮液,4份dH2O)。
洗滌液濃縮液 - 提供的洗滌液是20倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋(1份緩沖液濃縮液,19份dH2O)。當(dāng)儲(chǔ)存溫度較低時(shí),濃縮液中可能出現(xiàn)結(jié)晶。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解結(jié)晶。
酶-抗體結(jié)合物 - 通過向每個(gè)微孔板測(cè)試條添加10?L酶-抗體結(jié)合物至990?L的1X稀釋液中,計(jì)算每個(gè)微孔板測(cè)試條所需的工作結(jié)合物溶液量。使用前立即稀釋,并避光。均勻混合,但要輕柔。避免起泡。
預(yù)涂層ELISA微孔板 - 即開即用。揭開箔袋,從袋中取出板。移除并放回所有未使用的條和孔至袋中,并重新密封,連同干燥劑。
貓IgE校準(zhǔn)物 - 根據(jù)批次特定的分析證書準(zhǔn)備。
ALPCO產(chǎn)品種類多樣,可測(cè)樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。
作為ALPCO在中國區(qū)域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。

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