IgE檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于定量測定人血漿和血清樣本中的免疫球蛋白E（IgE）。用于研究用途只有。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品IgE ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

IgE ELISA檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）的原理在圖1中展示。在這個檢測中，樣本中存在的IgE與已經(jīng)吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgE抗體發(fā)生反應(yīng)。經(jīng)過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗IgE抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的IgE形成復(fù)合物。在另一個洗滌步驟之后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來檢測與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合酶的量與被測試樣本中IgE的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣本中IgE濃度的量度。測試樣本中的IgE量可以通過從標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行插值，并根據(jù)樣本稀釋進(jìn)行校正。

未提供但必需的材料

? 精密移液管（2 ?L至1000 ?L）用于制作和分發(fā)稀釋液

? 試管

? 噴霧瓶或微孔板洗滌/抽吸器

? 蒸餾水或去離子水

? 微孔板讀數(shù)器

? 用于準(zhǔn)備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

? 計時器

? 抗凝劑（用于血漿樣本收集）

? 離心機(jī)

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險物品。在處理和處置時遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝血、嚴(yán)重溶血、脂血，或樣本的完整性受到關(guān)注，應(yīng)做記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

下面列出的樣本收集和儲存條件是作為一般指導(dǎo)方針。樣本的穩(wěn)定性尚未評估。

? 血清樣本：應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。血液凝固后通過離心分離血清。移除血清并立即進(jìn)行檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

? 血漿樣本：應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

? 已知干擾物質(zhì)：疊氮化物和硫柳汞在高于0.1%的濃度下會抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋

檢測要求在使用前對每個測試樣本進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行檢測時，所有樣本都應(yīng)以雙份進(jìn)行檢測。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋比例應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，以便稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，在運行整個板之前，強(qiáng)烈建議對一個或兩個代表性樣本進(jìn)行連續(xù)稀釋。

? 血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋比例為1:200。要準(zhǔn)備1:200的樣本稀釋液，將2 ?L的樣本轉(zhuǎn)移到398 ?L的1X稀釋液中。這樣就得到了1:200的稀釋液。徹底混合。

結(jié)果計算

從所有孔的測試值中減去平均背景值（標(biāo)準(zhǔn)零的平均吸光度讀數(shù)）。

對每個標(biāo)準(zhǔn)的平均讀數(shù)進(jìn)行平均，并使用結(jié)果構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過使用能夠生成四參數(shù)邏輯曲線擬合的計算機(jī)軟件來減少數(shù)據(jù)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對數(shù)據(jù)的擬合將不夠精確。

從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值測試樣本值。校正血清稀釋因子，以得出原始樣本中的IgE濃度。

附錄A – 參考血清信息

本試劑盒中包含一瓶參考血清。請參閱隨附的產(chǎn)品資料表以獲取批次特定信息。請注意以下事項：

參考血清可以在2-8°C下儲存長達(dá)1周，如果儲存時間更長，則必須冷凍。如果正確儲存，直到有效期前都是穩(wěn)定的。

參考血清應(yīng)適當(dāng)稀釋以適應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線。請參閱產(chǎn)品資料表以獲取稀釋說明。

在移液樣本（程序部分）時，也要以雙份移液參考血清。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。