巖藻糖Fucose特異性地與結(jié)合在α1,3中的蛋白質(zhì)N-聚糖上的巖藻糖殘基發(fā)生交叉反應(yīng)。這種殘基是植物蛋白N-聚糖的特征，在動(dòng)物蛋白N-聚糖中不存在。將該殘留物加入高爾基體中。

艾美捷巖藻糖Fucose：

貨號(hào)：AS07-268

免疫原：核心巖藻糖殘基通過(guò)α1,3連接至N-糖鏈。

宿主：兔子

克隆性：多克隆

純度：免疫原親和純化的血清，溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液（PBS）中。

形式：凍干

數(shù)量：50 ?g

復(fù)溶：復(fù)溶時(shí)加入50 ?l無(wú)菌水。

儲(chǔ)存：凍干品/復(fù)溶后儲(chǔ)存于-20°C；復(fù)溶后請(qǐng)分裝保存，避免反復(fù)凍融。打開(kāi)前請(qǐng)短暫離心管子，以避免因物質(zhì)粘附在管蓋或管壁上而導(dǎo)致的損失。

測(cè)試應(yīng)用：酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、免疫定位（IL）、西方印跡（WB）

推薦稀釋度：0.5 ?g/ml（ELISA），1:40（IL），1 ?g/10 ml（WB）

預(yù)期 | 表觀分子量：10 - 100 kDa（針對(duì)各種糖蛋白）

確認(rèn)的反應(yīng)性：高等植物、Phaeodactylum tricornutum（硅藻）

預(yù)測(cè)的反應(yīng)性：高等植物、Phaeodactylum tricornutum

未反應(yīng)的：目前尚未發(fā)現(xiàn)與預(yù)測(cè)反應(yīng)性不符的已知例外。

圖：抗巖藻糖抗體與PLA2（磷脂酶A2）和鏈霉親和素（Avidin）呈陽(yáng)性反應(yīng)，而與去唾液酸胎球蛋白（asialofetuin）呈陰性反應(yīng)。這表明該抗體僅識(shí)別α1,3巖藻糖表位。

對(duì)于每份樣品，將1 ?g純化蛋白用Laemmli樣品緩沖液在100°C下變性10分鐘，隨后加載至4-12%的Bis-Tris凝膠上，并通過(guò)半干法轉(zhuǎn)印至硝酸纖維素膜，轉(zhuǎn)印時(shí)間為1小時(shí)15分鐘。膜在TBST中過(guò)夜飽和，期間不斷攪拌。膜在室溫下用TBST稀釋至1:5000的濃度，與一抗孵育2小時(shí)，期間不斷攪拌。棄去抗體溶液，用TBST快速?zèng)_洗后，膜在TBST中洗滌3次，每次15分鐘。膜在TBST中稀釋至1:50,000的濃度，與二抗（山羊抗兔IgG，辣根過(guò)氧化物酶偶聯(lián)，AS09 602，批號(hào)1707，來(lái)自AGRISE

巖藻糖Fucose文獻(xiàn)參考：

Xu et al. (2023). The Golgi-localized transporter OsPML4 contributes to manganese homeostasis in rice. Plant Sci. 2023 Dec 2:339:111935.doi: 10.1016/j.plantsci.2023.111935.

Zhang et al. (2018). An important role of L -fucose biosynthesis and protein fucosylation genes in Arabidopsis immunity. New Phytol. 2018 Dec 15. doi: 10.1111/nph.15639.

Jansing et al. (2018). CRISPR/Cas9-mediated knockout of six glycosyltransferase genes in Nicotiana benthamiana for the production of recombinant proteins lacking β-1,2-xylose and core α-1,3-fucose. Plant Biotechnol J. 2018 Jul 3. doi: 10.1111/pbi.12981.

Nakanishi et al. (2017). Protection of Human Colon Cells from Shiga Toxin by Plant-based Recombinant Secretory IgA. Sci Rep. 2017 Apr 3;7:45843. doi: 10.1038/srep45843. (ELISA)

Hanania et al. (2017). Establishment of a tobacco BY2 cell line devoid of plant specific xylose and fucose as a platform for the production of biotherapeutic proteins. Plant Biotechnol J. 2017 Feb 3. doi: 10.1111/pbi.12702.

Ebert et al. (2015). Identification and Characterization of a Golgi-Localized UDP-Xylose Transporter Family from Arabidopsis. Plant Cell. 2015 Mar 24. pii: tpc.114.133827.

Lehtim?ki et al. (2014). Posttranslational modifications of FERREDOXIN-NADP+ OXIDOREDUCTASE in Arabidopsis chloroplasts. Plant Physiol. 2014 Dec;166(4):1764-76. doi: 10.1104/pp.114.249094

Baiet et all. (2010). N-glycans of Phaeodactylum tricornutum diatom and functional characterization of its N-acetylglucosaminyltransferase I enzyme. J Biol. Chem. Dec 17.